缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第11-12页 |
文献回顾 | 第12-24页 |
实验一 MMP14、Survivin及Kras蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义 | 第24-37页 |
1 材料 | 第24-25页 |
1.1 病理标本 | 第24页 |
1.2 实验试剂 | 第24页 |
1.3 溶液配制 | 第24-25页 |
1.4 实验仪器 | 第25页 |
2 方法 | 第25-26页 |
2.1 实验方法及操作步骤 | 第25-26页 |
2.2 结果判定标准 | 第26页 |
2.3 统计学方法 | 第26页 |
3 结果 | 第26-34页 |
3.1 MMP14蛋白在胰腺癌、胰腺炎及正常胰腺组织中的表达情况 | 第26-27页 |
3.2 MMP14蛋白表达情况与临床病理参数的关系 | 第27-29页 |
3.3 Survivin蛋白在胰腺癌、胰腺炎及正常胰腺组织中的表达情况 | 第29页 |
3.4 Survivin蛋白表达情况与临床病理参数的关系 | 第29-31页 |
3.5 Kras蛋白在胰腺癌、胰腺炎及正常胰腺组织中的表达情况 | 第31页 |
3.6 Kras蛋白表达情况与临床病理参数的关系 | 第31-33页 |
3.7 染色结果 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
实验二 MMP14蛋白的表达、纯化 | 第37-58页 |
1 材料 | 第37-40页 |
1.1 菌株和质粒 | 第37页 |
1.2 试剂及试剂盒 | 第37页 |
1.3 常用溶液配制 | 第37-39页 |
1.4 主要仪器设备 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-48页 |
2.1 原核表达载体构建 | 第40-45页 |
2.1.1 p ET-28a-MMP14载体的构建 | 第40-45页 |
2.1.2 p ET30a-m MMP14原核表达载体的构建 | 第45页 |
2.2 目的基因的诱导 | 第45-47页 |
2.2.1 p ET28a-MMP14表达载体的的诱导 | 第45-47页 |
2.2.2 p ET30a-m MMP14表达载体的诱导 | 第47页 |
2.3 目的蛋白的纯化、鉴定 | 第47-48页 |
2.3.1 MMP14蛋白的纯化 | 第47页 |
2.3.2 Western blot法测定纯化后MMP14蛋白 | 第47-48页 |
2.3.3 m MMP14蛋白的纯化、鉴定 | 第48页 |
3 结果 | 第48-56页 |
3.1 原核表达载体的构建 | 第48-53页 |
3.1.1 p ET28a-MMP14表达载体的构建 | 第48-49页 |
3.1.2 p ET30a-m MMP14表达载体的构建 | 第49-53页 |
3.2 原核表达载体的诱导 | 第53-55页 |
3.2.1 MMP14蛋白的在E.coli BL21诱导表达 | 第53-54页 |
3.2.2 MMP14蛋白的在Rosetta (DE3)诱导表达 | 第54页 |
3.2.3 western blot检测MMP14蛋白的表达情况 | 第54-55页 |
3.2.4 m MMP14蛋白的在Rosetta (DE3)诱导表达 | 第55页 |
3.2.5 western blot检测m MMP14蛋白的表达情况 | 第55页 |
3.3 m MMP14蛋白的纯化 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
个人简历和研究成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |