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SIRT1调节线粒体自噬对猪肠上皮细胞氧化损伤的影响

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
主要缩略语表(Abbreviations)第12-13页
1 文献综述第13-24页
    1.1 研究问题的由来第13页
    1.2 肠上皮细胞黏膜屏障及紧密连接简介第13-15页
    1.3 氧化应激对肠道结构及功能的影响第15-17页
        1.3.1 氧化应激简介及其危害第15-16页
        1.3.2 氧化应激对肠道结构及功能损伤的影响第16-17页
    1.4 氧化应激与线粒体自噬概述第17-19页
        1.4.1 细胞自噬与线粒体自噬第17页
        1.4.2 氧化应激对线粒体自噬的影响作用第17-19页
    1.5 SIRT1在肠道氧化损伤中的作用第19-22页
        1.5.1 SIRT1与氧化应激第19-20页
        1.5.2 SIRT1在肠道损伤中的作用第20-21页
        1.5.3 SIRT1与线粒体自噬第21-22页
    1.6 研究目的和意义第22-24页
2 实验材料第24-27页
    2.1 引物及核苷酸序列第24页
    2.2 细胞第24页
    2.3 主要试剂和药品第24-25页
    2.4 主要培养基和缓冲液第25-26页
    2.5 主要仪器第26-27页
3 实验方法第27-34页
    3.1 细胞培养第27页
    3.2 细胞总RNA提取和反转录第27-28页
        3.2.1 提取细胞总RNA第27页
        3.2.2 反转录第27-28页
    3.3 荧光定量PCR(qPCR)第28页
    3.4 细胞总蛋白提取第28-29页
    3.5 BCA法测定蛋白浓度第29页
    3.6 蛋白免疫印迹(Western Blot)第29-31页
        3.6.1 SDS-PAGE电泳第29-31页
        3.6.2 转膜第31页
        3.6.3 杂交第31页
        3.6.4 显影第31页
    3.7 细胞活性氧(ROS)水平检测第31-32页
    3.8 线粒体膜电位检测第32页
    3.9 数据统计第32-34页
4 结果与分析第34-45页
    4.1 氧化应激对猪肠上皮细胞损伤的影响第34-35页
        4.1.1 氧化应激对细胞ROS产生及线粒体膜电位水平的影响第34页
        4.1.2 氧化应激对猪肠上皮细胞黏膜屏障的影响第34-35页
    4.2 氧化应激对猪肠上皮细胞线粒体自噬的影响第35-37页
    4.3 氧化应激对猪肠上皮细胞SIRT1/PGC-1α通路的影响第37-38页
    4.4 激活剂与抑制剂对猪肠上皮细胞SIRT1/PGC-1α通路的影响第38-40页
    4.5 激活SIRT1可增强氧化应激诱导的猪肠上皮细胞线粒体自噬水平第40-42页
    4.6 SIRT1对猪肠上皮细胞氧化损伤的修复作用第42-45页
        4.6.1 激活SIRT1对细胞中ROS及线粒体膜电位的影响第42-43页
        4.6.2 激活SIRT1对细胞黏膜屏障的影响第43-45页
5 讨论第45-50页
    5.1 氧化应激对猪肠道损伤的影响第45-46页
    5.2 氧化应激与线粒体自噬的联系第46-47页
    5.3 SIRT1抗氧化应激作用与线粒体自噬的联系第47-48页
    5.4 SIRT1对猪肠上皮细胞氧化损伤的作用第48-50页
6 结论第50-51页
参考文献第51-60页
附录第60-61页
    攻读硕士学位期间已发表论文第60-61页
致谢第61页

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