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甲型流感病毒核蛋白保守性B细胞表位的鉴定研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第15-39页
    1.1 流感病毒概述第16-30页
        1.1.1 流感病毒的分类及命名第16-17页
        1.1.2 流感病毒的形态结构及组成第17-18页
        1.1.3 甲型流感病毒基因组编码蛋白的结构与功能第18-29页
        1.1.4 甲型流感病毒的生活史第29-30页
    1.2 甲型流感病毒的流行病学第30-33页
        1.2.1 流感病毒的流行状况第30-32页
        1.2.2 病毒的变异及进化第32-33页
    1.3 流感病毒的预防、治疗及诊断手段第33-36页
        1.3.1 流感病毒的预防及治疗性药物第33-35页
        1.3.2 流感病毒的传统诊断法第35-36页
        1.3.3 流感病毒的分子诊断法第36页
        1.3.4 流感病毒的快速诊断法第36页
    1.4 流感病毒的NP表位研究现状第36-37页
        1.4.1 NP的表位研究现状第36-37页
        1.4.2 保守表位的鉴定方法学第37页
    1.5 本论文的研究意义及主要研究内容第37-39页
第二章 材料与方法第39-69页
    2.1 主要仪器第39-40页
    2.2 主要耗材第40-41页
    2.3 主要试剂与实验动物第41-42页
    2.4 常用溶液和培养基的配制第42-46页
    2.5 实验方法第46-69页
        2.5.1 分子克隆及蛋白表达相关操作第46-52页
        2.5.2 流感病毒的滴度测定第52-53页
        2.5.3 流感病毒基因的获得和序列分析第53页
        2.5.4 小鼠的免疫第53-54页
        2.5.5 融合杂交瘤的制备与筛选第54-57页
        2.5.6 杂交瘤细胞的培养第57页
        2.5.7 单抗腹水的诱导第57-58页
        2.5.8 单抗腹水的纯化第58页
        2.5.9 血凝抑制试验(Hemagglutination Inhibition Assay,HI)第58-59页
        2.5.10 酶联免疫吸附分析(ELISA)第59-60页
        2.5.11 免疫渗滤法(Dot-ELISA)第60-61页
        2.5.12 细胞免疫荧光实验第61页
        2.5.13 NP单抗V区编码序列的测定第61-64页
        2.5.14 分子模拟与对接第64-66页
        2.5.15 重组蛋白的透射电镜观察第66页
        2.5.16 分析型超速离心(沉降速度实验)第66页
        2.5.17 流感病毒对小鼠的感染和组织采集第66页
        2.5.18 HE染色分析第66-67页
        2.5.19 免疫组化分析第67-69页
第三章 结果与分析第69-86页
    3.1 甲型流感病毒核蛋白单抗的分类第69-74页
        3.1.1 甲型流感病毒进化分析及代表株的选择第69-70页
        3.1.2 重组NP抗原的制备及性质鉴定第70-71页
        3.1.3 甲型流感病毒核蛋白单抗库的分类第71-74页
    3.2 NP保守线性表位的发现及应用第74-76页
    3.3 NP保守性构象表位关键性氨基酸的发现及功能性研究第76-82页
    3.4 人、禽宿主NP抗原性差异的关键位点的发现及应用第82-86页
第四章 讨论第86-90页
    4.1 甲型流感病毒NP的进化分析及表位鉴定第86-87页
    4.2 NP的聚体形式分析第87页
    4.3 人禽宿主差异诊断试剂的开发第87-88页
    4.4 NP保守性表位鉴定、分析及应用第88-90页
结论与展望第90-91页
参考文献第91-99页
致谢第99页

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