| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写对照表 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-27页 |
| 1 DEHP 的概述 | 第17页 |
| 2 环境中 DEHP 来源及水域 DEHP 污染 | 第17-18页 |
| 3 DEHP 对水生生物的毒性作用 | 第18-19页 |
| 4 DEHP 相关分子标志物的开发研究进展 | 第19-20页 |
| 5 GC-MS 联用 | 第20-21页 |
| 5.1 概述 | 第20页 |
| 5.2 GC-MS 联用技术的原理 | 第20-21页 |
| 5.3 GC-MS 联用技术的应用 | 第21页 |
| 6 荧光定量 PCR | 第21-24页 |
| 6.1 荧光定量 PCR 原理 | 第21页 |
| 6.2 荧光定量 PCR 特点 | 第21-24页 |
| 6.3 荧光定量 PCR 在海洋生物中的应用 | 第24页 |
| 7 双向电泳 | 第24-25页 |
| 7.1 概述 | 第24页 |
| 7.2 原理 | 第24-25页 |
| 7.3 双向电泳技术在海洋生物中的应用 | 第25页 |
| 8 立题背景及必要性 | 第25-27页 |
| 8.1 立题背景 | 第25-26页 |
| 8.2 立题的必要性及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 GC-MS 联用技术测定菲律宾蛤仔富集 DEHP 污染物 | 第27-32页 |
| 1 材料与方法 | 第27-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第27页 |
| 1.3 实验方法 | 第27-28页 |
| 1.3.1 标准曲线的制作 | 第27页 |
| 1.3.2 海水样品前处理 | 第27页 |
| 1.3.3 菲律宾蛤仔样品前处理 | 第27页 |
| 1.3.4 GC-MS 工作参数 | 第27-28页 |
| 1.3.5 DEHP 的定性定量 | 第28页 |
| 2 结果 | 第28-30页 |
| 2.1 GC-MS 图谱-DEHP 标准品 | 第28-29页 |
| 2.2 DEHP 标准曲线 | 第29页 |
| 2.3 实验组 GC-MS 图谱 | 第29-30页 |
| 2.4 海水及菲律宾蛤仔全组织、斧足中 DEHP 浓度 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 菲律宾蛤仔响应 DEHP 胁迫的免疫相关分子标记物的发掘 | 第32-45页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第32页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 1.1.3 引物 | 第32页 |
| 1.1.4 主要实验仪器 | 第32-33页 |
| 1.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 1.2.1 DEHP 胁迫实验 | 第33-34页 |
| 1.2.2 RNA 的提取 | 第34页 |
| 1.2.3 cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
| 1.3 实时定量表达分析 | 第35-36页 |
| 1.3.1 标准曲线制作 | 第35页 |
| 1.3.2 目的基因与内参基因的 mRNA 表达分析 | 第35页 |
| 1.3.3 Comparative Delta-delta Ct 相对定量 | 第35-36页 |
| 1.4 数据处理与分析 | 第36页 |
| 2 结果分析 | 第36-42页 |
| 2.1 浓度依赖型(正相关) | 第36-39页 |
| 2.1.1 基因持续上调 | 第36-37页 |
| 2.1.2 基因先上调后下调 | 第37-39页 |
| 2.2 浓度依赖型（负相关） | 第39-41页 |
| 2.3 非浓度依赖型 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 4 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 菲律宾蛤仔响应 DEHP 胁迫的血细胞蛋白标记物的识别 | 第45-60页 |
| 1 材料与方法 | 第45-51页 |
| 1.1 材料试剂 | 第45-47页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 1.1.2 实验主要试剂 | 第45页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 1.1.4 配置试剂 | 第46-47页 |
| 1.2 实验方法 | 第47-51页 |
| 1.2.1 样品制备 | 第47页 |
| 1.2.2 除盐（2-D Clean-Up Kit） | 第47-48页 |
| 1.2.3 蛋白定量 | 第48页 |
| 1.2.4 单向 SDS-PAGE 胶 | 第48-49页 |
| 1.2.5 双向电泳 | 第49-50页 |
| 1.2.6 质谱分析和蛋白质鉴定 | 第50-51页 |
| 1.2.7 苹果酸脱氢酶的酶活分析 | 第51页 |
| 1.2.8 通过 qPCR 验证差异表达的蛋白 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-58页 |
| 2.1 蛋白浓度测定标准曲线 | 第51-52页 |
| 2.2 2-DE 凝胶图谱 | 第52页 |
| 2.3 差异表达的蛋白质的鉴定 | 第52-57页 |
| 2.4 对 DEHP 胁迫部分基因 mRNA 表达水平 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58页 |
| 4 小结 | 第58-60页 |
| 第五章 菲律宾蛤仔响应 DEHP 胁迫的斧足蛋白标记物的识别 | 第60-69页 |
| 1 材料与方法 | 第60页 |
| 2 结果 | 第60-67页 |
| 2.1 蛋白浓度测定标准曲线 | 第60页 |
| 2.2 2-DE 凝胶图谱 | 第60-61页 |
| 2.3 差异表达的蛋白质的鉴定 | 第61-66页 |
| 2.4 对 DEHP 胁迫 MDH 在蛋白和 mRNA 表达水平 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 4 小结 | 第68-69页 |
| 第六章 总结与展望 | 第69-70页 |
| 1 研究总结 | 第69页 |
| 2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 在学研究成果 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
