摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第16-35页 |
1.1 水母暴发与海洋低氧现象 | 第16-20页 |
1.1.1 水母暴发 | 第16-18页 |
1.1.2 海洋低氧现象 | 第18-20页 |
1.1.3 水母暴发与海洋低氧现象 | 第20页 |
1.2 海月水母的生物学特征 | 第20-23页 |
1.2.1 海月水母的分类与分布 | 第20-21页 |
1.2.2 海月水母的形态特征 | 第21-22页 |
1.2.3 海月水母的生活史 | 第22-23页 |
1.3 海洋生物的低氧耐受性研究 | 第23-24页 |
1.4 低氧对水母类生理生态活性的影响 | 第24-27页 |
1.5 水母类耐受低氧的分子调控机制 | 第27-33页 |
1.5.1 水母类耐受低氧的机制性研究 | 第27-28页 |
1.5.2 脯氨酸羟基化酶-低氧诱导因子氧感受体系 | 第28-33页 |
1.5.3 小结 | 第33页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 海月水母低氧诱导因子全长基因的克隆以及功能、结构和进化分析 | 第35-72页 |
2.1 实验材料 | 第36-38页 |
2.1.1 海月水母的培养 | 第36页 |
2.1.2 所需试剂 | 第36-37页 |
2.1.3 实验仪器 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-54页 |
2.2.1 总 RNA 的提取 | 第38页 |
2.2.2 总 RNA 质量检测 | 第38-39页 |
2.2.3 总 RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第39-40页 |
2.2.4 已知海月水母低氧诱导因子基因序列的验证 | 第40-42页 |
2.2.5 海月水母低氧诱导因子基因 3’末端的克隆 | 第42-45页 |
2.2.6 海月水母低氧诱导因子基因 5’末端的克隆 | 第45-49页 |
2.2.7 RACE 序列的验证 | 第49-50页 |
2.2.8 明星海葵低氧诱导因子基因序列的获得 | 第50页 |
2.2.9 低氧诱导因子基因全长序列的特征分析 | 第50页 |
2.2.10 构建系统进化树 | 第50-51页 |
2.2.11 海月水母 DNA 的提取与检测 | 第51页 |
2.2.12 海月水母低氧诱导因子基因组序列的克隆测序 | 第51-53页 |
2.2.13 低氧诱导因子基因的基因组结构进化分析 | 第53-54页 |
2.3 实验结果 | 第54-69页 |
2.3.1 总 RNA 的质量检测 | 第54-55页 |
2.3.2 已知海月水母低氧诱导因子基因序列的验证 | 第55-57页 |
2.3.3 3’RACE 扩增和测序结果 | 第57-58页 |
2.3.4 5’RACE 扩增和测序结果 | 第58-59页 |
2.3.5 海月水母低氧诱导因子基因全长的获得与验证 | 第59-60页 |
2.3.6 海月水母与明星海葵低氧诱导因子基因全长的特征分析 | 第60-62页 |
2.3.7 海月水母与明星海葵低氧诱导因子预测蛋白的生物信息学分析 | 第62-64页 |
2.3.8 低氧诱导因子的系统进化分析 | 第64-65页 |
2.3.9 海月水母低氧诱导因子基因序列的扩增与测序 | 第65-66页 |
2.3.10 低氧诱导因子基因结构的进化分析 | 第66-69页 |
2.4 讨论 | 第69-72页 |
第三章 海月水母 HIF-1α蛋白多克隆抗体的制备及在低氧条件下的表达 | 第72-92页 |
3.1 海月水母低氧诱导因子蛋白片段的体外表达与多克隆抗体的制备 | 第72-88页 |
3.1.1 实验材料 | 第72-73页 |
3.1.2 实验方法 | 第73-82页 |
3.1.3 实验结果 | 第82-87页 |
3.1.4 本节小结 | 第87-88页 |
3.2 海月水母低氧诱导因子蛋白的检测 | 第88-90页 |
3.2.1 实验材料 | 第88页 |
3.2.2 实验方法 | 第88-89页 |
3.2.3 实验结果 | 第89-90页 |
3.2.4 本节小结 | 第90页 |
3.3 讨论 | 第90-92页 |
第四章 海月水母肌动蛋白(β-actin)基因的克隆及实时荧光定量PCR 内参基因的筛选 | 第92-119页 |
4.1 海月水母肌动蛋白基因的克隆 | 第93-100页 |
4.1.1 实验材料 | 第93页 |
4.1.2 实验方法 | 第93-96页 |
4.1.3 实验结果 | 第96-100页 |
4.2 海月水母实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选和检测方法的建立 | 第100-117页 |
4.2.1 实验材料 | 第100页 |
4.2.2 实验方法 | 第100-106页 |
4.2.3 实验结果 | 第106-117页 |
4.3 讨论 | 第117-119页 |
第五章 海月水母在环境低氧条件下的相关分子机制研究 | 第119-156页 |
5.1 投喂对海月水母 HIF-1α基因表达的影响 | 第120-129页 |
5.1.1 实验材料 | 第120页 |
5.1.2 实验方法 | 第120-122页 |
5.1.3 实验结果 | 第122-129页 |
5.2 海月水母在低氧条件下的生理活性与相关基因的表达变化 | 第129-153页 |
5.2.1 实验材料 | 第129-130页 |
5.2.2 实验方法 | 第130-134页 |
5.2.3 实验结果 | 第134-152页 |
5.2.4 本节小结 | 第152-153页 |
5.3 讨论 | 第153-156页 |
第六章 总结 | 第156-160页 |
6.1 主要结论 | 第156-159页 |
6.2 论文的创新点 | 第159-160页 |
参考文献 | 第160-173页 |
附录 | 第173-177页 |
致谢 | 第177-178页 |
个人简历 | 第178页 |
发表的学术论文 | 第178-179页 |