| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一部分 人类Ihh 的结构与功能研究 | 第10-41页 |
| 第一章 Ihh 蛋白的研究背景 | 第10-18页 |
| ·Hedgehog 蛋白家族 | 第10页 |
| ·Hdgehog 蛋白的成熟过程 | 第10-11页 |
| ·Hh 信号转导 | 第11-16页 |
| ·Hh 信号转导相关蛋白概述 | 第11-12页 |
| ·Hh 与Ihog | 第12页 |
| ·Hh 和Cdo | 第12-13页 |
| ·Hh 和Hhip | 第13-14页 |
| ·Hh 和5E1 | 第14页 |
| ·Ihh 调节通路 | 第14-16页 |
| ·Hh 是浓度依赖的信号 | 第16页 |
| ·Hedgehog 蛋白锌结合位点 | 第16-17页 |
| ·本论文研究的目的，内容和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 实验结果与讨论 | 第18-36页 |
| ·Ihh 野生型及D100E 突变体的纯化和结晶 | 第18-20页 |
| ·IhhN-WT 和IhhN-D100E 的克隆 | 第18页 |
| ·IhhN-WT 和IhhN-D100E 的表达 | 第18页 |
| ·IhhN-WT 和IhhN-D100E 的纯化 | 第18-19页 |
| ·IhhN-D100E 的结晶 | 第19页 |
| ·IhhN-D100E 突变体结构总结 | 第19-20页 |
| ·IhhN-WT 和IhhN-D100E 突变体的稳定性研究 | 第20-36页 |
| ·不同离子对IhhN-WT 和IhhN-D100E 稳定性的影响 | 第20-27页 |
| ·IhhN-WT-Trx2 和IhhN-D100E-Trx2 融合蛋白的稳定性研究 | 第27-31页 |
| ·Ihh-D152A 突变体的稳定性研究 | 第31-34页 |
| ·Ihh 对小肽降解的探索 | 第34-36页 |
| 第三章 实验材料和方法 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·克隆相关试剂 | 第36页 |
| ·蛋白纯化相关试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·PCR 反应 | 第36-37页 |
| ·核酸限制性内切酶酶切反应 | 第37页 |
| ·连接 | 第37页 |
| ·PCR 产物DpnⅠ酶切反应 | 第37-38页 |
| ·质粒的小量抽提 | 第38页 |
| ·琼脂糖电泳 | 第38页 |
| ·CaCl_2 感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·质粒的转化 | 第39页 |
| ·蛋白表达 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第40-41页 |
| 第二部分 酵母超氧化物歧化酶Sod2 的结构与功能研究 | 第41-53页 |
| 第一章 超氧化物歧化酶的研究背景 | 第41-46页 |
| ·活性氧自由基 | 第41页 |
| ·生物体与活性氧自由基 | 第41-46页 |
| ·生物对活性氧自由基的抵御 | 第41页 |
| ·活性氧自由基的对生物体的影响 | 第41-42页 |
| ·生物体中与活性氧自由基相关的蛋白酶 | 第42-43页 |
| ·超氧化物歧化酶 | 第43-46页 |
| 第二章 实验结果与讨论 | 第46-49页 |
| ·Fe 代Mn 超氧化物歧化酶的克隆表达和纯化 | 第46-48页 |
| ·克隆 | 第46页 |
| ·表达和纯化 | 第46页 |
| ·晶体获得 | 第46-48页 |
| ·铁代锰超氧化物歧化酶结构总结 | 第48-49页 |
| 第三章 实验材料和方法 | 第49-53页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·克隆相关试剂 | 第49页 |
| ·蛋白纯化相关试剂 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-53页 |
| ·质粒的小量抽提 | 第49-50页 |
| ·琼脂糖电泳 | 第50页 |
| ·CaCl_2感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| ·质粒的转化 | 第51页 |
| ·蛋白表达 | 第51页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第51-52页 |
| ·无机培养基的配制 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
