摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 猪流行性腹泻概述 | 第12-16页 |
1.1.1 猪流行性腹泻病原特征及分类地位 | 第12页 |
1.1.2 猪流行性腹泻病毒的结构基因 | 第12-14页 |
1.1.3 猪流行性腹泻的流行病学特征 | 第14-15页 |
1.1.4 猪流行性腹泻的临床症状及病理变化 | 第15页 |
1.1.5 猪流行性腹泻的致病机理 | 第15-16页 |
1.1.6 猪流行性腹泻病毒在体外的增殖培养 | 第16页 |
1.2 猪传染性胃肠炎概述 | 第16-19页 |
1.2.1 猪传染性胃肠炎病原特征及分类地位 | 第16-17页 |
1.2.2 猪传染性胃肠炎病毒的结构基因 | 第17-18页 |
1.2.3 猪传染性胃肠炎的流行病学特征 | 第18页 |
1.2.4 猪传染性胃肠炎的临床症状及病理变化 | 第18页 |
1.2.5 猪传染性胃肠炎的致病机理 | 第18-19页 |
1.3 氨基肽酶概述 | 第19-21页 |
1.3.1 氨基肽酶研究进展 | 第19页 |
1.3.2 猪氨基肽酶的结构与功能 | 第19-20页 |
1.3.3 氨基肽酶抑制剂及抗体 | 第20-21页 |
1.4 研究的目的意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-40页 |
2.1 试验材料 | 第23-27页 |
2.1.1 细胞、病毒与抗体 | 第23页 |
2.1.2 质粒与菌株 | 第23页 |
2.1.3 实验动物 | 第23页 |
2.1.4 引物 | 第23页 |
2.1.5 培养基和主要试剂 | 第23-24页 |
2.1.6 主要试剂的配制 | 第24-26页 |
2.1.7 主要实验仪器设备 | 第26-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-40页 |
2.2.1 p APN蛋白的表达与鉴定 | 第27-33页 |
2.2.2 杂交瘤细胞筛选方法的建立 | 第33-34页 |
2.2.3 杂交瘤细胞株的建立与筛选 | 第34-36页 |
2.2.4 单克隆抗体特性的鉴定 | 第36-38页 |
2.2.5 阻断p APN受体能力的检测 | 第38-40页 |
3 结果 | 第40-59页 |
3.1 表达pAPN和SPC重组载体的鉴定结果 | 第40-41页 |
3.1.1 表达p APN重组载体的鉴定结果 | 第40-41页 |
3.1.2 表达SPC重组载体的鉴定结果 | 第41页 |
3.2 p APN蛋白的表达及鉴定结果 | 第41-43页 |
3.2.1 SDS-PAGE鉴定结果 | 第41-42页 |
3.2.2 Western blot检测结果 | 第42-43页 |
3.3 SPC蛋白的表达及鉴定结果 | 第43-44页 |
3.3.1 SDS-PAGE鉴定结果 | 第43页 |
3.3.2 Western blot检测结果 | 第43-44页 |
3.4 p APN蛋白与SPC蛋白的纯化及鉴定结果 | 第44-45页 |
3.5 杂交瘤细胞筛选方法的建立 | 第45页 |
3.6 杂交瘤细胞株筛选和建立 | 第45页 |
3.7 单克隆抗体特性的鉴定结果 | 第45-59页 |
3.7.1 单克隆抗体效价的测定结果 | 第45页 |
3.7.2 单克隆抗体亚类鉴定结果 | 第45-46页 |
3.7.3 杂交瘤细胞染色体计数 | 第46页 |
3.7.4 杂交瘤细胞分泌单克隆抗体稳定性的鉴定结果 | 第46页 |
3.7.5 单克隆抗体针对抗原表位的初步鉴定结果 | 第46-47页 |
3.7.6 间接免疫荧光试验结果 | 第47-48页 |
3.7.7 阻断与PEDV结合的p APN受体能力的鉴定结果 | 第48-53页 |
3.7.8 阻断与TGEV结合的p APN受体能力的鉴定结果 | 第53-59页 |
4 讨论 | 第59-63页 |
4.1 以天然p APN蛋白为免疫原制备单克隆抗体的优势 | 第59页 |
4.2 单克隆抗体制备过程中的几个关键性环节 | 第59-61页 |
4.3 抗p APN单克隆抗体的应用价值分析 | 第61-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
附录 | 第72-75页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第75页 |