| Abstract | 第4页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第5-8页 |
| 1. INTRODUCTION | 第8-20页 |
| 1.1 HBoV HISTORY | 第8页 |
| 1.2 HBoV1 MOLECULAR VIROLOGY | 第8-10页 |
| 1.2.1 Classification | 第8-10页 |
| 1.2.2 HBoV1 Morphology | 第10页 |
| 1.2.3 Genomic Structure of HBoV | 第10页 |
| 1.3 STRATEGY TO STUDY HBoV1 PROTEIN GENES | 第10-19页 |
| 1.3.1 Molecular cloning | 第11-15页 |
| a.The plasmids in molecular cloning | 第11-12页 |
| b. pMal-vector for DH5α | 第12-13页 |
| c. The pFastBac~(TM) vector for DH10Bac | 第13-15页 |
| 1.3.2 Expression of cloned gene | 第15-19页 |
| a.Fusion Protein Expression | 第15-16页 |
| b. Affinity chromatography | 第16页 |
| c. Baculovirus Expression Vector system | 第16-19页 |
| ◇Transfer vector | 第17页 |
| ◇ Baculovirus expression vectors | 第17-19页 |
| 1.4 THE PURPOSE AND SIGNIFICANCE OF THE STUDY | 第19-20页 |
| 2. MATERIALS | 第20-21页 |
| 3. METHODS | 第21-28页 |
| 3.1 BACULOVIRUS GENERATION EXPRESSION SYSTEM | 第21-25页 |
| 3.1.1 pFBacHTA-HBoV transfer vector | 第21-22页 |
| 3.1.2 Interested genes isolation | 第22页 |
| 3.1.3 Subcloning into transfer Vector (pFBacHTA-HBoV) | 第22-23页 |
| 3.1.4 Generation of Bacmid DNA (transformation of E. coli DH10Bac with pFBacHTA:Bac-to-Bac system) | 第23-24页 |
| 3.1.5 Generation of recombinant baculovirus | 第24-25页 |
| 3.2 GENE DELIVERY INTO MAMMALIAN CELLS | 第25-27页 |
| 3.2.1. The mammalian cells transduction | 第25-26页 |
| 3.2.2. Immunofluorescence | 第26-27页 |
| 3.3 ANTIBODY PREPARATION | 第27-28页 |
| 3.3.1 Recombinant fusion protein and purification | 第27页 |
| 3.3.2 Western Blotting | 第27-28页 |
| 4 RESULTS AND ANALYSIS | 第28-44页 |
| 4.1 GENES DELIVERY | 第28-40页 |
| 4.1.1 pFBacHTA-HBoV transfer vector | 第28-29页 |
| 4.1.2 Recombinant transfer vectors | 第29-32页 |
| 4.1.3 Recombinant viral DNA (Bacmid) | 第32-34页 |
| 4.1.4. Generation of recombinant baculovirus | 第34-38页 |
| 4.1.5. Mammalian cells transduction | 第38-40页 |
| 4.2 ANTIBODY PREPARATION | 第40-44页 |
| 4.2.1 Construction of recombinant plasmid | 第40-41页 |
| 4.2.2 Expression and purification of NBP-M(NS1) fusion protein | 第41-43页 |
| 4.2.3. Polyclonal antibody production and analysis | 第43-44页 |
| 5. DISCUSSION AND SUMMARY | 第44-45页 |
| 6. REFERENCES | 第45-46页 |
