| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 一 前言 | 第15-26页 |
| 1.1 植物雌配子体的发育 | 第15-21页 |
| 1.1.1 植物配子体发生的遗传调控 | 第16-17页 |
| 1.1.2 植物大孢子发生的遗传调控 | 第17-19页 |
| 1.1.3 大孢子母细胞的特化 | 第19-21页 |
| 1.2 ARP6在植物发育过程的功能研究 | 第21-23页 |
| 1.2.1 ARP蛋白的功能研究 | 第21-22页 |
| 1.2.2 H2A.Z的沉积与基因的转录调控 | 第22-23页 |
| 1.3 KLU基因在植物配子体发育过程的作用 | 第23-24页 |
| 1.4 本课题的科学意义 | 第24-26页 |
| 二 实验材料与方法 | 第26-39页 |
| 2.1 实验材料与生长条件 | 第26页 |
| 2.2 DIC透明观察胚珠结构 | 第26页 |
| 2.3 激光共聚焦显微镜观察胚珠 | 第26-27页 |
| 2.4 胼胝质染色 | 第27页 |
| 2.5 整体原位杂交 | 第27-30页 |
| 2.6 Western blot | 第30-32页 |
| 2.7 整体免疫荧光 | 第32页 |
| 2.8 载体构建 | 第32-33页 |
| 2.9 RNA-seq和数据分析 | 第33页 |
| 2.10 RT-qPCR | 第33页 |
| 2.11 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第33-35页 |
| 2.12 核小体占位分析 | 第35-36页 |
| 2.13 胚珠自发荧光观察 | 第36-37页 |
| 2.14 FISH | 第37-39页 |
| 三 结果分析 | 第39-79页 |
| 3.1 拟南芥大孢子发生过程中特异表达基因鉴定 | 第39-42页 |
| 3.2 KLU调控大孢子母细胞减数分裂 | 第42-46页 |
| 3.3 ARP6和KLU共同调控雌配子体发育 | 第46-51页 |
| 3.3.1 arp6 klu双突变体植株的鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.2 雌配子发育缺陷引起arp6 klu结实率下降 | 第47-49页 |
| 3.3.3 arp6 klu双突变体成熟期胚珠发育异常 | 第49-51页 |
| 3.4 ARP6和KLU影响正常的大孢子母细胞发生 | 第51-55页 |
| 3.4.1 arp6 klu双突变体中多个细胞具MMC特性 | 第51-53页 |
| 3.4.2 多个MMC类似细胞中仅一个进入减数分裂 | 第53-55页 |
| 3.5 通过转录组数据鉴定在arp6 klu双突变体中特异下调表达的基因 | 第55-57页 |
| 3.6 ARP6和KLU下游基因WRKY28参与大孢子发生 | 第57-66页 |
| 3.6.1 基因组编辑进行敲除WRKY28基因 | 第58-61页 |
| 3.6.2 wrky28-Cas9的转基因植株表型分析 | 第61-64页 |
| 3.6.3 嵌合抑制子沉默WRKY28基因后植株表型分析 | 第64-66页 |
| 3.7 WRKY28在胚珠中表达模式和功能分析 | 第66-68页 |
| 3.8 过表达WRKY28能部分回复arp6 klu表型 | 第68-72页 |
| 3.8.1 过表达WRKY28能部分回复arp6 klu结实率 | 第68-71页 |
| 3.8.2 在MMC细胞中异位表达WRKY28不足以抑制MMC的命运 | 第71-72页 |
| 3.9 ARP6和KLU共同调控WRKY28的分子机制 | 第72-74页 |
| 3.10 基因组范围对ARP6功能的研究 | 第74-79页 |
| 四 讨论 | 第79-85页 |
| 4.1 KLU调控大孢子发生的机制 | 第80-81页 |
| 4.2 WRKY28这一细胞特异表达基因阻止了多余MMC的形成 | 第81-82页 |
| 4.3 WRKY28在胚珠中的表达是受染色质重塑复合物SWR1所调控的 | 第82-83页 |
| 4.4 KLU协同染色质重塑复合调控WRKY28的表达是非细胞自主模式 | 第83-84页 |
| 4.5 调控大孢子母细胞特化过程的不同分子机制 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 附录 | 第94-100页 |
| 附录 1: 引物列表 | 第94-100页 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 | 第100-102页 |
| 缩略表 | 第102-103页 |
| 博士入学前发表论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
