| 中文摘要 | 第1-17页 |
| Abstract | 第17-21页 |
| 1 前言 | 第21-75页 |
| ·核酸疫苗的研究进展 | 第21-38页 |
| ·核酸疫苗的构成 | 第21-23页 |
| ·抗原编码基因 | 第22页 |
| ·真核表达质粒载体 | 第22-23页 |
| ·核酸疫苗的分类 | 第23页 |
| ·核酸疫苗可能的作用机制 | 第23-27页 |
| ·核酸疫苗的免疫 | 第27-34页 |
| ·靶细胞的选择 | 第27页 |
| ·接种前动物组织的预处理 | 第27-28页 |
| ·核酸疫苗的接种方法和途径 | 第28-29页 |
| ·核酸疫苗的接种剂量 | 第29页 |
| ·核酸疫苗的免疫佐剂选择 | 第29-34页 |
| ·细胞因子佐剂 | 第29-31页 |
| ·协同刺激分子佐剂 | 第31-32页 |
| ·补体佐剂 | 第32-33页 |
| ·免疫刺激序列( | 第33页 |
| ·霍乱毒素(choleratoxin,CT)和大肠杆菌不耐热肠毒素( | 第33-34页 |
| ·蛋白转换域( | 第34页 |
| ·模拟或增强 MHC 作用 | 第34页 |
| ·核酸疫苗的应用 | 第34-36页 |
| ·寄生虫核酸疫苗 | 第34-35页 |
| ·细菌核酸疫苗 | 第35页 |
| ·病毒核酸疫苗 | 第35-36页 |
| ·核酸疫苗研究的意义及展望 | 第36-38页 |
| ·分子佐剂补体C3d 的研究进展 | 第38-57页 |
| ·补体系统的组成 | 第38-39页 |
| ·补体固有成分 | 第38页 |
| ·补体调节蛋白 | 第38-39页 |
| ·补体受体 | 第39页 |
| ·补体的激活 | 第39-41页 |
| ·经典激活途径 | 第39-40页 |
| ·旁路途径 | 第40-41页 |
| ·凝集素途径 | 第41页 |
| ·C3d 的结构特征及生物学功能 | 第41-47页 |
| ·C3d 的产生 | 第41-42页 |
| ·C3d 的分子结构 | 第42-43页 |
| ·C3d 的天然受体CR2 | 第43-46页 |
| ·CR2 与C3d 的结合位点 | 第46-47页 |
| ·C3d 佐剂作用的研究方法 | 第47-49页 |
| ·C3d 分子间的直接串联 | 第47-48页 |
| ·C3d 与CR2 结合功能区的串联 | 第48-49页 |
| ·C3d 分子的佐剂作用 | 第49-53页 |
| ·C3d 对体液免疫应答的影响 | 第49-51页 |
| ·C3d 对细胞免疫应答的影响 | 第51页 |
| ·C3d 对细胞因子表达类型的影响 | 第51-52页 |
| ·对抗原特异性体液和细胞免疫的负向调节作用 | 第52页 |
| ·小鼠品系对C3d 免疫作用的影响 | 第52-53页 |
| ·C3d 分子佐剂作用的可能机制 | 第53-55页 |
| ·C3d 偶联抗原可增强CR2细胞（B 细胞，FDC 等）对抗原的摄取 | 第53页 |
| ·促进B 细胞活化，降低B 细胞的活化阈 | 第53-54页 |
| ·促进抗体亲合力成熟 | 第54页 |
| ·上调Raji 细胞协同刺激分子87-1 和87-2 的表达 | 第54-55页 |
| ·依赖B 细胞CR2 受体，且相应的抗原必须与C3d 偶联在一起才能发挥作用 | 第55页 |
| ·不同动物C3d 的研究 | 第55-57页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5 蛋白研究进展 | 第57-74页 |
| ·PRRSV 的结构及其生物学特性 | 第57-62页 |
| ·PRRSV 的形态结构 | 第57-58页 |
| ·PRRSV 的理化性质 | 第58页 |
| ·PRRSV 的生物学结构 | 第58-60页 |
| ·PRRSV GP5 蛋白 | 第60-62页 |
| ·PRRSV 的免疫特性 | 第62-65页 |
| ·PRRSV 的持续性感染与免疫抑制 | 第65-66页 |
| ·PRRS 的诊断方法研究进展 | 第66-71页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第66-67页 |
| ·抗原检测方法 | 第67页 |
| ·PRRSV 的分子生物学诊断 | 第67-69页 |
| ·血清学诊断 | 第69-71页 |
| ·基于GP5 蛋白的疫苗研究进展 | 第71-74页 |
| ·核酸疫苗 | 第71页 |
| ·重组多肽疫苗 | 第71-72页 |
| ·活载体疫苗 | 第72-74页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第74-75页 |
| 2 材料与方法 | 第75-106页 |
| ·材料 | 第75-78页 |
| ·毒株和菌株 | 第75页 |
| ·载体 | 第75-76页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第76-77页 |
| ·试验动物 | 第77页 |
| ·主要仪器 | 第77页 |
| ·溶液及配制 | 第77-78页 |
| ·RT-PCR 相关物品的处理 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-106页 |
| ·哺乳动物鼠、猪的补体C3d 基因的克隆及序列分析 | 第78-83页 |
| ·鼠、猪C3d 基因的克隆 | 第78-80页 |
| ·C3d 和pMD18-T 载体的构建 | 第80-83页 |
| ·鼠、猪C3d 基因的测序 | 第83页 |
| ·哺乳动物与禽类补体C3d 基因序列的比较分析 | 第83页 |
| ·不同动物C3d 分子佐剂PRRSV GP5 核酸疫苗的构建 | 第83-93页 |
| ·鼠、猪C3d-p28 串联体的构建 | 第83-87页 |
| ·pcDNA3.1-C3d-p28.n(n=2，4，6)的构建 | 第87-89页 |
| ·PRRSV GP5 基因的扩增 | 第89-90页 |
| ·pcDNA3.1-GP5-C3d-p28(29).n 重组质粒的构建 | 第90-93页 |
| ·不同动物C3d 分子佐剂对PRRSV GP5 核酸疫苗免疫增强效果研究 | 第93-101页 |
| ·重组质粒在Marc145 细胞的表达 | 第93-95页 |
| ·GP5 核酸疫苗免疫小鼠效果检测 | 第95-101页 |
| ·数据处理和分析 | 第101页 |
| ·鼠C3d 分子佐剂沙门氏菌invH 核酸疫苗的构建及免疫效果研究 | 第101-106页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-invH-mC3d-p28.2 4 6 的构建 | 第101-102页 |
| ·重组质粒在Marc145 细胞的表达 | 第102-103页 |
| ·invH 重组质粒免疫小鼠效果检测 | 第103-105页 |
| ·数据处理和分析 | 第105-106页 |
| 3 结果与分析 | 第106-129页 |
| ·哺乳动物鼠、猪的补体C3d 基因的克隆及序列分析 | 第106-114页 |
| ·鼠、猪C3d 基因克隆的电泳结果 | 第106页 |
| ·pMD18-T-C3d 的PCR 及酶切鉴定 | 第106-107页 |
| ·补体C3d cDNA 的测序及序列分析 | 第107-114页 |
| ·鼠、猪的C3d 序列 | 第107-109页 |
| ·C3d 基因序列比较分析 | 第109-113页 |
| ·CR2 结合区氨基酸同源性比较 | 第113-114页 |
| ·不同动物C3d 分子佐剂PRRSV GP5 核酸疫苗的构建 | 第114-117页 |
| ·C3d-p28 串联体的构建 | 第114-115页 |
| ·单拷贝C3d-p28 基因克隆 | 第114-115页 |
| ·C3d-p28 串联体的构建 | 第115页 |
| ·RT-PCR 扩增PRRSV GP5 基因 | 第115-116页 |
| ·pcDNA3.1-GP5-C3d-p28(29).n 重组质粒的构建 | 第116-117页 |
| ·不同动物C3d 分子佐剂对PRRSV GP5 核酸疫苗免疫增强效果研究 | 第117-126页 |
| ·GP5 表达结果 | 第117-118页 |
| ·安全性检验结果 | 第118页 |
| ·GP5 核酸疫苗的免疫效果 | 第118-126页 |
| ·抗体水平检测结果 | 第118-120页 |
| ·中和抗体测定结果 | 第120-122页 |
| ·IFN-γ含量的测定结果 | 第122-124页 |
| ·IL-4 含量的测定 | 第124-126页 |
| ·鼠C3d 分子佐剂沙门氏菌invH 核酸疫苗的构建及免疫效果研究 | 第126-129页 |
| ·pcDNA3.1-invH-mC3d-p28.n 重组质粒的构建 | 第126页 |
| ·invH 表达结果 | 第126-127页 |
| ·安全性检验结果 | 第127页 |
| ·invH 核酸疫苗的免疫效果 | 第127-129页 |
| ·invH 抗体水平结果 | 第127页 |
| ·小鼠血清中IL-4 和IFN-γ的含量 | 第127-128页 |
| ·小鼠攻毒保护试验 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-140页 |
| ·哺乳动物鼠、猪的补体C3d 基因的克隆 | 第129-130页 |
| ·不同动物C3d 分子佐剂PRRSV GP5 核酸疫苗构建 | 第130-132页 |
| ·不同动物C3d 分子佐剂PRRSV GP5 核酸疫苗免疫增强效果研究的意义 | 第132-138页 |
| ·鼠C3d 沙门氏菌invH 核酸疫苗构建及免疫效果研究的意义 | 第138-140页 |
| 结论 | 第140-141页 |
| 参考文献 | 第141-163页 |
| 致谢 | 第163-164页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第164-165页 |
| 博士学位论文内容简介及自评 | 第165页 |
