| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一部分 Npu DnaE intein的结构和剪接机理研究 | 第13-91页 |
| 第1章 蛋白质内含肽简介 | 第13-43页 |
| 1.1 蛋白质内含肽概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 蛋白质内含肽的发现 | 第13页 |
| 1.1.2 蛋白质内含肽的分布 | 第13-14页 |
| 1.1.3 蛋白质内含肽的命名 | 第14-15页 |
| 1.1.4 蛋白质内含肽的分类 | 第15-16页 |
| 1.2 蛋白质内含肽结构 | 第16-19页 |
| 1.2.1 蛋白质内含肽的氨基酸残基编号法则 | 第16-17页 |
| 1.2.2 蛋白质内含肽的一级结构 | 第17-18页 |
| 1.2.3 蛋白质内含肽的高级结构 | 第18-19页 |
| 1.3 蛋白质内含肽剪接反应机理 | 第19-25页 |
| 1.3.1 蛋白质内含肽的顺式剪接机理 | 第20-21页 |
| 1.3.2 蛋白质内含肽的反式剪接机理 | 第21-22页 |
| 1.3.3 其他蛋白质内含肽的剪接机理 | 第22-25页 |
| 1.4 蛋白质内含肽应用 | 第25-32页 |
| 1.4.1 蛋白质内含肽介导蛋白质纯化 | 第25-27页 |
| 1.4.2 蛋白质内含肽介导蛋白质骨架环化 | 第27-28页 |
| 1.4.3 蛋白质内含肽介导蛋白质标记 | 第28-30页 |
| 1.4.4 蛋白质内含肽介导蛋白质同位素标记 | 第30-31页 |
| 1.4.5 蛋白质内含肽介导合成特殊蛋白质 | 第31页 |
| 1.4.6 蛋白质内含肽作为分子开关调节蛋白质的功能 | 第31-32页 |
| 1.4.7 依赖于蛋白质内含肽的生物传感器 | 第32页 |
| 1.5 小结 | 第32-33页 |
| 1.6 本文的研究内容和意义 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-43页 |
| 第2章 念珠藻Npu PCC73102 DnaE split intein结构和功能研究 | 第43-91页 |
| 2.1 引言 | 第43-44页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第44-60页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第44-46页 |
| 2.2.2 Npu intein共表达蛋白复合物的制备 | 第46-51页 |
| 2.2.3 Npu intein复合物的核磁共振谱图 | 第51-52页 |
| 2.2.4 Npu intein复合物的晶体制备和解析 | 第52-55页 |
| 2.2.5 剪接和剪切实验蛋白样品制备 | 第55-59页 |
| 2.2.6 Npu~N和Npu~C相互作用实验 | 第59-60页 |
| 2.2.7 蛋白质剪接和剪切实验 | 第60页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第60-85页 |
| 2.3.1 Npu DnaE split intein复合物结核磁共振结构 | 第61-65页 |
| 2.3.2 Npu DnaE split intein复合物晶体结构 | 第65-67页 |
| 2.3.3 Npu DnaE split intein相互作用机理 | 第67-75页 |
| 2.3.4 保守氨基酸残基对蛋白质剪接的影响 | 第75-85页 |
| 2.4 本章总结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-91页 |
| 第二部分 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白双模态成像体系的研究 | 第91-133页 |
| 第3章 生物成像简介 | 第91-109页 |
| 3.1 生物成像概述 | 第91-97页 |
| 3.1.1 引言 | 第91页 |
| 3.1.2 分子成像方法 | 第91-97页 |
| 3.2 双模态成像体系 | 第97-100页 |
| 3.2.1 引言 | 第97页 |
| 3.2.2 钆离子螯合物-有机荧光基团小分子双成像系统 | 第97-98页 |
| 3.2.3 钆离子螯合物-无机纳米粒子双成像系统 | 第98-99页 |
| 3.2.4 钆离子螯合物-树枝状大分子双成像系统 | 第99页 |
| 3.2.5 磁共振造影剂-量子点双成像系统 | 第99页 |
| 3.2.6 磁性纳米粒子-荧光双成像系统 | 第99-100页 |
| 3.3 本文研究内容及意义 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-109页 |
| 第4章 GFP~(36+)-dLBT双成像蛋白探针的制备及功能研究 | 第109-133页 |
| 4.1 引言 | 第109-110页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第110-116页 |
| 4.2.1 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白制备 | 第110-114页 |
| 4.2.2 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白特异性结合钆离子 | 第114页 |
| 4.2.3 荧光光谱鉴定GFP~(36+)-dLBT融合蛋白 | 第114页 |
| 4.2.4 紫外光谱鉴定GFP~(36+)-dLBT融合蛋白 | 第114页 |
| 4.2.5 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白体外MRI信号测试 | 第114页 |
| 4.2.6 GFP~(36+)-1L-dLBT融合蛋白体外MRI信号测试 | 第114页 |
| 4.2.7 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白体外弛豫效能测试 | 第114-115页 |
| 4.2.8 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白癌细胞内的荧光成像 | 第115页 |
| 4.2.9 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白癌细胞内的磁共振成像 | 第115页 |
| 4.2.10 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白在荷人瘤裸鼠模型的荧光成像 | 第115页 |
| 4.2.11 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白在荷人瘤裸鼠模型的磁共振成像 | 第115-116页 |
| 4.2.12 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白在荷人瘤裸鼠模型各器官的荧光成像 | 第116页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第116-127页 |
| 4.3.1 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白制备和鉴定 | 第116-117页 |
| 4.3.2 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白体外性质鉴定 | 第117-121页 |
| 4.3.3 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白细胞水平性质鉴定 | 第121-123页 |
| 4.3.4 GFP~(36+)-dLBT融合蛋白体内性质鉴定 | 第123-127页 |
| 4.4 小结 | 第127-129页 |
| 参考文献 | 第129-133页 |
| 附录一 主要溶液配制 | 第133-135页 |
| 附录二 常用实验技术 | 第135-143页 |
| 致谢 | 第143-145页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第145页 |
| 已发表论文 | 第145页 |
| 申请中国发明专利 | 第145页 |
| 待发表论文 | 第145页 |
