中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
一、人源Fab噬菌体抗体库的构建及鉴定 | 第14-48页 |
1.1 材料和方法 | 第14-31页 |
1.1.1 材料 | 第14-16页 |
1.1.2 主要仪器 | 第16-17页 |
1.1.3 实验流程 | 第17页 |
1.1.4 方法 | 第17-31页 |
1.2 结果 | 第31-40页 |
1.2.1 外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第31页 |
1.2.2 重链Fd段和轻链基因的PCR扩增结果 | 第31-32页 |
1.2.3 噬粒pComb3XSS的鉴定 | 第32-33页 |
1.2.4 轻链库的构建及鉴定 | 第33-34页 |
1.2.5 辅助噬菌体VCSM13的扩增和滴度测定 | 第34-35页 |
1.2.6 噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定 | 第35-38页 |
1.2.7 Fab噬菌体抗体库的库容滴定 | 第38-39页 |
1.2.8 噬菌体抗体库的初步筛选 | 第39-40页 |
1.3 讨论 | 第40-47页 |
1.3.1 抗体库的种类 | 第40-41页 |
1.3.2 制约抗体库质量的因素 | 第41-43页 |
1.3.3 构建抗体库所用的噬菌粒载体 | 第43-46页 |
1.3.4 噬菌体抗体库技术待解决的问题 | 第46-47页 |
1.4 小结 | 第47-48页 |
二、胰淀素人源Fab抗体的筛选与鉴定 | 第48-60页 |
2.1 材料和方法 | 第48-52页 |
2.1.1 材料 | 第48-49页 |
2.1.2 主要仪器 | 第49页 |
2.1.3 实验流程 | 第49页 |
2.1.4 方法 | 第49-52页 |
2.2 结果 | 第52-55页 |
2.2.1 胰淀素特异性抗体的富集和筛选 | 第52-53页 |
2.2.2 抗原结合活性的ELISA检测 | 第53页 |
2.2.3 测序结果 | 第53-55页 |
2.3 讨论 | 第55-59页 |
2.3.1 噬菌体抗体库亲和筛选过程中的问题 | 第55-57页 |
2.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第57-58页 |
2.3.3 高亲和力抗体的获得 | 第58-59页 |
2.4 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
问题与展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第68-69页 |
附录 | 第69-72页 |
综述 噬菌体抗体库技术研究进展 | 第72-91页 |
综述参考文献 | 第83-91页 |
致谢 | 第91-92页 |