| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 縮略语 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 研究现状、成果 | 第12-13页 |
| 研究目的、方法 | 第13-15页 |
| 对象和方法 | 第15-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-19页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第15页 |
| 1.1.2 临床病例资料 | 第15页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第15-18页 |
| 1.1.4 主要试剂配制 | 第18-19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-37页 |
| 1.2.1 免疫组织化学 | 第19-22页 |
| 1.2.2 组织中提取RNA,半定量RT-PCR | 第22-25页 |
| 1.2.3 原位杂交 | 第25-27页 |
| 1.2.4 细胞培养 | 第27-28页 |
| 1.2.5 质粒构建,siRNA合成转染 | 第28-30页 |
| 1.2.6 细胞系中RNA提取及半定量RT-PCR | 第30页 |
| 1.2.7 Western Blot实验 | 第30-33页 |
| 1.2.8 免疫荧光实验 | 第33-34页 |
| 1.2.9 细胞增殖实验 | 第34页 |
| 1.2.10 免疫细胞化学 | 第34-35页 |
| 1.2.11 流式细胞术细胞周期分析 | 第35-36页 |
| 1.2.12 细胞总RNA的提取和基因芯片分析 | 第36页 |
| 1.2.13 Real-time PCR验证基因芯片筛选的差异基因 | 第36-37页 |
| 1.3 统计分析 | 第37-39页 |
| 结果 | 第39-65页 |
| 2.1 Nek2在患者乳腺组织样本中的表达 | 第39-43页 |
| 2.1.1 患者乳腺组织样本中Nek2蛋白表达 | 第40-42页 |
| 2.1.2 在患者乳腺组织样本中Nek2表达与临床病理学指标的关系 | 第42-43页 |
| 2.2 β-catenin在患者乳腺组织样本中的表达 | 第43-48页 |
| 2.2.1 患者乳腺组织样本中β-catenin表达 | 第43-45页 |
| 2.2.2 患者乳腺组织样本中β-catenin表达与临床病理学指标的关系 | 第45-48页 |
| 2.3 患者乳腺组织样本中Nek2表达与β-catenin及Ki67的关系 | 第48-49页 |
| 2.4 患者乳腺组织样本中Nek2 mRNA表达 | 第49页 |
| 2.5 Nek2A特异探针行原位杂交 | 第49-53页 |
| 2.6 Nek2及其剪接异构体Nek2A在MCF-10系列细胞系中的表达 | 第53-54页 |
| 2.7 Nek2A质粒转染Nek2及Nek2A低表达的细胞系MCF-10A | 第54-55页 |
| 2.8 Nek2A-siRNA转染Nek2高表达的细胞系MCF-10DCIS.com | 第55-65页 |
| 讨论 | 第65-74页 |
| 3.1 Nek2及Nek2A激酶与乳腺癌中心体异常 | 第65-66页 |
| 3.2 Nek2及Nek2A的结构及其在恶性肿瘤中的表达 | 第66-68页 |
| 3.3 Nek2及Nek2A表达与增殖指数Ki-67的关系 | 第68-69页 |
| 3.4 Nek2和β-catenin表达的相关性 | 第69-71页 |
| 3.5 Nek2在MCF-10细胞系的表达 | 第71-72页 |
| 3.6 Nek2及Nek2A过表达对异常中心体的影响 | 第72页 |
| 3.7 Nek2A-siRNA可能通过细胞周期阻滞影响细胞增殖 | 第72-74页 |
| 全文结论 | 第74-76页 |
| 论文创新点 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第85-87页 |
| 综述 乳腺原位癌研究新进展 | 第87-102页 |
| 综述参考文献 | 第97-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
