| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| 1.1 葡萄病毒种类 | 第14-16页 |
| 1.2 葡萄扇叶病简介 | 第16-21页 |
| 1.2.1 葡萄扇叶病 | 第16-17页 |
| 1.2.2 葡萄扇叶病症状及危害 | 第17-18页 |
| 1.2.3 葡萄扇叶病在我国的发生情况 | 第18页 |
| 1.2.4 扇叶病毒的传播途径 | 第18-19页 |
| 1.2.5 葡萄扇叶病病原 | 第19-21页 |
| 1.3 葡萄扇叶病毒检测方法 | 第21-25页 |
| 1.3.1 田间症状观察 | 第21页 |
| 1.3.2 电镜观察 | 第21-22页 |
| 1.3.3 生物学检测 | 第22页 |
| 1.3.4 血清学检测 | 第22-23页 |
| 1.3.5 分子生物学检测 | 第23-25页 |
| 1.4 葡萄扇叶病防治 | 第25-26页 |
| 1.5 研究展望 | 第26页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-34页 |
| 2.1 植物材料与试剂 | 第27-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 引物 | 第27-28页 |
| 2.1.4 实验所用仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 研究方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 植物材料的采集 | 第29页 |
| 2.2.2 总RNA提取和c DNA合成 | 第29页 |
| 2.2.3 GFLV检测体系 | 第29-31页 |
| 2.2.4 GFLV全基因组扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.5 PCR产物的克隆与测序 | 第32页 |
| 2.2.6 序列分析 | 第32-33页 |
| 2.2.7 草本指示植物摩擦接种 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-67页 |
| 3.1 GFLV巢式PCR检测 | 第34-37页 |
| 3.1.1 总RNA提取 | 第34页 |
| 3.1.2 两套巢式PCR引物检测效果比较 | 第34页 |
| 3.1.3 葡萄不同部位巢式PCR检测结果 | 第34-35页 |
| 3.1.4 GFLV巢式PCR检测结果 | 第35-37页 |
| 3.2 GFLV荧光定量PCR的检测 | 第37-44页 |
| 3.2.1 引物的特异性 | 第37-39页 |
| 3.2.2 实时荧光定量RT-PCR反应条件优化 | 第39页 |
| 3.2.3 扩增效率的比较 | 第39页 |
| 3.2.4 灵敏度比较 | 第39-40页 |
| 3.2.5 重复性检测结果 | 第40-41页 |
| 3.2.6 内参基因的稳定性 | 第41页 |
| 3.2.7 不同样品间GFLV相对含量的比较 | 第41-42页 |
| 3.2.8 同一葡萄样品不同部位相对含量比较 | 第42-43页 |
| 3.2.9 田间葡萄样品实时荧光定量检测 | 第43-44页 |
| 3.3 GFLV MP、CP序列分析 | 第44-49页 |
| 3.3.1 样品选择 | 第44-45页 |
| 3.3.2 GFLV分离物多样性分析 | 第45页 |
| 3.3.3 GFLV分离物重组和进化树分析 | 第45-48页 |
| 3.3.4 GFLV分离物的遗传分化和基因漂移分析 | 第48-49页 |
| 3.4 GFLV全基因组序列扩增与分析 | 第49-67页 |
| 3.4.1 GFLV全基因组序列扩增 | 第49-50页 |
| 3.4.2 GFLV-SDHN分离物多样性分析 | 第50-62页 |
| 3.4.3 GFLV-SDHN分离物进化树分析 | 第62-64页 |
| 3.4.4 GFLV-SDHN分离物重组分析 | 第64页 |
| 3.4.5 GFLV-SDHN摩擦接种草本指示植物 | 第64-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-70页 |
| 4.1 GFLV巢式RT-PCR检测效果 | 第67页 |
| 4.2 GFLV实时荧光定量RT-PCR检测效果 | 第67-68页 |
| 4.3 我国GFLV MP、CP序列多样性 | 第68页 |
| 4.4 GFLV-SDHN的起源与进化 | 第68-70页 |
| 第五章 全文结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历 | 第82页 |