摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
第一章 材料与方法 | 第9-19页 |
1.1 材料 | 第9页 |
1.2 主要设备及仪器 | 第9-10页 |
1.3 方法 | 第10-11页 |
1.3.1 组织标本来源 | 第10页 |
1.3.2 免疫组织化学染色法 | 第10-11页 |
1.3.3 结果判断 | 第11页 |
1.4 人宫颈癌细胞的培养 | 第11-12页 |
1.4.1 细胞复苏 | 第11页 |
1.4.2 细胞传代 | 第11-12页 |
1.5 细胞转染 | 第12页 |
1.6 Trizon法提RNA | 第12页 |
1.7 RT-PCR半定量检测目的基因 | 第12-14页 |
1.7.1 RNA逆转录为cDNA | 第12-13页 |
1.7.2 以cDNA为模板进行PCR扩增 | 第13-14页 |
1.8 细胞总蛋白的提取及目的蛋白的检测 | 第14-16页 |
1.8.1 提取总蛋白 | 第14页 |
1.8.2 BCA法测蛋白浓度 | 第14-15页 |
1.8.3 Western blot检测目的蛋白 | 第15-16页 |
1.8.3.1 SDS-PAGE电泳 | 第15页 |
1.8.3.2 电转移 | 第15页 |
1.8.3.3 免疫检测 | 第15-16页 |
1.8.3.4 化学发光 | 第16页 |
1.9 细胞增殖检测 | 第16页 |
1.10 Annexin V-PE双染法检测细胞凋亡 | 第16页 |
1.11 Hoechst33258核染色检测细胞凋亡 | 第16-17页 |
1.12 肿瘤细胞迁移实验 | 第17页 |
1.13 Transwell侵袭实验 | 第17-18页 |
1.14 统计学分析 | 第18-19页 |
第二章 结果 | 第19-30页 |
2.1 免疫组织化学技术检测组织中SIRT1的表达 | 第19-21页 |
2.2 RT-PCR半定量检测SiHa细胞中SIRT1 mRNA表达水平 | 第21-22页 |
2.3 Western blot检测SiHa细胞中相关蛋白的表达 | 第22-23页 |
2.4 细胞增殖实验检测结果 | 第23-24页 |
2.5 AnnexinV-PE双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第24-25页 |
2.6 Hoechst33258核染色检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
2.7 SIRT1 siRNA对宫颈癌SiHa细胞迁移能力的影响 | 第26-28页 |
2.8 SIRT1 siRNA对宫颈癌SiHa细胞侵袭能力的影响 | 第28-30页 |
第三章 讨论 | 第30-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
综述 | 第36-46页 |
参考文献 | 第42-46页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |