| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 本文所用英文缩写词表 | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 造血与血细胞分化发育 | 第11-14页 |
| 1.1.1 造血干细胞 | 第11-12页 |
| 1.1.2 造血干细胞的体外培养和应用 | 第12-14页 |
| 1.2 肿瘤干细胞理论 | 第14-16页 |
| 1.2.1 肿瘤干细胞的起源 | 第14页 |
| 1.2.2 肿瘤干细胞的生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.2.3 肿瘤干细胞的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 VENTX基因概述 | 第16-17页 |
| 1.3.1 VENTX基因简介 | 第16-17页 |
| 1.3.2 VENTX基因功能 | 第17页 |
| 1.4 转录因子GATA-2概述 | 第17-19页 |
| 1.4.1 GATA家族介绍 | 第17-18页 |
| 1.4.2 转录因子GATA-2功能 | 第18页 |
| 1.4.3 转录因子GATA-2在红系分化中的作用 | 第18-19页 |
| 1.5 研究内容和方法 | 第19-20页 |
| 第2章 VENTX促进人类造血干细胞向红系分化 | 第20-30页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第20-22页 |
| 2.2.1 主要试剂材料 | 第20-22页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 CD34~+细胞的分离和培养 | 第22-23页 |
| 2.3.2 过表达载体转染细胞 | 第23-24页 |
| 2.3.3 慢病毒载体感染CD34~+细胞 | 第24-25页 |
| 2.3.4 流式细胞仪分选细胞 | 第25页 |
| 2.3.5 免疫印记检测蛋白质方法(Western-Blot) | 第25-26页 |
| 2.3.6 细胞增殖实验 | 第26页 |
| 2.3.7 联苯胺染色检测 | 第26页 |
| 2.3.8 统计学方法 | 第26页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第26-29页 |
| 2.4.1 VENTX抑制造血干细胞的增殖 | 第26-28页 |
| 2.4.2 GATA-2调节VENTX诱导造血干细胞向红系分化 | 第28-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 乳腺癌细胞株中VENTX的表达及与肿瘤干细胞比例关系 | 第30-42页 |
| 3.1 前言 | 第30-31页 |
| 3.2 实验材料及仪器 | 第31-32页 |
| 3.2.1 主要试剂材料 | 第31-32页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第32-34页 |
| 3.3.2 RNA的提取 | 第34-35页 |
| 3.3.3 逆转录反应 | 第35页 |
| 3.3.4 相对荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 3.3.5 流式细胞检测技术 | 第36页 |
| 3.3.6 统计学方法 | 第36-37页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第37-40页 |
| 3.4.1 几种乳腺癌细胞株无血清悬浮培养的肿瘤微球成球情况 | 第37-38页 |
| 3.4.2 几种乳腺癌细胞株VENTX的表达水平及肿瘤微球中肿瘤干细胞的比例检测 | 第38-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 第4章 乳腺癌细胞株中VENTX的过表达与肿瘤干细胞的分化 | 第42-54页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料及仪器 | 第42-44页 |
| 4.2.1 主要试剂材料 | 第42-43页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第43-44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.3.1 过表达载体的构建 | 第44-47页 |
| 4.3.2 细胞转染 | 第47-48页 |
| 4.3.3 MTT比色法检测细胞增殖 | 第48页 |
| 4.3.4 细胞周期 | 第48-49页 |
| 4.3.5 相对荧光定量PCR | 第49页 |
| 4.3.6 统计学方法 | 第49页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第49-53页 |
| 4.4.1 VENTX在乳腺癌细胞株BT549中的过表达 | 第49-50页 |
| 4.4.2 MTT检测细胞增殖 | 第50-51页 |
| 4.4.3 VENTX对BT549细胞周期的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.4 VENTX过表达对干细胞标志物及干细胞分化重要因子的影响 | 第52-53页 |
| 4.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
