| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-21页 |
| ·PED 的概述 | 第14-17页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·基因组结构 | 第15页 |
| ·结构蛋白及其功能 | 第15-16页 |
| ·流行病学 | 第16页 |
| ·诊断与防制 | 第16-17页 |
| ·PEDV 及其他冠状病毒抗原表位研究进展 | 第17-18页 |
| ·抗原表位研究方法 | 第18-19页 |
| ·B 细胞抗原表位研究方法 | 第18-19页 |
| ·T 细胞抗原表位研究方法 | 第19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 PEDV M 蛋白和N 蛋白的原核表达 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·病毒株、菌种及质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂和设备 | 第21页 |
| ·限制性内切酶与引物 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·PEDV 培养及RNA 提取 | 第22页 |
| ·M 蛋白和N 蛋白表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·M 蛋白和N 蛋白的原核表达 | 第24页 |
| ·M 蛋白和N 蛋白的纯化 | 第24页 |
| ·重组蛋白的Western blot 分析 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-27页 |
| ·M 基因和N 基因的扩增 | 第25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第26页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白的Western blot 分析 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 PEDV M 蛋白和N 蛋白单克隆抗体的制备 | 第29-38页 |
| ·材料和方法 | 第29-33页 |
| ·病毒株及主要试剂 | 第29页 |
| ·细胞及实验动物 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·MAbs 的制备 | 第29-32页 |
| ·杂交瘤细胞及MAb 特性的鉴定 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-36页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第34页 |
| ·MAbs 亚类的鉴定及抗体效价的测定 | 第34-35页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第35页 |
| ·IFA 鉴定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 PEDV M 蛋白和N 蛋白抗原表位鉴定 | 第38-54页 |
| ·材料和方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·短肽设计 | 第38-39页 |
| ·M 蛋白和N 蛋白的分段表达 | 第39-40页 |
| ·抗原表位的初步鉴定 | 第40页 |
| ·抗原表位的精确定位 | 第40页 |
| ·抗原表位的保守性及同源性分析 | 第40页 |
| ·抗原表位的反应原性及特异性检测 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-51页 |
| ·M 蛋白和N 蛋白表位预测及短肽设计结果 | 第40-42页 |
| ·M 蛋白和N 蛋白的截短表达 | 第42-46页 |
| ·ELISA 筛选抗原表位 | 第46-47页 |
| ·Western blot 筛选抗原表位 | 第47-50页 |
| ·抗原表位的保守性及同源性分析 | 第50-51页 |
| ·抗原表位的反应原性及特异性检测 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |