| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 文献回顾 | 第20-30页 |
| 第一部分 RAN在结直肠癌组织中的表达、分布及亚细胞定位 | 第30-46页 |
| 1 材料 | 第30-33页 |
| 1.1 细胞株的获得 | 第30页 |
| 1.2 临床病例资料 | 第30-32页 |
| 1.3 主要实验仪器和试剂 | 第32-33页 |
| 2 方法 | 第33-38页 |
| 2.1 组织芯片的制作 | 第33页 |
| 2.2 免疫组织化学染色 | 第33-34页 |
| 2.3 统计学分析 | 第34-35页 |
| 2.4 细胞和新鲜组织样品的制备 | 第35-37页 |
| 2.5 SDS-PAGE 及 Western blot | 第37页 |
| 2.6 Ran 的亚细胞定位 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-43页 |
| 3.1 成功制备结直肠癌组织芯片 | 第38-39页 |
| 3.2 免疫组织化学染色评判结果 | 第39-40页 |
| 3.3 Ran 的表达与结直肠癌组织临床病理特征的关系 | 第40-41页 |
| 3.4 Western blot 证实 Ran 在结直肠癌组织中过表达 | 第41-42页 |
| 3.5 Ran 主要定位于细胞核中 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 第二部分 RAN的表达与结直肠癌预后之间的关系 | 第46-53页 |
| 1 材料 | 第46-47页 |
| 1.1 临床病例资料 | 第46页 |
| 1.2 主要实验仪器和试剂 | 第46-47页 |
| 2 方法 | 第47页 |
| 2.1 免疫组织化学染色 | 第47页 |
| 2.2 统计学分析 | 第47页 |
| 3 结果 | 第47-51页 |
| 3.1 免疫组织化学染色结果判读 | 第47页 |
| 3.2 免疫组织化学染色分析组织芯片中 Ran 的表达与 CRC 病例预后的关系 | 第47-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第三部分 RAN对结直肠癌细胞体内外生长增殖能力的影响 | 第53-65页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 siRNA-Ran-RiboTM的获得 | 第53页 |
| 1.2 慢病毒的包装 | 第53-54页 |
| 1.3 试剂和主要实验仪器 | 第54页 |
| 1.4 实验动物 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-59页 |
| 2.1 细胞培养 | 第54页 |
| 2.2 建立 siRNA-Ran-SW620 瞬转细胞系 | 第54-55页 |
| 2.3 筛选最佳干扰效果的 siRNA | 第55-56页 |
| 2.4 构建稳转的细胞系 | 第56-57页 |
| 2.5 MTT 检测细胞生长 | 第57页 |
| 2.6 平板集落形成实验 | 第57-58页 |
| 2.7 流式细胞术检测细胞周期 | 第58页 |
| 2.8 裸鼠成瘤实验 | 第58页 |
| 2.9 统计学分析 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-63页 |
| 3.1 干扰的 SW620 细胞系的鉴定 | 第59页 |
| 3.2 稳转细胞系的鉴定 | 第59-60页 |
| 3.3 MTT 实验结果 | 第60-61页 |
| 3.4 平板集落形成实验结果 | 第61页 |
| 3.5 FCM 检测细胞周期的结果 | 第61-62页 |
| 3.6 裸鼠成瘤实验结果 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 个人简历和研究成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
