| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 植物响应逆境胁迫的研究 | 第11-13页 |
| 1.1.1 干旱胁迫影响植物的生长发育 | 第12页 |
| 1.1.2 盐胁迫影响植物的生长和发育 | 第12-13页 |
| 1.2 植物适应干旱和盐胁迫的表现 | 第13-14页 |
| 1.3 调控干旱和盐胁迫的相关转录因子的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.3.1 NAC转录因子 | 第14-16页 |
| 1.3.2 MYB转录因子 | 第16-17页 |
| 1.3.3 其他转录因子 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.2 菌株与试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.1 菌株 | 第20页 |
| 2.2.2 试剂 | 第20-21页 |
| 2.3 培养基 | 第21页 |
| 2.4 方法 | 第21-34页 |
| 2.4.1 苹果叶片总RNA的提取和检测 | 第21-22页 |
| 2.4.2 MdNAC29基因的扩增 | 第22-25页 |
| 2.4.3 MdNAC29基因过表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.4.4 MdNAC29基因的原核表达 | 第26-28页 |
| 2.4.5 MdNAC29基因eGFP融合载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.4.6 农杆菌介导法转化苹果组培苗 | 第29-31页 |
| 2.4.7 农杆菌介导的烟草瞬时转化 | 第31页 |
| 2.4.8 实时定量PCR | 第31-34页 |
| 2.5 转基因苹果组培苗的胁迫处理 | 第34页 |
| 2.6 EMSA(凝胶迁移实验) | 第34-38页 |
| 2.6.1 生物素探针标记(碧云天探针标记试剂盒) | 第34-35页 |
| 2.6.2 凝胶迁移实验步骤 | 第35-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-54页 |
| 3.1 MdNAC29基因的克隆和进化树分析 | 第38-41页 |
| 3.1.1 苹果嫩叶RNA质量及完整性分析 | 第38页 |
| 3.1.2 MdNAC29基因PCR扩增结果及序列比对 | 第38-39页 |
| 3.1.3 MdNAC29基因的进化树分析 | 第39-41页 |
| 3.2 MdNAC29基因表达特性分析 | 第41-44页 |
| 3.2.1 MdNAC29基因表达对非生物胁迫的响应 | 第41-42页 |
| 3.2.2 MdNAC29基因启动子的克隆与分析 | 第42-44页 |
| 3.2.3 MdNAC29的亚细胞定位 | 第44页 |
| 3.3 MdNAC29基因的功能验证 | 第44-50页 |
| 3.3.1 MdNAC29基因过表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 3.3.2 MdNAC29基因过表达载体转化农杆菌 | 第46页 |
| 3.3.3 农杆菌介导法转化苹果组培苗 | 第46-47页 |
| 3.3.4 MdNAC29基因在转基因苹果中的定量分析 | 第47页 |
| 3.3.5 转基因苹果叶片的再生分析 | 第47-48页 |
| 3.3.6 过表达MdNAC29苹果苗对盐和干旱胁迫的响应 | 第48-50页 |
| 3.4 MdNAC29基因对盐和干旱胁迫关键基因转录调控 | 第50-54页 |
| 3.4.1 过表达MdNAC29苹果苗中盐和干旱关键基因的表达分析 | 第50-51页 |
| 3.4.2 MdDREB2A基因启动子的克隆及NAC结合位点分析 | 第51-52页 |
| 3.4.3 MdNAC29对MdDREB2A基因启动子的绑定 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.1 MdNAC29转录因子的功能 | 第54页 |
| 4.2 MdNAC29基因的表达特性 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
