摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 绪论 | 第9-19页 |
1.1 激素相关性肿瘤简介 | 第9-11页 |
1.1.1 激素的致癌机制 | 第9-10页 |
1.1.2 乳腺癌 | 第10页 |
1.1.3 其他激素相关性癌症 | 第10-11页 |
1.2 肿瘤基因治疗 | 第11-12页 |
1.3 细胞增殖概述 | 第12-15页 |
1.3.1 细胞周期简介 | 第12页 |
1.3.2 细胞周期调控 | 第12-13页 |
1.3.3 肿瘤细胞增殖调控 | 第13页 |
1.3.4 相关基因介绍 | 第13-15页 |
1.4 转录因子 FOXA1 概述 | 第15-18页 |
1.4.1 转录因子 FOXA1 简介 | 第15-16页 |
1.4.1.1 叉头框 FOX 家族蛋介绍 | 第15页 |
1.4.1.2 转录因子 FOXA1 结构 | 第15-16页 |
1.4.2 转录因子 FOXA1 的功能 | 第16-18页 |
1.4.2.1 FOXA1 与肿瘤的关系 | 第16页 |
1.4.2.2 FOX A1 与肿瘤的治疗 | 第16-18页 |
1.5 研究内容和方法 | 第18-19页 |
第2章 乳腺癌细胞研究体系的建立 | 第19-36页 |
2.1 前言 | 第19页 |
2.2 实验材料 | 第19-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-32页 |
2.3.1 细胞的培养 | 第21-23页 |
2.3.2 质粒大量提取 | 第23-24页 |
2.3.3 磷酸钙转染法制备慢病毒 | 第24-26页 |
2.3.4 免疫印迹检测蛋白质方法( Western-Blot) | 第26-29页 |
2.3.5 SqRT-PCR | 第29-32页 |
2.4 结果与讨论 | 第32-35页 |
2.4.1 干扰 FOXA1 的表达降低了 P21 、 P27 的基因表达水平 | 第32-33页 |
2.4.2 高表达 FOXA1 增高了 P21 、 P27 的基因表达水平 | 第33-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-36页 |
第3章 FOXA1 对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第36-44页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 实验材料 | 第36-37页 |
3.3 实验方法 | 第37-39页 |
3.3.1 测定细胞生长曲线 | 第37-38页 |
3.3.2 流式测定细胞周期 | 第38-39页 |
3.3.3 数据分析 | 第39页 |
3.4 结果与讨论 | 第39-43页 |
3.4.1 干扰 FOXA1 促进乳腺癌细胞 MCF 7 的增殖 | 第39-41页 |
3.4.2 高表达 FOXA1 抑制乳腺癌细胞 ZR 75 30 的增殖 | 第41-43页 |
3.5 本章小结 | 第43-44页 |
第4章 FOXA1 调节 P21、 P27 的转录研究 | 第44-62页 |
4.1 前言 | 第44-45页 |
4.2 实验材料 | 第45-47页 |
4.3 实验方法 | 第47-56页 |
4.3.1 染色质免疫共沉淀实验( CHIP ) | 第47-50页 |
4.3.2 基因启动子克隆 | 第50-55页 |
4.3.3 启动子与 FOXA1 共转染 | 第55-56页 |
4.3.4 双荧光素酶的荧光测定 | 第56页 |
4.3.5 数据分析 | 第56页 |
4.4 结果与讨论 | 第56-61页 |
4.4.1 FOXA1 能结合到 P21 、 P27 的启动子区域 | 第56-58页 |
4.4.2 FOXA1 能调节 P21 的启动子 | 第58-60页 |
4.4.3 FOXA1 能调节 P27 的启动子 | 第60-61页 |
4.5 本章小结 | 第61-62页 |
总结与展望 | 第62-64页 |
1. 总结 | 第62页 |
2. 展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
附录A 英文缩写 | 第73-74页 |
附录B 常用缓冲液和试剂配方 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |