摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
中英文缩略词表 | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第8-11页 |
第2章 材料与方法 | 第11-28页 |
2.1 材料 | 第11-13页 |
2.1.1 细胞及菌株 | 第11页 |
2.1.2 腺病毒载体系统 | 第11页 |
2.1.3 主要试剂 | 第11-12页 |
2.1.4 主要仪器 | 第12-13页 |
2.2 重组腺病毒的构建 | 第13-20页 |
2.2.1 Ad-Hes1 腺病毒载体构建 | 第13-14页 |
2.2.2 Hes1 干扰片段腺病毒载体构建 | 第14-17页 |
2.2.3 重组腺病毒 Ad-Hes1 及 Ad-Hes1-shRNA 的扩增与纯化 | 第17-18页 |
2.2.4 重组腺病毒滴度测定(TCID50 法) | 第18-19页 |
2.2.5 重组腺病毒 Ad-Hes1 在转染细胞后表达验证 | 第19页 |
2.2.6 重组腺病毒 Ad-Hes1-shRNA 干扰质粒的筛选 | 第19-20页 |
2.3 实验方法 | 第20-28页 |
2.3.1 SD(Sprague Dawley)大鼠原代心肌细胞的培养 | 第20-21页 |
2.3.2 实验分组 | 第21页 |
2.3.3 SD 大鼠原代心肌细胞腺病毒感染 | 第21页 |
2.3.4 气体混配器调配 | 第21-22页 |
2.3.5 H/R、IPost 体外模型液体配置成分表 | 第22-23页 |
2.3.6 H/R、IPost 体外模型构建 | 第23-24页 |
2.3.7 细胞增殖活性的检测 | 第24页 |
2.3.8 细胞凋亡率的检测 | 第24页 |
2.3.9 细胞内活性氧(ROS)检测 | 第24-25页 |
2.3.10 △Ψm 的检测 | 第25页 |
2.3.11 Western blotting 检测 | 第25-27页 |
2.3.12 统计学分析 | 第27-28页 |
第3章 结果 | 第28-39页 |
3.1 Ad-Hes1 及 Ad-Hes1-shRNA 在原代心肌细胞中的作用 | 第28-31页 |
3.1.1 腺病毒载体在心肌细胞最佳 MOI 的确定 | 第28-29页 |
3.1.2 Ad-Hes1 在原代心肌细胞中的正常表达 | 第29-30页 |
3.1.3 Ad-Hes1-shRNA 在原代心肌细胞内的干扰作用 | 第30-31页 |
3.2 Hes1 在体各组外心肌细胞模型中的表达 | 第31-32页 |
3.3 Hes1 表达量增加提高缺血后心肌细胞活力 | 第32页 |
3.4 Hes1 表达量增加降低缺血后心肌细胞凋亡 | 第32-34页 |
3.5 Hes1 表达量升高减少缺血后心肌细胞内 ROS 形成 | 第34-35页 |
3.6 Hes1 表达量增加可稳定缺血后心肌细胞△Ψm | 第35-36页 |
3.7 Hes1 激活 PI3K/Akt 信号通路 | 第36-37页 |
3.8 Hes1 激活 JAK/Stat3 信号通路 | 第37-39页 |
第4章 讨论 | 第39-42页 |
第5章 结论与展望 | 第42-43页 |
5.1 结论 | 第42页 |
5.2 展望 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
综述 | 第48-53页 |
参考文献 | 第52-53页 |