摘要 | 第12-14页 |
ABSTRACT | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第16-22页 |
1.1 蓝藻水华的治理 | 第16-17页 |
1.2 氨基酸抑制蓝藻的研究进展 | 第17-18页 |
1.3 蓝藻胞外多糖和环二鸟苷酸的研究现状 | 第18-20页 |
1.3.1 蓝藻胞外多糖的研究现状 | 第18-19页 |
1.3.2 环二鸟苷酸的研究现状 | 第19-20页 |
1.4 本论文研究的目的、内容及意义 | 第20-22页 |
1.4.1 研究目的 | 第20页 |
1.4.2 研究内容 | 第20-21页 |
1.4.3 研究意义 | 第21-22页 |
第二章 L-赖氨酸对Microcystis aeruginosa NaRes975的溶藻作用及机理分析 | 第22-36页 |
2.1 材料与方法 | 第22-26页 |
2.1.1 藻种与培养基 | 第22-23页 |
2.1.2 实验试剂 | 第23页 |
2.1.3 实验仪器 | 第23页 |
2.1.4 不同浓度L-赖氨酸抑藻效率测定 | 第23-24页 |
2.1.5 粗酶液的制备 | 第24页 |
2.1.6 生理指标的测定 | 第24页 |
2.1.7 叶绿素自发荧光分析 | 第24-25页 |
2.1.8 微囊藻酸性多糖分析 | 第25页 |
2.1.9 多糖合成酶基因和c-di-GMP代谢酶基因转录活性分析 | 第25-26页 |
2.1.10 细胞表面形态分析 | 第26页 |
2.2 结果与讨论 | 第26-35页 |
2.2.1 不同浓度的L-赖氨酸对M. aeruginosa NaRes975生长的影响 | 第26-27页 |
2.2.2 L-赖氨酸对叶绿素a和藻体胞内蛋白质含量的影响 | 第27-30页 |
2.2.3 L-赖氨酸对超氧自由基(O2~-)、丙二醛(MDA)和超氧化歧化酶(SOD)的影响 | 第30-32页 |
2.2.4 L-赖氨酸对微囊藻胞外多糖含量的影响 | 第32页 |
2.2.5 L-赖氨酸对多糖合成酶基因转录活性的影响 | 第32-34页 |
2.2.6 L-赖氨酸对c-di-GMP代谢酶基因转录活性的影响 | 第34页 |
2.2.7 L-赖氨酸对微囊藻细胞表面形态的影响 | 第34-35页 |
2.3 本章小结 | 第35-36页 |
第三章 L-赖氨酸的溶藻范围及对产藻毒素藻株Microcystis aeruginosaFACHB-905产生的影响 | 第36-46页 |
3.1 材料与方法 | 第36-39页 |
3.1.1 藻种与培养基 | 第36-38页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第38页 |
3.1.3 L-赖氨酸溶藻范围的确定 | 第38页 |
3.1.4 不同浓度L-赖氨酸的溶藻效率测定 | 第38页 |
3.1.5 粗酶液的制备 | 第38页 |
3.1.6 生理指标的测定 | 第38-39页 |
3.1.7 藻毒素的测定 | 第39页 |
3.2 结果与讨论 | 第39-44页 |
3.2.1 L-赖氨酸对不同藻种的作用效果 | 第39-40页 |
3.2.2 不同浓度的L-赖氨酸对M. aeruginosa FACHB-905生长的影响 | 第40-41页 |
3.2.3 L-赖氨酸对M. aeruginosa FACHB-905胞内蛋白含量和叶绿素a的影响 | 第41-42页 |
3.2.4 L-赖氨酸对M. aeruginosa FACHB-905丙二醛(MDA)和超氧化歧化酶(SOD)活性的影响 | 第42-43页 |
3.2.5 L-赖氨酸对M. aeruginosa FACHB-905释放微囊藻毒素(MCs)的影响 | 第43-44页 |
3.3 本章小结 | 第44-46页 |
第四章 Microcystis aeruginosa NaRes975基因组测序及多糖合成酶与环二鸟苷酸代谢酶基因分析 | 第46-52页 |
4.1 材料与方法 | 第46-48页 |
4.1.1 基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
4.1.2 基因组测序 | 第47页 |
4.1.3 基因组信息分析 | 第47-48页 |
4.2 结果与讨论 | 第48-51页 |
4.2.1 M. aeruginosa NaRes975基因组的基本信息 | 第48-49页 |
4.2.2 多糖合成相关基因的筛选与分析 | 第49-51页 |
4.2.3 环二鸟苷酸代谢基因的筛选与分析 | 第51页 |
4.3 本章小结 | 第51-52页 |
第五章 Microcystis aeruginosa NaRes975多糖合成酶基因的克隆与异源表达 | 第52-68页 |
5.1 材料与方法 | 第52-59页 |
5.1.1 培养基与试剂 | 第52页 |
5.1.2 实验仪器 | 第52页 |
5.1.3 菌株和质粒载体 | 第52页 |
5.1.4 多糖合成酶基因celA重组质粒的构建 | 第52-57页 |
5.1.5 多糖合成酶基因celA的异源表达 | 第57-59页 |
5.2 结果与讨论 | 第59-67页 |
5.2.1 M. aeruginosa NaRes 975基因组DNA和空载质粒pET-32a(+)的抽提 | 第59-60页 |
5.2.2 多糖合成酶基因celA的克隆与序列分析 | 第60-61页 |
5.2.3 重组质粒pET-32a(+)-celA阳性克隆验证 | 第61-63页 |
5.2.4 重组大肠杆菌中多糖合成酶基因celA的诱导表达 | 第63-67页 |
5.3 本章小结 | 第67-68页 |
第六章 Microcystis aeruginosa NaRes975环二鸟苷酸代谢酶基因的表达与包涵体复性 | 第68-80页 |
6.1 材料与方法 | 第68-72页 |
6.1.1 试剂与仪器 | 第68-69页 |
6.1.2 菌株和质粒载体 | 第69页 |
6.1.3 c-di-GMP代谢酶基因重组质粒的构建 | 第69-71页 |
6.1.4 c-di-GMP代谢酶基因的异源表达 | 第71页 |
6.1.5 包涵体的洗涤、变性与复性 | 第71-72页 |
6.2 结果与讨论 | 第72-78页 |
6.2.1 c-di-GMP代谢酶基因的克隆与序列分析 | 第72页 |
6.2.2 重组质粒pET-32a(+)-cdgm阳性克隆验证 | 第72-74页 |
6.2.3 c-di-GMP代谢酶基因的异源表达 | 第74-77页 |
6.2.4 包涵体蛋白的复性 | 第77-78页 |
6.3 本章小结 | 第78-80页 |
第七章 结论与建议 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-90页 |
致谢 | 第90-92页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |
附件 | 第93页 |