| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 图和附表清单 | 第16-19页 |
| 英文缩略词表 | 第19-20页 |
| 1 引言 | 第20-26页 |
| 技术路线总图 | 第25-26页 |
| 2 候选TAA重组蛋白的制备 | 第26-84页 |
| 2.1 前言 | 第26-29页 |
| 2.2 材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.2.1 材料 | 第29-31页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第31-48页 |
| 2.3 结果与分析 | 第48-78页 |
| 2.3.1 NPM1、14-3-3ζ和MDM2表达质粒的构建结果 | 第48-58页 |
| 2.3.2 原核表达、纯化18种肿瘤相关蛋白结果 | 第58-74页 |
| 2.3.3 纯化蛋白免疫活性分析结果 | 第74-78页 |
| 2.4 讨论 | 第78-83页 |
| 2.4.1 TAAs大量制备技术建立的意义和技术特点 | 第78-79页 |
| 2.4.2 亚克隆技术构建重组表达质粒更为简单快速 | 第79-80页 |
| 2.4.3 采用标准化上样量的方法保证了蛋白表达参数优化结果的可靠性 | 第80-81页 |
| 2.4.4 通过可溶性分析为选择蛋白纯化方案提供了依据 | 第81页 |
| 2.4.5 根据每种蛋白的特点选择或建立适合的纯化方案 | 第81-83页 |
| 2.4.6 鉴定纯化蛋白的正确性 | 第83页 |
| 2.5 小结 | 第83-84页 |
| 3 建立检测TAA自身抗体的定量ELISA方法 | 第84-131页 |
| 3.1 前言 | 第84-86页 |
| 3.2 材料与方法 | 第86-102页 |
| 3.2.1 材料与仪器设备 | 第86-88页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第88-102页 |
| 3.3 结果与分析 | 第102-121页 |
| 3.3.1 候选TAA自身抗体初步鉴定结果 | 第102-104页 |
| 3.3.2 多种自身抗体ELISA反应参数优化结果 | 第104-115页 |
| 3.3.3 人体血清中自身抗体定量方法的建立 | 第115-121页 |
| 3.4 讨论 | 第121-130页 |
| 3.4.1 初步鉴定出6种可能有诊断价值的TAA自身抗体 | 第121-122页 |
| 3.4.2 间接ELISA反应参数优化是建立定量方法的基础 | 第122-124页 |
| 3.4.3 本研究建立的定量检测方法的优点与不足 | 第124-130页 |
| 3.5 小结 | 第130-131页 |
| 4 评价TAA自身抗体联合检测对肝癌的诊断价值 | 第131-161页 |
| 4.1 前言 | 第131-132页 |
| 4.2 材料与方法 | 第132-136页 |
| 4.2.1 材料以及仪器设备 | 第132-133页 |
| 4.2.2 方法 | 第133-136页 |
| 4.3 结果与分析 | 第136-154页 |
| 4.3.1 研究对象的基本情况 | 第136页 |
| 4.3.2 TAA自身抗体浓度在肝癌组和对照组的分布 | 第136-139页 |
| 4.3.3 三种截断值判定方法对各组的检出情况存在明显不同 | 第139-146页 |
| 4.3.4 两种联合策略的评价结果 | 第146-152页 |
| 4.3.4.1 并联多种TAA自身抗体诊断价值评价结果 | 第146-150页 |
| 4.3.4.2 使用Logistic回归联合多种TAA自身抗体的评价结果 | 第150-152页 |
| 4.3.4.3 并联检测较Logisitic回归模型有更好的诊断价值 | 第152页 |
| 4.3.5 TAA自身抗体组合联合AFP检测将明显提高肝癌的检出率 | 第152-154页 |
| 4.3.5.1 并联检测对AFP检测阴性的肝癌患者有很高的检出率 | 第152-153页 |
| 4.3.5.2 TAA自身抗体数值与AFP数值的无统计学关联 | 第153-154页 |
| 4.4 讨论 | 第154-160页 |
| 4.4.1 如何定义TAA是肿瘤免疫诊断领域中的重要课题 | 第154页 |
| 4.4.2 TAA自身抗体联合检测能够提高对肿瘤的诊断价值 | 第154-155页 |
| 4.4.3 入选TAA自身抗体组合须经过严格的论证 | 第155页 |
| 4.4.4 截断值的确定方法 | 第155-157页 |
| 4.4.5 两种不同联合策略的比较 | 第157-158页 |
| 4.4.6 TAA自身抗体联合检测有可能成为AFP筛查肝癌的补充方法 | 第158-159页 |
| 4.4.7 本研究的局限性和不足之处 | 第159页 |
| 4.4.8 进一步的工作 | 第159-160页 |
| 4.5 小结 | 第160-161页 |
| 5 结论 | 第161-162页 |
| 参考文献 | 第162-168页 |
| 综述 | 第168-192页 |
| 参考文献 | 第187-192页 |
| 附录 主要溶液配制方法 | 第192-196页 |
| 个人简历 | 第196页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第196-198页 |
| 致谢 | 第198页 |
