摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第1章 绪论 | 第9-15页 |
1.1 CD82的分子结构特点 | 第9-10页 |
1.2 CD82蛋白的表达调节 | 第10-11页 |
1.2.1 CD82基因的转录调控 | 第10-11页 |
1.2.2 CD82基因的翻译后修饰 | 第11页 |
1.3 CD82在免疫应答中的作用 | 第11-12页 |
1.3.1 在T细胞免疫应答中的作用 | 第11-12页 |
1.3.2 在B细胞免疫应答中的作用 | 第12页 |
1.4 与肿瘤细胞的关系 | 第12-13页 |
1.4.1 参与调节细胞黏附 | 第12-13页 |
1.4.2 参与调节细胞迁移 | 第13页 |
1.5 诱导细胞凋亡 | 第13-14页 |
1.6 CD82的其它研究 | 第14页 |
1.7 小结 | 第14-15页 |
第2章 七鳃鳗CD82分子的生物信息学鉴定 | 第15-23页 |
2.1 分析所用的在线网站及软件 | 第15页 |
2.2 结果 | 第15-22页 |
2.2.1 同源序列比对 | 第15-17页 |
2.2.2 保守基序分析 | 第17-20页 |
2.2.3 系统发育分析 | 第20-22页 |
2.3 讨论 | 第22页 |
2.4 小结 | 第22-23页 |
第3章 重组CD82的载体构建、原核表达及蛋白纯化 | 第23-40页 |
3.1 材料 | 第23页 |
3.2 方法 | 第23-33页 |
3.2.1 改造pCold TF载体 | 第23-26页 |
3.2.2 设计引物 | 第26页 |
3.2.3 Overlap PCR法将目的基因与载体连接 | 第26-28页 |
3.2.4 重组质粒的提取及鉴定 | 第28-29页 |
3.2.5 CD82蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
3.2.6 SDS-PAGE鉴定 | 第30-31页 |
3.2.7 重组蛋白的纯化 | 第31-32页 |
3.2.8 Factor Xa蛋白酶切 | 第32-33页 |
3.3 结果 | 第33-39页 |
3.3.1 pCold TF载体的改造 | 第33-34页 |
3.3.2 GpCold TF-CD82重组载体构建及原核表达 | 第34-35页 |
3.3.3 七鳃鳗CD82重组蛋白的纯化 | 第35-39页 |
3.4 讨论 | 第39页 |
3.5 小结 | 第39-40页 |
第4章 七鳃鳗CD82多克隆抗体的制备及鉴定 | 第40-46页 |
4.1 材料和方法 | 第40-42页 |
4.1.1 材料 | 第40页 |
4.1.2 方法 | 第40-42页 |
4.2 结果 | 第42-45页 |
4.2.1 七鳃鳗CD82的抗原表位预测 | 第42页 |
4.2.2 七鳃鳗CD82多克隆抗体的效价测定 | 第42页 |
4.2.3 七鳃鳗CD82多克隆抗体的特异性检测 | 第42-45页 |
4.3 讨论 | 第45页 |
4.4 小结 | 第45-46页 |
第5章 七鳃鳗CD82相关的免疫组织化学研究 | 第46-54页 |
5.1 材料 | 第46页 |
5.2 方法 | 第46-49页 |
5.2.1 混合菌免疫七鳃鳗 | 第46页 |
5.2.2 白细胞分离及提取各组织 | 第46-47页 |
5.2.3 白细胞及各组织总蛋白的提取 | 第47页 |
5.2.4 Western blot检测CD82在各组织中的表达 | 第47页 |
5.2.5 免疫沉淀 | 第47-48页 |
5.2.6 免疫荧光 | 第48-49页 |
5.3 结果 | 第49-52页 |
5.3.1 七鳃鳗CD82在各组织中的相对表达 | 第49页 |
5.3.2 七鳃鳗CD82在不同时间点的相对表达 | 第49-51页 |
5.3.3 七鳃鳗CD82的免疫沉淀及质谱鉴定 | 第51页 |
5.3.4 七鳃鳗CD82在细胞中的定位和分布 | 第51-52页 |
5.4 讨论 | 第52-53页 |
5.5 小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
本论文的创新点 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
附录A 不同物种CD82和CD37的FASTA格式氨基酸序列 | 第60-66页 |
附录B pColdTF质粒图谱 | 第66-67页 |
附录C 免疫沉淀质谱图 | 第67-68页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |