| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-50页 |
| 1.1 引言 | 第13-14页 |
| 1.2 自由基 | 第14-16页 |
| 1.2.1 自由基的形成 | 第14页 |
| 1.2.2 自由基的分类 | 第14-15页 |
| 1.2.3 自由基对机体的影响 | 第15-16页 |
| 1.3 天然的抗氧化物质及机理 | 第16-17页 |
| 1.3.1 黄酮类化合物 | 第16页 |
| 1.3.2 多糖类化合物 | 第16-17页 |
| 1.3.3 蛋白质及多肽 | 第17页 |
| 1.4 硒蛋白的研究现状 | 第17-26页 |
| 1.4.1 硒蛋白 | 第17-18页 |
| 1.4.2 硒蛋白的分类 | 第18-21页 |
| 1.4.3 硒蛋白获取途径 | 第21-24页 |
| 1.4.4 硒蛋白抗氧化作用 | 第24-26页 |
| 1.5 马氏珠母贝研究进展 | 第26-29页 |
| 1.5.1 马氏珠母贝资源 | 第26页 |
| 1.5.2 马氏珠母贝研究进展 | 第26-29页 |
| 1.6. 富硒藻类研究 | 第29-31页 |
| 1.6.1 藻种的选择 | 第29页 |
| 1.6.2 硒对藻类生长的作用 | 第29-30页 |
| 1.6.3 藻类富硒作用 | 第30-31页 |
| 1.7 本论文的研究目标、内容和创新性 | 第31-34页 |
| 1.7.1 研究目标 | 第31页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第31-33页 |
| 1.7.2.1 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.7.2.2 技术路线 | 第32-33页 |
| 1.7.2.3 拟解决的关键性问题 | 第33页 |
| 1.7.3 创新性 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-50页 |
| 第二章 硅藻富集硒研究 | 第50-61页 |
| 2.1 引言 | 第50-51页 |
| 2.2 材料与方法 | 第51-53页 |
| 2.2.1 原料 | 第51页 |
| 2.2.2 试剂 | 第51页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第51-52页 |
| 2.2.4 硅藻的培养 | 第52页 |
| 2.2.5 硒离子对硅藻的急毒试验研究 | 第52-53页 |
| 2.2.6 硅藻的富硒量研究 | 第53页 |
| 2.2.7 数据处理 | 第53页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第53-56页 |
| 2.3.1 硒离子对硅藻生长情况影响 | 第53-55页 |
| 2.3.2 硒离子对硅藻生长的 96h-EC_50 | 第55页 |
| 2.3.3 硅藻的富硒量研究 | 第55-56页 |
| 2.4 本章小结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第三章 马氏珠母贝硒蛋白生物制备及分离纯化 | 第61-82页 |
| 3.1 引言 | 第61-62页 |
| 3.2 材料与方法 | 第62-69页 |
| 3.2.1 原料 | 第62页 |
| 3.2.2 试剂 | 第62-63页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第63-64页 |
| 3.2.4 室内富集体系养殖条件优化 | 第64-66页 |
| 3.2.5 马氏珠母贝体内硒分布研究 | 第66页 |
| 3.2.6 马氏珠母贝富硒粗蛋白的制备 | 第66页 |
| 3.2.7 马氏珠母贝和硅藻结合硒能力研究 | 第66-67页 |
| 3.2.8 马氏珠母贝粗蛋白的提取 | 第67页 |
| 3.2.9 蛋白质等电点测定 | 第67页 |
| 3.2.10 蛋白质分级沉淀 | 第67-68页 |
| 3.2.11 蛋白质层析分离 | 第68页 |
| 3.2.12 硒蛋白 SDS-PAGE 电泳 | 第68-69页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第69-76页 |
| 3.3.1 室内富集体系培育条件优化 | 第69-71页 |
| 3.3.2 马氏珠母贝体内硒含量分布情况 | 第71-72页 |
| 3.3.3 马氏珠母贝和硅藻对硒离子的结合能力 | 第72-73页 |
| 3.3.4 蛋白质等电点测定 | 第73页 |
| 3.3.5 蛋白质盐析分离 | 第73-74页 |
| 3.3.6 蛋白质的 Sephadex G-150 柱分离 | 第74-75页 |
| 3.3.7 蛋白质峰的 SDS-PAGE 电泳分析 | 第75-76页 |
| 3.4 本章小结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 第四章 马氏珠母贝硒蛋白的抗氧化活性及机理研究 | 第82-115页 |
| 4.1 引言 | 第82-83页 |
| 4.2 材料与方法 | 第83-91页 |
| 4.2.1 材料和主要试剂 | 第83-84页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第84-85页 |
| 4.2.3 硒蛋白自由基清除实验 | 第85-86页 |
| 4.2.4 试剂配制 | 第86页 |
| 4.2.5 乳鼠心肌细胞培养 | 第86-87页 |
| 4.2.6 心肌细胞的分组及处理 | 第87页 |
| 4.2.7 心肌细胞 MDA、SOD、GSH-PX 水平测定 | 第87-88页 |
| 4.2.8 心肌细胞线粒体细胞色素 c 氧化酶（CCO）活性的测定 | 第88页 |
| 4.2.9 Annexin V / PI 染色法检测细胞凋亡率 | 第88-89页 |
| 4.2.10 心肌细胞组织形态学观察 | 第89页 |
| 4.2.11 罗丹明 123 染色法监测线粒体膜 | 第89页 |
| 4.2.12 共聚焦透射电镜观察心肌细胞内 Ca~(2+)浓度 | 第89页 |
| 4.2.13 Western blot 法检测细胞凋亡关键基因蛋白的表达 | 第89-91页 |
| 4.2.14 统计学分析 | 第91页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第91-108页 |
| 4.3.1 硒蛋白对自由基的清除能力 | 第91-93页 |
| 4.3.2 硒蛋白对心肌细胞抗氧化活性的影响 | 第93-96页 |
| 4.3.3 硒蛋白对心肌细胞 CCO 比活力的影响 | 第96-97页 |
| 4.3.4 Annexin V / PI 染色法检测细胞凋亡率 | 第97-100页 |
| 4.3.5 硒蛋白对心肌细胞超微结构的影响 | 第100-101页 |
| 4.3.6 罗丹明 123 染色法监测硒蛋白对线粒体膜的影响 | 第101-103页 |
| 4.3.7 共聚焦透射电镜观察硒蛋白对心肌细胞内 Ca~(2+)浓度的影响 | 第103-106页 |
| 4.3.8 硒蛋白对凋亡基因 caspase 9 和 actived caspase 3 蛋白表达的影响 | 第106-107页 |
| 4.3.9 硒蛋白对线粒体 cytochrome c 蛋白释放的影响 | 第107-108页 |
| 4.4 本章小结 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-115页 |
| 第五章 总结 | 第115-117页 |
| 附录I 攻读学位期间所发表的学术论文情况 | 第117-119页 |
| 附录II 反应率-机率单位对照表 | 第119-120页 |
| 附录III 致谢 | 第120页 |
