| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第10页 |
| 1.2 国内外小麦遗传转化的研究进展 | 第10-19页 |
| 1.2.1 基因枪法转化小麦的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.2 影响基因枪转化小麦因素的研究 | 第11-17页 |
| 1.2.2.1 受体材料的基因型的影响 | 第11-12页 |
| 1.2.2.2 外植体的选择 | 第12-13页 |
| 1.2.2.3 基因枪轰击因素的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.2.4 筛选标记系统的选择 | 第14-17页 |
| 1.2.3 多基因共转化研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.4 最小表达框转化研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 小麦抗赤霉病防卫基因基因工程研究进展 | 第19-22页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 转化基因的制备 | 第23-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1.1 菌株及质粒 | 第23页 |
| 2.1.1.2 酶及试剂 | 第23页 |
| 2.1.1.3 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.1.2.1 感受态细胞的热激转化 | 第24页 |
| 2.1.2.2 转化菌株的扩大培养与质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.1.2.3 DNA片段的制备 | 第25-26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-28页 |
| 2.2.1 最小表达框的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 用于转化小麦的基因 | 第27-28页 |
| 3 基因枪介导的小麦幼胚愈伤多基因共转化 | 第28-54页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-38页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第28-32页 |
| 3.1.1.1 小麦品种与转化基因 | 第28页 |
| 3.1.1.2 转化受体 | 第28页 |
| 3.1.1.3 培养基及试剂 | 第28-31页 |
| 3.1.1.4 引物 | 第31-32页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 3.1.2.1 幼胚的接种和培养 | 第32页 |
| 3.1.2.2 愈伤组织高渗处理及基因枪轰击 | 第32-33页 |
| 3.1.2.3 恢复培养及筛选 | 第33页 |
| 3.1.2.4 壮苗、春化及移栽 | 第33页 |
| 3.1.2.5 叶片基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| 3.1.2.6 PCR扩增 | 第34页 |
| 3.1.2.7 RNA的提取 | 第34-35页 |
| 3.1.2.8 转基因小麦的Southern杂交 | 第35-38页 |
| 3.1.2.9 种子的萌发及春化 | 第38页 |
| 3.1.2.10 赤霉病抗性的鉴定 | 第38页 |
| 3.2 结果与分析 | 第38-54页 |
| 3.2.1 小麦幼胚愈伤基因枪转化及转基因植株的获得 | 第38-39页 |
| 3.2.2 不同小麦品种及筛选体系对小麦幼胚转化的影响 | 第39-42页 |
| 3.2.3 扬麦15转Ech42-D2、AFP2-D2基因植株的鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2.3.1 扬麦15转Ech42-D2、AFP2-D2基因植株的PCR鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2.3.2 扬麦15转Ech42-D2基因植株的RT-PCR鉴定 | 第44页 |
| 3.2.4 转UEch42、D4E1、AFP2-D2基因植株的鉴定 | 第44-51页 |
| 3.2.4.1 转UEch42、D4E1、AFP2-D2基因植株的PCR鉴定 | 第44-48页 |
| 3.2.4.2 转UEch42、D4E1、AFP2-D2基因植株的Southern杂交 | 第48-49页 |
| 3.2.4.3 转UEch42、D4E1、AFP2-D2基因植株的RT-PCR鉴定 | 第49-51页 |
| 3.2.5 转Ech42-D2、HvchiD2、AFP2基因植株的鉴定 | 第51页 |
| 3.2.6 转基因小麦赤霉病抗性的鉴定 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
