摘要 | 第3-6页 |
abstract | 第6-9页 |
第1章 引言 | 第12-18页 |
1.1 哺乳动物精子的发生与成熟过程 | 第12页 |
1.2 哺乳动物受精过程 | 第12-13页 |
1.3 生理因子孕酮对人精子生理功能的调控具有重要的作用 | 第13-15页 |
1.4 CatSper-Ca2+信号途径在人精子响应孕酮中扮演重要角色 | 第15-16页 |
1.5 hPAQR7是人精子孕酮膜受体的理想候选蛋白 | 第16-17页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
第2章 材料与方法 | 第18-29页 |
2.1 材料 | 第18-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第18页 |
2.1.2 实验主要试剂 | 第18-21页 |
2.1.3 实验主要仪器 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-28页 |
2.2.1 精子样本的处理 | 第22页 |
2.2.2 Percoll密度梯度离心法纯化分离人精子 | 第22页 |
2.2.3 精子胞内钙信号的测量 | 第22-23页 |
2.2.4 Westernblot检测hPAQR7蛋白的表达 | 第23-24页 |
2.2.5 光化学修饰和生物素标记的孕酮 | 第24-25页 |
2.2.6 间接免疫荧光 | 第25-26页 |
2.2.7 免疫组化 | 第26页 |
2.2.8 人精子穿粘液实验 | 第26-27页 |
2.2.9 金霉素染色(CTC)实验 | 第27页 |
2.2.10 鼠单克隆抗体hPAQR7的制备 | 第27页 |
2.2.11 精子膜片钳记录 | 第27-28页 |
2.3 统计分析 | 第28-29页 |
第3章 结果 | 第29-47页 |
3.1 hPAQR7为人精子膜蛋白且主要定位在精子尾部 | 第29-31页 |
3.2 人精子hPAQR7能结合孕酮 | 第31-32页 |
3.3 孕酮分子在空间上与hPAQR7有相同的定位且其结合位点位于人精子主段和中段 | 第32-33页 |
3.4 hPAQR7单克隆抗体能抑制孕酮诱导的人精子超活化和顶体反应 | 第33-34页 |
3.5 hPAQR7单克隆抗体能抑制孕酮增加人精子[Ca2+]i | 第34-36页 |
3.6 hPAQR7单克隆抗体能抑制孕酮增加人精子CatSper电流 | 第36-37页 |
3.7 hPAQR7与CatSper存在相互作用 | 第37-39页 |
3.8 hPAQR7与ABHD2在人精子中存在相互作用 | 第39-41页 |
3.9 男性不育样本中孕酮响应能力下降的病例占42% | 第41-44页 |
3.10 hPAQR7在人精子中的含量与人精子响应孕酮能力密切相关 | 第44-47页 |
第4章 讨论 | 第47-50页 |
第5章 结论与展望 | 第50-52页 |
5.1 结论 | 第50页 |
5.2 进一步工作的方向 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录 | 第58-59页 |
中英文缩写一览表 | 第59-60页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第60-61页 |
论文综述 | 第61-71页 |
参考文献 | 第68-71页 |