| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 第一部分 低氧对小鼠肝癌Hca-F细胞活力、HIF-1α 表达的影响及fucoidan干预的作用研究 | 第14-35页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 材料和方法 | 第15-25页 |
| 1. 材料 | 第15-17页 |
| 1.1 细胞系及实验动物 | 第15页 |
| 1.2 主要实验仪器及器材 | 第15页 |
| 1.3 主要实验试剂与药品 | 第15-16页 |
| 1.4 主要实验试剂的配置 | 第16-17页 |
| 2. 方法 | 第17-24页 |
| 2.1 细胞培养 | 第17页 |
| 2.2 低氧模型的建立 | 第17-18页 |
| 2.3 CCK-8 法检测细胞活力 | 第18页 |
| 2.4 Trypan blue检测细胞毒作用 | 第18页 |
| 2.5 AnnexinⅤ–FITC 流式双染检测细胞凋亡 | 第18页 |
| 2.6 细胞核蛋白提取及定量 | 第18-19页 |
| 2.7 WB检测蛋白表达 | 第19页 |
| 2.8 免疫荧光检测蛋白表达 | 第19页 |
| 2.9 酶联免疫吸附( Elisa)检测细胞分泌蛋白的表达 | 第19-20页 |
| 2.10 核酸mRNA提取及定量 | 第20-21页 |
| 2.11 反转录 | 第21-22页 |
| 2.12 SYBR Green 染料法 q RT-PCR 步骤 | 第22页 |
| 2.13 定量 PCR 步骤 | 第22-24页 |
| 3 统计学分析 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-31页 |
| 1. 不同浓度 Co Cl2对 Hca-F 细胞生长的影响 | 第25页 |
| 2. Fucoidan 对低氧条件下小鼠肝癌 Hca-F 细胞活力的影响 | 第25-26页 |
| 3．Fucoidan对低氧条件下小鼠肝癌Hca-F细胞凋亡的影响 | 第26-27页 |
| 4．Fucoidan 对 Co Cl2诱导的 Hca-F 细胞 HIF-1α 表达及转位的影响 | 第27-28页 |
| 5．Fucoidan 对低氧诱导环境下 Hca-F 细胞 HGF 和 VEHG-C 表达的影响 | 第28-29页 |
| 6．Fucoidan 对低氧诱导环境下 Hca-F 细胞 C-Met 和 VEHGR-3 表达的影响 | 第29-31页 |
| 讨论 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第二部分 Fucoidan对低氧Hca-F细胞淋巴管新生及转移及侵袭能力的影响 | 第35-51页 |
| 前言 | 第35-36页 |
| 材料和方法 | 第36-40页 |
| 1.材料 | 第36页 |
| 1.1 细胞系及实验动物 | 第36页 |
| 1.2 主要实验仪器及器材 | 第36页 |
| 1.3 主要实验试剂与药品 | 第36页 |
| 2.方法 | 第36-39页 |
| 2.1 细胞培养 | 第36页 |
| 2.2 建立小鼠体内肿瘤淋巴结转移模型及药物处理 | 第36-37页 |
| 2.3 HE染色 | 第37页 |
| 2.4 免疫组织化学染色步骤 | 第37页 |
| 2.5 小鼠mLECs体外成管实验 | 第37页 |
| 2.6 小鼠体外Transwell小室细胞侵袭实验 | 第37-38页 |
| 2.7 Western Blotting实验 | 第38页 |
| 2.8 免疫组织荧光实验 | 第38-39页 |
| 3.统计学处理 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-45页 |
| 1.Fucoidan对小鼠体内肿瘤淋巴结转移能力的影响 | 第40-41页 |
| 2.Fucoidan对小鼠体内肿瘤淋巴管新生的影响 | 第41-42页 |
| 3.Fucoidan对mLEC成管能力的影响 | 第42页 |
| 4. Fucoidan对小鼠体外转移及侵袭能力的影响 | 第42-43页 |
| 5. Fucoidan抑制低氧诱导的Hca-F细胞中HIF-1α 表达的相关信号通路的影响 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 综述 | 第51-65页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 创新点 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
