摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第7-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-24页 |
1、实验材料 | 第14-18页 |
1.1. 研究对象 | 第14-16页 |
1.1.1 入组条件 | 第14-15页 |
1.1.2 早产组和足月组排除标准 | 第15页 |
1.1.3 知情同意书 | 第15页 |
1.1.4 标本采集 | 第15-16页 |
1.2. 诊断标准 | 第16页 |
1.3 实验仪器设备、生物试剂及分析软件 | 第16-18页 |
1.3.1 实验仪器设备 | 第16页 |
1.3.2 生物试剂或试剂盒 | 第16-17页 |
1.3.3 实时定量 PCR 探针 | 第17-18页 |
1.3.4 生物信息学分析软件 | 第18页 |
2、实验方法 | 第18-24页 |
2.1. 血液标本的收集 | 第18-19页 |
2.1.1 收集选取标本 | 第18页 |
2.1.2 提取血清中的白细胞 | 第18-19页 |
2.2. 总 RNA 样品的制备及鉴定 | 第19页 |
2.2.1 提取白细胞中总 RNA | 第19页 |
2.2.2 总 RNA 样品纯化 | 第19页 |
2.2.3 总 RNA 样品质量鉴定 | 第19页 |
2.3. 基因芯片检测 MRNA 表达谱 | 第19-22页 |
2.3.1. 样品 RNA 荧光标记及 CDNA 制备 | 第20页 |
2.3.2 纯化标记后的产物 CRNA | 第20页 |
2.3.3 纯化后 CRNA 的定量和质控 | 第20-21页 |
2.3.4 mRNA 表达谱芯片杂交 | 第21页 |
2.3.5 清洗芯片 | 第21-22页 |
2.3.6 芯片扫描和数据提取 | 第22页 |
2.3.7 mRNA 表达谱芯片数据分析 | 第22页 |
2.4. 实时定量 PCR | 第22-24页 |
2.4.1 mRNA 逆转录为 cDNA | 第22-23页 |
2.4.2 Tagman 探针法实时定量 PCR | 第23页 |
2.4.3 绘制标准曲线 | 第23页 |
2.4.4 样本检测 | 第23页 |
2.4.5 统计学分析 | 第23-24页 |
第3章 结果 | 第24-34页 |
1. 早产组与足月组相关基因表达谱的研究 | 第24-30页 |
1.1 早产组与足月组中母血白细胞 mRNA 表达谱 | 第24-25页 |
1.2 早产组与足月组中母血白细胞 mRNA 表达特征 | 第25-27页 |
1.3 早产组与足月组差异表达基因及其功能和注释 | 第27-30页 |
2. RT-PCR 验证差异基因分析 | 第30-34页 |
2.1 为 RT-PCR 挑选差异基因 | 第30-32页 |
2.2 对 46 例独立样本进行 RT-PCR 验证 | 第32-34页 |
第4章 讨论 | 第34-40页 |
1.早产组与足月组间相关基因的生物学意义 | 第34-36页 |
2.早产组和足月组间差异基因的验证分析 | 第36-40页 |
第5章 小结 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
附件(知情同意书) | 第46-47页 |
综述 | 第47-56页 |
参考文献 | 第53-56页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第56页 |