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SIRT1在宫颈癌发生中作用的初步研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第8-9页
第一章 材料与方法第9-19页
    1.1 材料第9页
    1.2 主要设备及仪器第9-10页
    1.3 方法第10-11页
        1.3.1 组织标本来源第10页
        1.3.2 免疫组织化学染色法第10-11页
        1.3.3 结果判断第11页
    1.4 人宫颈癌细胞的培养第11-12页
        1.4.1 细胞复苏第11页
        1.4.2 细胞传代第11-12页
    1.5 细胞转染第12页
    1.6 Trizon法提RNA第12页
    1.7 RT-PCR半定量检测目的基因第12-14页
        1.7.1 RNA逆转录为cDNA第12-13页
        1.7.2 以cDNA为模板进行PCR扩增第13-14页
    1.8 细胞总蛋白的提取及目的蛋白的检测第14-16页
        1.8.1 提取总蛋白第14页
        1.8.2 BCA法测蛋白浓度第14-15页
        1.8.3 Western blot检测目的蛋白第15-16页
            1.8.3.1 SDS-PAGE电泳第15页
            1.8.3.2 电转移第15页
            1.8.3.3 免疫检测第15-16页
            1.8.3.4 化学发光第16页
    1.9 细胞增殖检测第16页
    1.10 Annexin V-PE双染法检测细胞凋亡第16页
    1.11 Hoechst33258核染色检测细胞凋亡第16-17页
    1.12 肿瘤细胞迁移实验第17页
    1.13 Transwell侵袭实验第17-18页
    1.14 统计学分析第18-19页
第二章 结果第19-30页
    2.1 免疫组织化学技术检测组织中SIRT1的表达第19-21页
    2.2 RT-PCR半定量检测SiHa细胞中SIRT1 mRNA表达水平第21-22页
    2.3 Western blot检测SiHa细胞中相关蛋白的表达第22-23页
    2.4 细胞增殖实验检测结果第23-24页
    2.5 AnnexinV-PE双染流式细胞术检测细胞凋亡第24-25页
    2.6 Hoechst33258核染色检测细胞凋亡第25-26页
    2.7 SIRT1 siRNA对宫颈癌SiHa细胞迁移能力的影响第26-28页
    2.8 SIRT1 siRNA对宫颈癌SiHa细胞侵袭能力的影响第28-30页
第三章 讨论第30-32页
结论第32-33页
参考文献第33-36页
综述第36-46页
    参考文献第42-46页
攻读学位期间的研究成果第46-47页
致谢第47-48页

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