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七鳃鳗CD82的原核表达、抗体制备及相关免疫组织化学研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第1章 绪论第9-15页
    1.1 CD82的分子结构特点第9-10页
    1.2 CD82蛋白的表达调节第10-11页
        1.2.1 CD82基因的转录调控第10-11页
        1.2.2 CD82基因的翻译后修饰第11页
    1.3 CD82在免疫应答中的作用第11-12页
        1.3.1 在T细胞免疫应答中的作用第11-12页
        1.3.2 在B细胞免疫应答中的作用第12页
    1.4 与肿瘤细胞的关系第12-13页
        1.4.1 参与调节细胞黏附第12-13页
        1.4.2 参与调节细胞迁移第13页
    1.5 诱导细胞凋亡第13-14页
    1.6 CD82的其它研究第14页
    1.7 小结第14-15页
第2章 七鳃鳗CD82分子的生物信息学鉴定第15-23页
    2.1 分析所用的在线网站及软件第15页
    2.2 结果第15-22页
        2.2.1 同源序列比对第15-17页
        2.2.2 保守基序分析第17-20页
        2.2.3 系统发育分析第20-22页
    2.3 讨论第22页
    2.4 小结第22-23页
第3章 重组CD82的载体构建、原核表达及蛋白纯化第23-40页
    3.1 材料第23页
    3.2 方法第23-33页
        3.2.1 改造pCold TF载体第23-26页
        3.2.2 设计引物第26页
        3.2.3 Overlap PCR法将目的基因与载体连接第26-28页
        3.2.4 重组质粒的提取及鉴定第28-29页
        3.2.5 CD82蛋白的诱导表达第29-30页
        3.2.6 SDS-PAGE鉴定第30-31页
        3.2.7 重组蛋白的纯化第31-32页
        3.2.8 Factor Xa蛋白酶切第32-33页
    3.3 结果第33-39页
        3.3.1 pCold TF载体的改造第33-34页
        3.3.2 GpCold TF-CD82重组载体构建及原核表达第34-35页
        3.3.3 七鳃鳗CD82重组蛋白的纯化第35-39页
    3.4 讨论第39页
    3.5 小结第39-40页
第4章 七鳃鳗CD82多克隆抗体的制备及鉴定第40-46页
    4.1 材料和方法第40-42页
        4.1.1 材料第40页
        4.1.2 方法第40-42页
    4.2 结果第42-45页
        4.2.1 七鳃鳗CD82的抗原表位预测第42页
        4.2.2 七鳃鳗CD82多克隆抗体的效价测定第42页
        4.2.3 七鳃鳗CD82多克隆抗体的特异性检测第42-45页
    4.3 讨论第45页
    4.4 小结第45-46页
第5章 七鳃鳗CD82相关的免疫组织化学研究第46-54页
    5.1 材料第46页
    5.2 方法第46-49页
        5.2.1 混合菌免疫七鳃鳗第46页
        5.2.2 白细胞分离及提取各组织第46-47页
        5.2.3 白细胞及各组织总蛋白的提取第47页
        5.2.4 Western blot检测CD82在各组织中的表达第47页
        5.2.5 免疫沉淀第47-48页
        5.2.6 免疫荧光第48-49页
    5.3 结果第49-52页
        5.3.1 七鳃鳗CD82在各组织中的相对表达第49页
        5.3.2 七鳃鳗CD82在不同时间点的相对表达第49-51页
        5.3.3 七鳃鳗CD82的免疫沉淀及质谱鉴定第51页
        5.3.4 七鳃鳗CD82在细胞中的定位和分布第51-52页
    5.4 讨论第52-53页
    5.5 小结第53-54页
结论第54-55页
本论文的创新点第55-56页
参考文献第56-60页
附录A 不同物种CD82和CD37的FASTA格式氨基酸序列第60-66页
附录B pColdTF质粒图谱第66-67页
附录C 免疫沉淀质谱图第67-68页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第68-69页
致谢第69页

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