致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
引言 | 第12-17页 |
1 材料 | 第17-22页 |
1.1 主要仪器 | 第17-18页 |
1.2 主要试剂与药物 | 第18-19页 |
1.2.1 基础试剂 | 第18页 |
1.2.2 细胞培养相关试剂 | 第18页 |
1.2.3 细胞转染相关试剂 | 第18页 |
1.2.4 细菌培养相关试剂 | 第18-19页 |
1.2.5 试剂盒 | 第19页 |
1.2.6 分子克隆实验相关试剂 | 第19页 |
1.2.7 荧光素酶报告基因实验相关试剂 | 第19页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第19-20页 |
1.4 实验用质粒 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-34页 |
2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
2.2 TRAP(Transcription factor affinity prediction) | 第23-24页 |
2.3 分子克隆 | 第24-32页 |
2.3.1 Lamc1启动子区分子克隆 | 第24-28页 |
2.3.2 Mkp1启动子区分子克隆 | 第28-30页 |
2.3.3 GCNT3外显子1 15bp分子克隆 | 第30-32页 |
2.4 质粒转染 | 第32页 |
2.5 荧光素酶活性检测 | 第32-34页 |
3 结果 | 第34-52页 |
3.1 LAMC1结果 | 第34-39页 |
3.1.1 在LAMC1启动子区预测到两个潜在NRF2结合位点 | 第34-35页 |
3.1.2 LAMC1基因ARE序列在不同物种之间高度保守 | 第35-36页 |
3.1.3 成功构建LAMC1基因相关荧光素酶报告基因载体 | 第36-38页 |
3.1.4 LAMC1基因两个ARE序列均具有诱导活性 | 第38-39页 |
3.2 MKP1结果 | 第39-45页 |
3.2.1 在MKP1外显子1,2,3和4 151bp内未预测到NRF2结合位点 | 第39页 |
3.2.2 在人源MKP1启动子区预测到三个潜在NRF2结合位点 | 第39-40页 |
3.2.3 在小鼠Mkp1启动子区预测到两个潜在NRF2结合位点 | 第40-42页 |
3.2.4 成功构建小鼠Mkp1启动子区相关荧光素酶报告基因载体 | 第42-44页 |
3.2.5 Mkp1基因ARE2序列具有诱导活性 | 第44-45页 |
3.3 GCNT3结果 | 第45-52页 |
3.3.1 在鼠源Gcnt3启动子区2kb内预测到三个潜在NRF2结合位点 | 第45-46页 |
3.3.2 在人源GCNT3启动子区2kb以内预测到四个潜在NRF2结合位点 | 第46-47页 |
3.3.3 在人源GCNT3基因151bp片段内预测到一个潜在NRF2结合位点 | 第47-48页 |
3.3.4 GCNT3基因ARE序列在人和大猩猩间高度保守 | 第48-49页 |
3.3.5 成功构建GCNT3基因相关荧光素酶报告基因载体 | 第49-50页 |
3.3.6 人源GCNT3基因151bp内ARE具有诱导活性 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
综述 | 第60-75页 |
References | 第69-75页 |
作者简历 | 第75页 |