| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第一章 实验材料及试剂 | 第9-17页 |
| ·仪器设备 | 第9-10页 |
| ·试剂 | 第10-11页 |
| ·常用缓冲液、培养液等溶液的试剂配方 | 第11-17页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第11-12页 |
| ·RT-PCR相关试剂及缓冲液 | 第12-13页 |
| ·Western-blotting相关试剂 | 第13-17页 |
| 第二章 实验方法及项目 | 第17-26页 |
| ·shRNA质粒表达载体的构建 | 第17页 |
| ·细胞培养 | 第17-18页 |
| ·实验细胞 | 第17页 |
| ·细胞传代 | 第17-18页 |
| ·细胞冻存 | 第18页 |
| ·细胞复苏 | 第18页 |
| ·实验分组 | 第18页 |
| ·稳定转染 | 第18-20页 |
| ·基因抑制效率的检测 | 第20-24页 |
| ·采用半定量RT-PCR及荧光定量PCR检测GRP78 mRNA水平的表达 | 第20-23页 |
| ·Western blotting检测GRP78蛋白的表达 | 第23-24页 |
| ·单层贴壁细胞总蛋白的提取 | 第23页 |
| ·Braford法蛋白定量 | 第23-24页 |
| ·Western blotting步骤 | 第24页 |
| ·干扰效应分析 | 第24-25页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染和流式细胞术 | 第24-25页 |
| ·细胞增殖迁移实验 | 第25页 |
| ·数据统计分析方法 | 第25-26页 |
| 第三章 实验结果 | 第26-31页 |
| ·shRNA-GRP78对GRP78 mRNA表达的抑制情况 | 第26-27页 |
| ·半定量RT-PCR检测结果 | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR检测结果 | 第27页 |
| ·shRNA-GRP78对GRP78蛋白表达的抑制情况 | 第27-28页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡结果 | 第28-29页 |
| ·xCELLigence系统检测细胞增殖能力结果 | 第29-30页 |
| ·xCELLigence系统检测细胞迁移能力结果 | 第30-31页 |
| 第四章 讨论 | 第31-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 附图 | 第40-42页 |
| 综述 | 第42-52页 |
| 综述参考文献 | 第49-52页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
| 缩略语 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
