摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
一 文献综述 | 第9-18页 |
1 光合作用 | 第9页 |
2 隐藻 | 第9-10页 |
3 藻胆蛋白 | 第10-16页 |
3.1 红、蓝藻藻胆蛋白 | 第10页 |
3.2 隐藻藻胆蛋白 | 第10-16页 |
3.2.1 隐藻藻胆蛋白种类 | 第10页 |
3.2.2 隐藻藻胆蛋白的存在状态 | 第10-11页 |
3.2.3 隐藻藻胆蛋白结构 | 第11-14页 |
3.2.3.1 隐藻藻胆蛋白色基种类及分布 | 第11-12页 |
3.2.3.2 一级结构 | 第12-13页 |
3.2.3.3 空间结构 | 第13-14页 |
3.2.3.4 隐藻藻胆蛋白亚基的组装 | 第14页 |
3.2.4 隐藻藻胆蛋白的性质 | 第14-16页 |
3.2.4.1 光谱特性 | 第14-15页 |
3.2.4.2 构象稳定性 | 第15页 |
3.2.4.3 疏水特性 | 第15-16页 |
3.2.5 隐藻藻胆蛋白与膜上光合系统之间的关系 | 第16页 |
4 立题依据 | 第16-18页 |
二 实验材料与方法 | 第18-27页 |
1 实验材料 | 第18页 |
2 实验试剂 | 第18页 |
3 实验方法 | 第18-27页 |
3.1 蓝隐藻的培养和破碎 | 第18-19页 |
3.1.1 蓝隐藻的培养 | 第18-19页 |
3.1.2 蓝隐藻藻体破碎 | 第19页 |
3.2 蓝隐藻藻蓝蛋白的分离纯化 | 第19页 |
3.2.1 硫酸铵分级沉淀 | 第19页 |
3.2.2 凝胶过滤层析 | 第19页 |
3.2.3 光谱分析 | 第19页 |
3.3 藻蓝蛋白纯度的鉴定——非变性电泳 | 第19-20页 |
3.4 藻蓝蛋白亚基的定量分析 | 第20-21页 |
3.4.1 疏水层析 | 第20页 |
3.4.2 疏水层析中各组分SDS-PAGE | 第20-21页 |
3.5 藻蓝蛋白复合物的研究 | 第21-26页 |
3.5.1 藻蓝蛋白复合物的分离纯化 | 第21-23页 |
3.5.1.1 藻蓝蛋白复合物相对定量分析的指标选择 | 第21页 |
3.5.1.2 蔗糖密度梯度离心 | 第21-22页 |
3.5.1.3 硫酸铵沉淀法分离藻蓝蛋白复合物 | 第22页 |
3.5.1.4 疏水层析法分离藻蓝蛋白复合物 | 第22-23页 |
3.5.2 藻蓝蛋白复合物的性质研究 | 第23-26页 |
3.5.2.1 离心时间对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第23页 |
3.5.2.2 不同离心机型对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第23-24页 |
3.5.2.3 pH对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第24页 |
3.5.2.4 pH对纯化后藻蓝蛋白聚合的影响 | 第24-25页 |
3.5.2.5 磷酸盐缓冲液浓度对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第25-26页 |
3.5.2.6 藻蓝蛋白复合物的SDS-PAGE | 第26页 |
3.6 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物的冷冻电镜检测 | 第26-27页 |
3.6.1 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物的负染 | 第26页 |
3.6.2 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物冷冻样品的电镜观察 | 第26-27页 |
三 实验结果 | 第27-76页 |
1 蓝隐藻的培养和破碎 | 第27-28页 |
1.1 蓝隐藻的培养、收集 | 第27页 |
1.2 生长曲线的测定 | 第27-28页 |
2 蓝隐藻藻蓝蛋白的分离纯化 | 第28-33页 |
2.1 硫酸铵分级沉淀 | 第28-29页 |
2.2 凝胶过滤层析 | 第29-33页 |
2.2.1 洗脱曲线绘制 | 第29-30页 |
2.2.2 藻蓝蛋白光谱测定 | 第30-33页 |
2.3 PC-645样品的纯度检验——非变性电泳 | 第33页 |
3 藻蓝蛋白亚基的定量分析 | 第33-41页 |
3.1 疏水层析 | 第33-37页 |
3.2 疏水层析后各组分的光谱分析 | 第37-40页 |
3.3 疏水层析各组分的SDS-PAGE | 第40-41页 |
4 藻蓝蛋白复合物的研究 | 第41-76页 |
4.1 藻蓝蛋白复合物的分离纯化 | 第41-58页 |
4.1.1 蔗糖密度梯度离心 | 第41-46页 |
4.1.1.1 各条带吸收光谱的测定 | 第42页 |
4.1.1.2 各条带荧光光谱的测定 | 第42-46页 |
4.1.2 藻蓝蛋白大分子复合物相对定量分析的指标选择 | 第46-48页 |
4.1.3 藻蓝蛋白复合物的分离纯化 | 第48-58页 |
4.1.3.1 硫酸铵沉淀法 | 第48-53页 |
4.1.3.2 疏水层析法纯化藻蓝蛋白复合物 | 第53-56页 |
4.1.3.3 SDS-PAGE | 第56-58页 |
4.2 藻蓝蛋白复合物纯化方法优化及性质研究 | 第58-72页 |
4.2.1 离心时间对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第58-59页 |
4.2.2 不同离心机型对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第59-60页 |
4.2.3 pH对藻蓝蛋白复合物的影响 | 第60-65页 |
4.2.3.1 破藻时PBS缓冲液pH对藻蓝蛋白复合物含量的影响 | 第60-62页 |
4.2.3.2 离心时PBS缓冲液pH变化对分离条件的影响 | 第62-64页 |
4.2.3.3 pH对纯化后藻蓝蛋白聚合的影响 | 第64-65页 |
4.2.4 磷酸盐缓冲液浓度变化对藻蓝蛋白复合物含量的影响 | 第65-72页 |
4.2.4.1 破藻时PBS缓冲液浓度对藻蓝蛋白复合物含量的影响 | 第65-70页 |
4.2.4.2 离心时PBS缓冲液浓度对藻蓝蛋白复合物分离条件的影响 | 第70-72页 |
4.3 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物的冷冻电镜检测 | 第72-76页 |
4.3.1 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物的负染 | 第72-74页 |
4.3.2 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物1冷冻样品 | 第74页 |
4.3.3 蓝隐藻藻蓝蛋白复合物2冷冻样品 | 第74-76页 |
四 讨论 | 第76-79页 |
1 发光亚基β_2的探究 | 第76-77页 |
2 隐藻藻蓝蛋白复合物的研究 | 第77-79页 |
2.1 隐藻藻蓝蛋白复合物的存在 | 第77页 |
2.2 隐藻藻蓝蛋白复合物的分离纯化及组成 | 第77-78页 |
2.3 隐藻藻蓝蛋白分离条件优化 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
发表论文情况 | 第85-86页 |