| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 室内甲醛污染的来源 | 第12-13页 |
| 1.1.1 建筑和装饰材料 | 第12-13页 |
| 1.1.2 烟叶的不完全燃烧 | 第13页 |
| 1.1.3 食物 | 第13页 |
| 1.1.4 室外 | 第13页 |
| 1.2 甲醛的污染治理方法 | 第13-17页 |
| 1.2.1 通风换气式法 | 第14页 |
| 1.2.2 控制温湿度法 | 第14页 |
| 1.2.3 物理吸附法 | 第14页 |
| 1.2.4 化学法 | 第14-16页 |
| 1.2.5 生物法 | 第16-17页 |
| 1.3 甲醛在微生物中的代谢途径 | 第17-20页 |
| 1.3.1 甲醛代谢的同化途径 | 第17-19页 |
| 1.3.2 甲醛代谢的异化途径 | 第19-20页 |
| 1.4 国内外研究现状 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料和方法 | 第22-36页 |
| 2.1 实验中用到的试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 实验中用到的仪器 | 第24页 |
| 2.3 寡核苷酸的溶解 | 第24-25页 |
| 2.4 基因合成的两步法 | 第25-27页 |
| 2.4.1 DA-PCR | 第25-26页 |
| 2.4.2 OE-PCR | 第26-27页 |
| 2.4.3 T7核酸内切酶I处理 | 第27页 |
| 2.5 载体构建与测序 | 第27-31页 |
| 2.5.1 质粒提取 | 第27-28页 |
| 2.5.2 限制性内切酶消化 | 第28页 |
| 2.5.3 重组载体的连接 | 第28-29页 |
| 2.5.4 重组载体的热激转化 | 第29-30页 |
| 2.5.5 阳性克隆的菌落PCR法鉴定 | 第30-31页 |
| 2.6 外源蛋白的表达与活性测定 | 第31-32页 |
| 2.6.1 外源基因的诱导表达 | 第31页 |
| 2.6.2 FADH活性测定 | 第31-32页 |
| 2.7 培养条件对外源蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 2.7.1 蛋白胨对外源蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 2.7.2 葡萄糖对外源蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 2.7.3 HOCO浓度对外源蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 2.7.4 诱导时间对外源蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 2.7.5 培养温度对外源蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 2.7.6 菌体密度对外源蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 2.7.7 pH对外源蛋白表达的影响 | 第33页 |
| 2.8 NI~(2+)柱亲和层析纯化外源蛋白 | 第33-34页 |
| 2.8.1 Ni~(2+)柱亲和层析纯化外源蛋白 | 第33页 |
| 2.8.2 表达外源蛋白的SDS-PAGE检测 | 第33-34页 |
| 2.8.3 Folin-酚法测定蛋白 | 第34页 |
| 2.9 水环境中的甲醛降解实验 | 第34-35页 |
| 2.9.1 纯化FADH对水环境中的甲醛降解实验 | 第34页 |
| 2.9.2 冻干乳酸乳球菌对水环境中的甲醛降解实验 | 第34页 |
| 2.9.3 构建乳酸乳球工程菌在自然水体中生长及甲醛降解实验 | 第34-35页 |
| 2.10 空气环境中的甲醛降解实验 | 第35页 |
| 2.11 滤纸片甲醛检测生物传感器的制备 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-67页 |
| 3.1 L.LACTIS偏爱密码子编码的FADH基因合成 | 第36-47页 |
| 3.1.1 鞘氨醇单胞菌ACM-3962的FADH氨基酸序列 | 第36页 |
| 3.1.2 逆编码所用乳酸乳球菌密码子频率表 | 第36-38页 |
| 3.1.3 L.lactis偏爱密码子编码的FADH基因 | 第38页 |
| 3.1.4 拟合成序列全长 | 第38页 |
| 3.1.5 单链寡核苷酸的拆分 | 第38-40页 |
| 3.1.6 化学合成寡核苷酸的溶解与混合 | 第40-43页 |
| 3.1.7 两步法合成结果 | 第43-45页 |
| 3.1.8 亚克隆载体构建与测序 | 第45-47页 |
| 3.2 FADH启动子的合成与功能验证 | 第47-55页 |
| 3.2.1 拟合成序列全长 | 第47页 |
| 3.2.2 单链寡核苷酸的拆分 | 第47-49页 |
| 3.2.3 化学合成寡核苷酸的溶解与混合 | 第49-51页 |
| 3.2.4 两步法合成结果 | 第51-52页 |
| 3.2.5 功能验证载体构建与测序 | 第52-53页 |
| 3.2.6 FADH启动子功能验证 | 第53-55页 |
| 3.3 乳酸乳球菌表达载体构建 | 第55-57页 |
| 3.3.1 乳酸乳球菌表达载体pMG-FADH的构建 | 第55页 |
| 3.3.2 重组子的菌落PCR鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3.3 重组载体pMG-FADH的诱导表达 | 第56-57页 |
| 3.4 培养条件对FADH表达的影响 | 第57-60页 |
| 3.4.1 蛋白胨对FADH表达的影响 | 第57页 |
| 3.4.2 葡萄糖对FADH表达的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.3 HOCO浓度对FADH表达量的影响 | 第58页 |
| 3.4.4 诱导时间对FADH表达量的影响 | 第58页 |
| 3.4.5 培养温度对FADH表达量的影响 | 第58-59页 |
| 3.4.6 菌体密度对FADH表达的影响 | 第59页 |
| 3.4.7 pH对FADH表达的影响 | 第59页 |
| 3.4.8 最适发酵工艺条件下的FADH表达 | 第59-60页 |
| 3.5 NI~(2+)柱亲和层析纯化FADH | 第60-62页 |
| 3.5.1 Folin-酚法测定总蛋白质含量 | 第60-61页 |
| 3.5.2 Ni~(2+)柱亲和层析纯化FADH | 第61-62页 |
| 3.6 水环境中的甲醛降解实验 | 第62-64页 |
| 3.6.1 纯化FADH对水环境中的甲醛降解实验 | 第62-63页 |
| 3.6.2 冻干乳酸乳球菌对水环境中的甲醛降解实验 | 第63页 |
| 3.6.3 构建乳酸乳球工程菌在自然水体中生长及甲醛降解实验 | 第63-64页 |
| 3.7 空气环境中的甲醛降解实验 | 第64-66页 |
| 3.8 滤纸片甲醛检测生物传感器的制备 | 第66-67页 |
| 第四章 结论 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
