| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 第二章 葡萄5个重要氮代谢相关基因的克隆与亚细胞定位分析 | 第22-38页 |
| 摘要 | 第22-23页 |
| 1 材料和方法 | 第23-33页 |
| 1.1 材料 | 第23-25页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 1.1.2 质粒、菌株等分子生物学试剂 | 第24-25页 |
| 1.2 方法 | 第25-33页 |
| 1.2.1 葡萄总RNA的提取 | 第25页 |
| 1.2.2 总RNA中DNA的消化 | 第25-26页 |
| 1.2.3 cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| 1.2.4 葡萄5个氮代谢相关基因ORF区的扩增 | 第26-29页 |
| 1.2.5 葡萄5个氮代谢相关基因cDNA的3’RACE扩增 | 第29页 |
| 1.2.6 葡萄氮代谢5个相关基因的亚细胞定位分析 | 第29-33页 |
| 1.2.7 基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.1 葡萄各组织总RNA提取纯度检测 | 第34页 |
| 2.2 葡萄5个氮代谢相关基因ORF区的克隆结果 | 第34-35页 |
| 2.3 葡萄5个氮代谢相关基因的3’RACE克隆结果 | 第35页 |
| 2.4 葡萄氮代谢5个相关基因的亚细胞定位分析 | 第35-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 利用基因表达检测葡萄叶面喷施尿素的初步研究 | 第38-52页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 1.1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 1.1.2 生化试剂 | 第39-40页 |
| 1.2 方法 | 第40-41页 |
| 1.2.1 不同处理对葡萄品质指标的影响 | 第40页 |
| 1.2.2 RNA的提取与纯化 | 第40页 |
| 1.2.3 cDNA合成 | 第40页 |
| 1.2.4 基因序列与引物合成 | 第40-41页 |
| 1.2.5 半定量RT-PCR | 第41页 |
| 1.2.6 荧光定量PCR | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 2.1 叶面喷施不同浓度尿素对葡萄单粒重、单穗重、果实大小及叶片生长情况的影响 | 第41-42页 |
| 2.2 葡萄各组织总RNA提取纯度检测 | 第42-43页 |
| 2.3 相关基因的时空表达分析 | 第43-48页 |
| 2.3.1 基因特异引物的PCR验证 | 第43页 |
| 2.3.2 叶面喷施不同浓度尿素对葡萄硝酸还原酶基因表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.3 叶面喷施不同浓度尿素对葡萄亚硝酸还原酶基因表达的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.4 叶面喷施不同浓度尿素对葡萄谷氨酰胺合成酶基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.5 叶面喷施不同浓度尿素对葡萄天冬酰胺合成酶基因表达的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.6 叶面喷施不同浓度尿素对葡萄谷氨酸脱氢酶基因表达的影响 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| 第四章 尿素施肥对葡萄5个氮代谢相关基因表达的影响 | 第52-64页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 1.1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 1.1.2 化学肥料 | 第53页 |
| 1.1.3 生化试剂 | 第53页 |
| 1.1.4 引物设计 | 第53-54页 |
| 1.2 方法 | 第54-55页 |
| 1.2.1 施肥试验设计 | 第54页 |
| 1.2.2 葡萄样品的采集 | 第54页 |
| 1.2.3 RNA的提取与纯化 | 第54页 |
| 1.2.4 cDNA合成 | 第54页 |
| 1.2.5 基因特异引物的PCR验证 | 第54-55页 |
| 1.2.6 半定量RT-PCR | 第55页 |
| 1.2.7 荧光定量PCR | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-60页 |
| 2.1 不同处理对葡萄品质指标的影响 | 第55-57页 |
| 2.2 葡萄各组织总RNA提取纯度检测 | 第57-58页 |
| 2.3 基因特异引物的PCR验证 | 第58页 |
| 2.4 基因的表达 | 第58-60页 |
| 2.4.1 叶面喷施尿素对葡萄叶中5个氮代谢基因在不同时间段表达的影响 | 第58-59页 |
| 2.4.2 土壤施尿素对葡萄叶片和根中5个氮代谢基因在不同时间段表达的影响 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-64页 |
| 全文总结 | 第64-66页 |
| 创新点 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-80页 |
| 攻读硕士期间论文发表与投稿情况 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
