中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 TargetScan筛选退变椎间盘髓核细胞凋亡相关lncRNA的研究 | 第14-20页 |
一、前言 | 第14-16页 |
二、材料与方法 | 第16-17页 |
(一)获取lncRNA序列信息 | 第16页 |
(二)miRNA研究情况及其序列信息 | 第16页 |
(三)TargetScan预测靶lncRNA | 第16-17页 |
(四)筛选目标lncRNA | 第17页 |
三、结果 | 第17-18页 |
四、讨论 | 第18-20页 |
第二部分 hsa-miR-155 过表达髓核细胞lncRNA及mRNA表达谱芯片研究 | 第20-33页 |
一、前言 | 第20-21页 |
二、材料与方法 | 第21-26页 |
(一)椎间盘髓核细胞培养 | 第21页 |
(二)外源性hsa-miR-155 mimics及对照组双链RNA合成 | 第21-22页 |
(三)髓核细胞转染hsa-miR-155 mimics及对照组双链RNA | 第22页 |
(四)RT-PCR检测转染hsa-miR-155 mimics后髓核细胞GAS5 lncRNA的表达 | 第22-24页 |
(五)hsa-miR-155 过表达慢病毒构建 | 第24-25页 |
(六)hsa-miR-155 过表达慢病毒转染髓核细胞 | 第25页 |
(七)hsa-miR-155 过表达后髓核细胞lncRNA及mRNA芯片检测分析 | 第25-26页 |
三、结果 | 第26-31页 |
(一)人椎间盘髓核细胞生长状况 | 第26页 |
(二)hsa-miR-155 过表达后髓核细胞GAS5 lncRNA表达下降 | 第26-27页 |
(三)hsa-miR-155 过表达慢病毒转染后髓核细胞生长状况 | 第27页 |
(四)样品RNA芯片分析质检结果 | 第27-28页 |
(五)hsa-miR-155 过表达后髓核细胞lncRNA及mRNA芯片分析结果 | 第28-29页 |
(六)has-miR-155 过表达后髓核细胞GAS5 lncRNA各转录本检测及表达 | 第29-31页 |
四、讨论 | 第31-33页 |
第三部分 GAS5 lncRNA调控椎间盘髓核细胞凋亡的功能机制研究 | 第33-40页 |
一、前言 | 第33页 |
二、材料与方法 | 第33-36页 |
(一)GAS5 lncRNA过表达慢病毒构建及转染 | 第33-34页 |
(二)GAS5 lncRNA过表达慢病毒转染髓核细胞后RT-PCR检测GAS5 lncRNA的表达 | 第34页 |
(三)蛋白质抽提及western blot检测 | 第34-35页 |
(四)流式细胞仪检测髓核细胞凋亡率 | 第35-36页 |
三、结果 | 第36-38页 |
(一)GAS5 lncRNA过表达慢病毒转染髓核细胞后GAS5 lncRNA表达上调 | 第36页 |
(二)髓核细胞过表达GAS5 lncRNA后Caspase-3 及Bcl-2 蛋白表达变化 | 第36-37页 |
(三)髓核细胞过表达GAS5 lncRNA后细胞凋亡率增加 | 第37-38页 |
四、讨论 | 第38-40页 |
全文总结 | 第40-41页 |
综述 GAS5 lncRNA在细胞生长抑制及凋亡中的作用机制及其研究进展 | 第41-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
在读期间发表论文和科研工作情况 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |