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水稻胁迫相关蛋白激酶基因OsSAPK2的抗病功能分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
英文缩略词表第6-10页
1 文献综述第10-19页
    1.1 植物的抗病性第10-13页
        1.1.1 植物抗病性分类第10页
        1.1.2 植物抗病免疫的机制第10-13页
    1.2 水稻抗病的研究进展第13-15页
        1.2.1 水稻的主要病害第13-14页
        1.2.2 水稻抗病的育种途径第14页
        1.2.3 水稻抗白叶枯病菌的分子机制及研究进展第14-15页
    1.3 SnRK2蛋白激酶的研究进展第15-19页
        1.3.1 SnRK2是一类重要的蛋白激酶第16页
        1.3.2 SnRK2参与的信号传递第16-19页
2 引言第19-20页
3 材料与方法第20-30页
    3.1 植物材料第20页
    3.2 供试菌株与载体第20页
    3.3 引物第20页
    3.4 OsSAPKs序列分析第20页
    3.5 OsSAPK2亚细胞定位第20-23页
        3.5.1 利用Gateway技术构建OsSAPK2的GFP载体第20-22页
        3.5.2 洋葱表皮细胞GFP-OsSAPK2瞬时表达分析第22-23页
    3.6 利用Gateway技术构建OsSAPK2的RNAi表达载体第23-24页
        3.6.1 OsSAPK2干扰区段的获取第23页
        3.6.2 OsSAPK2i基因RNAi表达载体的获得第23-24页
    3.7 对水稻进行遗传转化第24-26页
        3.7.1 农杆菌感受态细胞制备第24页
        3.7.2 表达载体转化农杆菌感受态细胞第24页
        3.7.3 胚性愈伤的诱导第24-25页
        3.7.4 用于侵染的农杆菌菌液准备第25页
        3.7.5 农杆菌侵染、潮霉素筛选获得抗性愈伤第25页
        3.7.6 转化体植株再生第25-26页
    3.8 转基因株系的阳性与抗病性鉴定第26-27页
        3.8.1 转基因植株阳性检测第26页
        3.8.2 转基因植株中目的基因拷贝数鉴定第26页
        3.8.3 水稻OsSAPK2-RNAi转基因植株的白叶枯病抗性鉴定第26-27页
        3.8.4 转基因植株中OsSAPK2基因及抗病相关基因表达分析第27页
    3.9 OsSAPK2酵母自激活活性及酵母双杂交筛选第27-30页
        3.9.1 构建诱饵载体pGBKT7-SAPK2第27-28页
        3.9.2 酵母菌AH109的活化及制备酵母感受态细胞第28页
        3.9.3 OsSAPK2自激活验证第28-29页
        3.9.4 pGBKT7-SAPK2和pGADT7/prey的共转化第29页
        3.9.5 互作蛋白的表达分析第29-30页
4 结果与分析第30-38页
    4.1 OsSAPK2序列分析第30-31页
    4.2 OsSAPK2亚细胞定位第31页
    4.3 OsSAPK2-RNAi表达载体的构建第31-32页
    4.4 水稻遗传转化第32页
    4.5 转基因株系的分子鉴定第32-33页
    4.6 转基因植株中目的基因拷贝数鉴定第33-34页
    4.7 转基因株系抗病表型鉴定第34-35页
    4.8 抗病相关基因表达分析第35-36页
    4.9 OsSAPK2互作蛋白的初步筛选第36页
    4.10 OsSAPK2互作蛋白的表达第36-38页
5 讨论第38-40页
6 结论第40-41页
参考文献第41-49页
致谢第49-50页
个人简介第50页

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