| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5页 |
| 中英文对照及英文缩写表 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 糖苷酶的研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1.1 糖苷酶的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.2 糖苷酶的性质 | 第11-12页 |
| 1.1.3 糖苷酶的作用机理 | 第12-13页 |
| 1.1.4 糖苷酶的应用 | 第13-15页 |
| 1.2 β-半乳糖苷酶和β-半乳聚糖酶的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 β-半乳糖苷酶的分类 | 第15页 |
| 1.2.2 β-半乳糖苷酶的性质 | 第15页 |
| 1.2.3 β-半乳糖苷酶的作用机理 | 第15-16页 |
| 1.2.4 β-半乳糖苷酶的应用 | 第16页 |
| 1.2.5 β-半乳聚糖酶的分类 | 第16-17页 |
| 1.2.6 β-半乳聚糖酶的性质 | 第17页 |
| 1.3 β-半乳聚糖酶的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.1 β-半乳聚糖酶在制备活性寡糖片段中的应用 | 第17页 |
| 1.3.2 β-半乳聚糖酶在多糖结构分析中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 选题依据、目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 草酸青霉中内切-β-1,6-半乳聚糖酶的克隆表达 | 第19-38页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 仪器和设备 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2.2 草酸青霉基因组cDNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.3 目的基因pogal6的扩增及重组质粒的构建 | 第22-25页 |
| 2.2.4 重组糖苷酶的活力测定 | 第25-26页 |
| 2.2.5 PoGal6-R在原核体系中的表达及纯化 | 第26页 |
| 2.2.6 PoGal6-G在真核体系中的表达及纯化 | 第26-29页 |
| 2.3 结果分析及讨论 | 第29-37页 |
| 2.3.1 草酸青霉基因组cDNA的提取 | 第29页 |
| 2.3.2 目的基因pogal6的扩增及重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.3.3 重组糖苷酶的活力测定 | 第32-33页 |
| 2.3.4 PoGal6-R在原核体系中的表达及纯化 | 第33-34页 |
| 2.3.5 PoGal6-G在真核体系中的表达及纯化 | 第34-35页 |
| 2.3.6 草酸青霉中PoGal6氨基酸序列比对及进化树分析 | 第35-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 重组酶PoGal6的酶学性质研究 | 第38-45页 |
| 3.1 实验试剂及仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第38页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 标准曲线的绘制及酶活力测定 | 第39页 |
| 3.2.2 PoGal6的最适温度及温度稳定性测定 | 第39页 |
| 3.2.3 PoGal6的最适pH及pH稳定性测定 | 第39页 |
| 3.2.4 金属离子及有机溶剂对PoGal6酶活力的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.5 PoGal6底物专一性的测定 | 第40页 |
| 3.3 结果分析及讨论 | 第40-43页 |
| 3.3.1 PoGal6的最适温度及温度稳定性测定 | 第40-41页 |
| 3.3.2 PoGal6的最适pH及pH稳定性测定 | 第41-42页 |
| 3.3.3 金属离子及有机溶剂对PoGal6酶活力的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.4 PoGal6底物专一性的测定 | 第43页 |
| 3.4 小结 | 第43-45页 |
| 第四章 草酸青霉中PoGal6的功能表征 | 第45-53页 |
| 4.1 实验材料试剂及仪器 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第45页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 dGA的制备 | 第46页 |
| 4.2.2 dGA的单糖组成及分子量检测 | 第46页 |
| 4.2.3 以Rb5-dGA为底物标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
| 4.2.4 以Rb5-dGA为底物的酶活力测定 | 第47页 |
| 4.2.5 PoGal6降解dGA产物的离子色谱及甲基化分析 | 第47-48页 |
| 4.2.6 PoGal6降解不同分子量阿拉伯半乳聚糖的离子色谱检测 | 第48页 |
| 4.3 结果分析及讨论 | 第48-52页 |
| 4.3.1 Rb5-dGA的制备及性质检测 | 第48-49页 |
| 4.3.2 PoGal6的活力检测 | 第49-50页 |
| 4.3.3 PoGal6降解dGA的离子色谱分析 | 第50页 |
| 4.3.4 PoGal6降解dGA的甲基化分析 | 第50-51页 |
| 4.3.5 PoGal6对不同分子量阿拉伯半乳聚糖的降解 | 第51-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-53页 |
| 总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
