摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
英文缩略词表 | 第6-10页 |
1 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 植物的抗病性 | 第10-13页 |
1.1.1 植物抗病性分类 | 第10页 |
1.1.2 植物抗病免疫的机制 | 第10-13页 |
1.2 水稻抗病的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 水稻的主要病害 | 第13-14页 |
1.2.2 水稻抗病的育种途径 | 第14页 |
1.2.3 水稻抗白叶枯病菌的分子机制及研究进展 | 第14-15页 |
1.3 SnRK2蛋白激酶的研究进展 | 第15-19页 |
1.3.1 SnRK2是一类重要的蛋白激酶 | 第16页 |
1.3.2 SnRK2参与的信号传递 | 第16-19页 |
2 引言 | 第19-20页 |
3 材料与方法 | 第20-30页 |
3.1 植物材料 | 第20页 |
3.2 供试菌株与载体 | 第20页 |
3.3 引物 | 第20页 |
3.4 OsSAPKs序列分析 | 第20页 |
3.5 OsSAPK2亚细胞定位 | 第20-23页 |
3.5.1 利用Gateway技术构建OsSAPK2的GFP载体 | 第20-22页 |
3.5.2 洋葱表皮细胞GFP-OsSAPK2瞬时表达分析 | 第22-23页 |
3.6 利用Gateway技术构建OsSAPK2的RNAi表达载体 | 第23-24页 |
3.6.1 OsSAPK2干扰区段的获取 | 第23页 |
3.6.2 OsSAPK2i基因RNAi表达载体的获得 | 第23-24页 |
3.7 对水稻进行遗传转化 | 第24-26页 |
3.7.1 农杆菌感受态细胞制备 | 第24页 |
3.7.2 表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第24页 |
3.7.3 胚性愈伤的诱导 | 第24-25页 |
3.7.4 用于侵染的农杆菌菌液准备 | 第25页 |
3.7.5 农杆菌侵染、潮霉素筛选获得抗性愈伤 | 第25页 |
3.7.6 转化体植株再生 | 第25-26页 |
3.8 转基因株系的阳性与抗病性鉴定 | 第26-27页 |
3.8.1 转基因植株阳性检测 | 第26页 |
3.8.2 转基因植株中目的基因拷贝数鉴定 | 第26页 |
3.8.3 水稻OsSAPK2-RNAi转基因植株的白叶枯病抗性鉴定 | 第26-27页 |
3.8.4 转基因植株中OsSAPK2基因及抗病相关基因表达分析 | 第27页 |
3.9 OsSAPK2酵母自激活活性及酵母双杂交筛选 | 第27-30页 |
3.9.1 构建诱饵载体pGBKT7-SAPK2 | 第27-28页 |
3.9.2 酵母菌AH109的活化及制备酵母感受态细胞 | 第28页 |
3.9.3 OsSAPK2自激活验证 | 第28-29页 |
3.9.4 pGBKT7-SAPK2和pGADT7/prey的共转化 | 第29页 |
3.9.5 互作蛋白的表达分析 | 第29-30页 |
4 结果与分析 | 第30-38页 |
4.1 OsSAPK2序列分析 | 第30-31页 |
4.2 OsSAPK2亚细胞定位 | 第31页 |
4.3 OsSAPK2-RNAi表达载体的构建 | 第31-32页 |
4.4 水稻遗传转化 | 第32页 |
4.5 转基因株系的分子鉴定 | 第32-33页 |
4.6 转基因植株中目的基因拷贝数鉴定 | 第33-34页 |
4.7 转基因株系抗病表型鉴定 | 第34-35页 |
4.8 抗病相关基因表达分析 | 第35-36页 |
4.9 OsSAPK2互作蛋白的初步筛选 | 第36页 |
4.10 OsSAPK2互作蛋白的表达 | 第36-38页 |
5 讨论 | 第38-40页 |
6 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
个人简介 | 第50页 |