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组织因子靶向性纳米粒介导siRNA的靶向递送

中文摘要第9-14页
Abstract第14-19页
前言第20-22页
第一部分 载组织因子siRNA的EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒的构建及表征第22-41页
    1 仪器和材料第23-25页
        1.1 仪器第23-24页
        1.2 材料和试剂第24-25页
    2 实验方法第25-34页
        2.1 大鼠TF-siRNA片段的筛选第25-30页
        2.2 载TF-siRNA的PEG-PLGA纳米粒的制备第30-31页
        2.3 EGFP-EGF1结合PEG-PLGA纳米粒第31页
        2.4 TF-siRNA-EGFP-EGF1-PLGA纳米粒的表征第31-33页
        2.5 ENP和NP载siRNA的载药量和体外释放第33-34页
    3 实验结果第34-39页
        3.1 TF-siRNA的筛选第34-35页
        3.2 载TF-siRNA的NP和ENP的表征第35-37页
        3.3 TF-siRNA-ENP的免疫电镜第37页
        3.4 TF-siRNA-ENP的EGFP-EGF1蛋白连接效率第37页
        3.5 载TF-siRNA纳米粒的载药量及包封率第37-38页
        3.6 TF-siRNA-ENP的体外释放第38-39页
    4 讨论第39-41页
第二部分 载组织因子siRNA的EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒的靶向性及体外评价第41-63页
    1 仪器和材料第42-44页
        1.1 仪器第42页
        1.2 材料和试剂第42-43页
        1.3 实验动物第43-44页
    2 实验方法第44-52页
        2.1 大鼠BMECs原代细胞培养鉴定及体外损伤模型的建立和鉴定第44-46页
        2.2 载TF-siRNA和香豆素-6的ENP和NP的制备第46页
        2.3 香豆素-6体外HPLC分析方法的建立第46-47页
        2.4 比浊法测定载香豆素-6纳米粒的浓度第47页
        2.5 香豆素-6的载药量和包封率第47-48页
        2.6 大鼠BMECs对载siRNA和香豆素-6的ENP的摄取及siRNA的示踪第48-49页
        2.7 TF-siRNA-ENP对BMECs的毒性评价第49-50页
        2.8 TF-siRNA-ENP对损伤BMECs的TF mRNA的影响第50页
        2.9 TF-siRNA-ENP对损伤BMECs的TF蛋白表达的影响第50-51页
        2.10 TF-siRNA-ENP对损伤BMECs表达TF活性的影响第51-52页
    3 实验结果第52-61页
        3.1 大鼠BMECs原代细胞免疫荧光鉴定第52-53页
        3.2 香豆素-6体外HPLC分析方法的建立第53页
        3.3 香豆素-6的载药量和包封率第53-54页
        3.4 大鼠BMECs对载siRNA和香豆素-6的ENP和NP的摄取和siRNA的示踪第54-56页
        3.5 TF-siRNA-ENP的体外毒性评价第56-58页
        3.6 TF-siRNA-ENP对损伤BMECs表达TF mRNA的影响第58页
        3.7 TF-siRNA-ENP对损伤BMECs的TF蛋白表达的影响第58-60页
        3.8 TF-siRNA-ENP对损伤BMECs表达TF活性的影响第60-61页
    4 讨论第61-63页
第三部分 EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒在动脉粥样硬化模型中靶向性的研究第63-88页
    1 仪器和材料第65-66页
        1.1 仪器第65页
        1.2 材料和试剂第65-66页
        1.3 实验动物第66页
    2 实验方法第66-77页
        2.1 小鼠VSMCs的原代培养和鉴定第66-67页
        2.2 高表达TF的细胞模型的建立及鉴定第67-69页
        2.3 载Dir纳米粒的合成和鉴定第69-72页
        2.4 载香豆素-6纳米粒的细胞摄取第72-74页
        2.5 小鼠AS模型的建立和鉴定第74-75页
        2.6 Dir-ENP在AS模型小鼠体内组织分布第75-77页
    3 实验结果第77-86页
        3.1 小鼠原代VSMCs的鉴定第77页
        3.2 体外高表达TF细胞模型的鉴定第77-79页
        3.3 Dir载药量的测定第79页
        3.4 载香豆素-6纳米粒的细胞摄取第79-82页
        3.5 小鼠AS模型的鉴定第82-83页
        3.6 Dir-ENP在AS模型小鼠体内组织分布第83-86页
    4 讨论第86-88页
第四部分 载CCR2-shRNA的EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒的体外研究第88-110页
    1 仪器和材料第90-91页
        1.1 仪器第90页
        1.2 材料和试剂第90页
        1.3 实验动物第90-91页
    2 实验方法第91-99页
        2.1 AS模型小鼠主动脉中TF和CCR2表达的鉴定第91-92页
        2.2 体外表达TF和CCR2细胞模型的建立及鉴定第92-93页
        2.3 CCR2-shRNA的质粒提取第93-94页
        2.4 载CCR2-shRNA纳米粒的制备第94-95页
        2.5 CCR2-shRNA-ENP的体外毒性研究第95-96页
        2.6 CCR2-shRNA-ENP对细胞模型CCR2表达的影响第96-98页
        2.7 CCR2-shRNA-ENP对细胞迁移能力的影响第98-99页
    3 实验结果第99-109页
        3.1 AS模型小鼠主动脉中TF和CCR2表达的鉴定第99-100页
        3.2 体外表达TF和CCR2细胞模型的鉴定第100-102页
        3.3 CCR2-shRNA-ENP的体外毒性第102-104页
        3.4 CCR2-shRNA-ENP对细胞模型CCR2表达的影响第104-108页
        3.5 CCR2-shRNA-ENP对细胞迁移的影响第108-109页
    4 讨论第109-110页
参考文献第110-124页
全文总结第124-126页
综述第126-134页
    参考文献第129-134页
英文缩写对照第134-136页
致谢第136-138页
附录一 攻读学位期间发表论文目录第138页
附录二 攻读学位期间参与课题和会议第138页

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