| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 双生病毒简介 | 第13-14页 |
| 2 棉花曲叶病 | 第14-16页 |
| 3 木尔坦棉花曲叶病毒简介 | 第16-17页 |
| 3.1 木尔坦棉花曲叶病毒发生及危害 | 第16页 |
| 3.2 木尔坦棉花曲叶病毒的基因组结构及功能 | 第16-17页 |
| 4 V2基因功能研究进展 | 第17-18页 |
| 5 亚细胞定位在蛋白质功能预测上的应用 | 第18-19页 |
| 6 酵母双杂交系统 | 第19-21页 |
| 6.1 酵母双杂交原理 | 第19-20页 |
| 6.2 酵母双杂交系统的应用 | 第20页 |
| 6.3 酵母双杂交系统的优点及局限性 | 第20-21页 |
| 7 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 CLCuMuV V2亚细胞定位特征分析 | 第23-39页 |
| 1 材料和方法 | 第23-31页 |
| 1.1 材料 | 第23页 |
| 1.2 试剂 | 第23页 |
| 1.3 植物总DNA的提取 | 第23-24页 |
| 1.4 CLCuMuV V2基因克隆 | 第24-26页 |
| 1.5 CLCuMuV V2-YFP融合表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 1.6 CLCuMuV V2蛋白的亚细胞定位 | 第27-28页 |
| 1.7 CLCuMuV V2转录产物的RT-PCR检测 | 第28-30页 |
| 1.8 CLCuMuV V2蛋白的Western blot分析 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-36页 |
| 2.1 CLCuMuV V2基因克隆 | 第31-32页 |
| 2.2 CLCuMuV V2蛋白序列特征分析 | 第32-33页 |
| 2.3 CLCuMuV V2-YFP融合表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.4 CLCuMuV V2蛋白亚细胞定位特征分析 | 第34-35页 |
| 2.5 V2-YFP的转录及表达检测 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 CLCuMuV V2与病毒编码蛋白的互作 | 第39-49页 |
| 1 材料与方法 | 第39-42页 |
| 1.1 材料 | 第39页 |
| 1.2 试剂 | 第39页 |
| 1.3 植物总DNA的提取 | 第39页 |
| 1.4 CLCuMuV编码基因克隆 | 第39-40页 |
| 1.5 CLCuMuV基因酵母双杂交载体(AD/BK)的构建 | 第40-41页 |
| 1.6 酵母菌AH109感受态的制备 | 第41页 |
| 1.7 酵母双杂交验证毒性 | 第41-42页 |
| 1.8 酵母双杂交验证自激活及互作 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-46页 |
| 2.1 CLCuMuV编码病毒基因的扩增及克隆 | 第42-43页 |
| 2.2 CLCuMuV编码基因的酵母双杂交载体构建 | 第43-44页 |
| 2.3 CLCuMuV编码蛋白对酵母毒性验证及其自激活检测 | 第44-45页 |
| 2.4 酵母双杂交验证V2与CLCuMuV编码蛋白的互作 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 CLCuMuV V2蛋白自身互作关键区域鉴定 | 第49-55页 |
| 1 材料和方法 | 第49-50页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.2 试剂 | 第49页 |
| 1.3 V2的缺失突变体构建 | 第49-50页 |
| 1.4 V2缺失突变体酵母双杂交载体构建 | 第50页 |
| 1.5 酵母双杂交鉴定V2蛋白自身互作关键域 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-53页 |
| 2.1 V2的缺失突变体构建 | 第50-51页 |
| 2.2 V2缺失突变体酵母双杂交载体构建 | 第51-52页 |
| 2.3 酵母双杂交鉴定V2蛋白自身互作关键域 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 棉花GhRPS20的克隆及其与V2的体外互作验证 | 第55-63页 |
| 1 材料与方法 | 第55-57页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.2 试剂 | 第55页 |
| 1.3 棉花植物总RNA的提取 | 第55-56页 |
| 1.4 棉花GhRPS20基因克隆 | 第56-57页 |
| 1.5 GhRPS20酵母双杂交载体构建 | 第57页 |
| 1.6 GhRPS20-AD的毒性及自激活验证 | 第57页 |
| 1.7 GhRPS20与V2的互作验证 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-61页 |
| 2.1 棉花的GhRPS20基因克隆 | 第57-58页 |
| 2.2 棉花RPS20序列分析 | 第58-59页 |
| 2.3 GhRPS20酵母双杂交载体构建 | 第59-60页 |
| 2.4 GhRPS20对酵母毒性验证及其自激活检测 | 第60页 |
| 2.5 GhRPS20与V2互作验证 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 结论与展望 | 第63-65页 |
| 1 结论 | 第63页 |
| 2 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录Ⅰ 常用缓冲液及试剂配制方法 | 第75-77页 |
| 附录Ⅱ 载体图谱 | 第77-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
