摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
主要缩略语表(Abbreviations) | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 研究问题的由来 | 第13页 |
1.2 肠上皮细胞黏膜屏障及紧密连接简介 | 第13-15页 |
1.3 氧化应激对肠道结构及功能的影响 | 第15-17页 |
1.3.1 氧化应激简介及其危害 | 第15-16页 |
1.3.2 氧化应激对肠道结构及功能损伤的影响 | 第16-17页 |
1.4 氧化应激与线粒体自噬概述 | 第17-19页 |
1.4.1 细胞自噬与线粒体自噬 | 第17页 |
1.4.2 氧化应激对线粒体自噬的影响作用 | 第17-19页 |
1.5 SIRT1在肠道氧化损伤中的作用 | 第19-22页 |
1.5.1 SIRT1与氧化应激 | 第19-20页 |
1.5.2 SIRT1在肠道损伤中的作用 | 第20-21页 |
1.5.3 SIRT1与线粒体自噬 | 第21-22页 |
1.6 研究目的和意义 | 第22-24页 |
2 实验材料 | 第24-27页 |
2.1 引物及核苷酸序列 | 第24页 |
2.2 细胞 | 第24页 |
2.3 主要试剂和药品 | 第24-25页 |
2.4 主要培养基和缓冲液 | 第25-26页 |
2.5 主要仪器 | 第26-27页 |
3 实验方法 | 第27-34页 |
3.1 细胞培养 | 第27页 |
3.2 细胞总RNA提取和反转录 | 第27-28页 |
3.2.1 提取细胞总RNA | 第27页 |
3.2.2 反转录 | 第27-28页 |
3.3 荧光定量PCR(qPCR) | 第28页 |
3.4 细胞总蛋白提取 | 第28-29页 |
3.5 BCA法测定蛋白浓度 | 第29页 |
3.6 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第29-31页 |
3.6.1 SDS-PAGE电泳 | 第29-31页 |
3.6.2 转膜 | 第31页 |
3.6.3 杂交 | 第31页 |
3.6.4 显影 | 第31页 |
3.7 细胞活性氧(ROS)水平检测 | 第31-32页 |
3.8 线粒体膜电位检测 | 第32页 |
3.9 数据统计 | 第32-34页 |
4 结果与分析 | 第34-45页 |
4.1 氧化应激对猪肠上皮细胞损伤的影响 | 第34-35页 |
4.1.1 氧化应激对细胞ROS产生及线粒体膜电位水平的影响 | 第34页 |
4.1.2 氧化应激对猪肠上皮细胞黏膜屏障的影响 | 第34-35页 |
4.2 氧化应激对猪肠上皮细胞线粒体自噬的影响 | 第35-37页 |
4.3 氧化应激对猪肠上皮细胞SIRT1/PGC-1α通路的影响 | 第37-38页 |
4.4 激活剂与抑制剂对猪肠上皮细胞SIRT1/PGC-1α通路的影响 | 第38-40页 |
4.5 激活SIRT1可增强氧化应激诱导的猪肠上皮细胞线粒体自噬水平 | 第40-42页 |
4.6 SIRT1对猪肠上皮细胞氧化损伤的修复作用 | 第42-45页 |
4.6.1 激活SIRT1对细胞中ROS及线粒体膜电位的影响 | 第42-43页 |
4.6.2 激活SIRT1对细胞黏膜屏障的影响 | 第43-45页 |
5 讨论 | 第45-50页 |
5.1 氧化应激对猪肠道损伤的影响 | 第45-46页 |
5.2 氧化应激与线粒体自噬的联系 | 第46-47页 |
5.3 SIRT1抗氧化应激作用与线粒体自噬的联系 | 第47-48页 |
5.4 SIRT1对猪肠上皮细胞氧化损伤的作用 | 第48-50页 |
6 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
附录 | 第60-61页 |
攻读硕士学位期间已发表论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |