中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
前言 | 第8-11页 |
材料与方法 | 第11-32页 |
1 实验材料 | 第11-14页 |
1.1 仪器设备 | 第11-12页 |
1.2 试剂耗材 | 第12-13页 |
1.3 其他 | 第13-14页 |
2 实验方法 | 第14-31页 |
2.1 细胞培养及处理 | 第14-15页 |
2.2 RNA的提取及相对定量分析 | 第15-17页 |
2.3 蛋白的提取和分析 | 第17-20页 |
2.4 蛋白质免疫共沉淀(Co-IP) | 第20-21页 |
2.5 质粒构建 | 第21-25页 |
2.6 原核重组蛋白的表达及纯化 | 第25-26页 |
2.7 GST融合蛋白沉降(GST pull-down)实验 | 第26-27页 |
2.8 银染 | 第27-28页 |
2.9 考马斯亮蓝染色 | 第28页 |
2.10 ELISA实验 | 第28-29页 |
2.11 FITC Annexin V/PI双染检测细胞凋亡 | 第29页 |
2.12 AVL9干扰片段的设计与合成 | 第29-30页 |
2.13 细胞免疫荧光染色 | 第30页 |
2.14 伤痕愈合实验 | 第30-31页 |
3 数据处理及统计学 | 第31-32页 |
结果 | 第32-45页 |
1 GST-TIMP-1重组蛋白的表达与纯化 | 第32-35页 |
2 通过GST pull-down获得TIMP-1新的相互作用蛋白AVL9 | 第35-36页 |
3 体内验证TIMP-1与AVL9相互作用 | 第36-39页 |
4 干扰AVL9可降低TIMP-1的分泌 | 第39-41页 |
5 干扰AVL9基因增加TI3细胞对紫杉醇(PTX)的敏感性 | 第41-43页 |
6 干扰AVL9基因增强PANC-1细胞的迁移 | 第43-45页 |
分析与讨论 | 第45-48页 |
小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
综述 | 第53-65页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65-66页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |