摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-10页 |
1.1 材料简述 | 第9-10页 |
2 前人研究进展 | 第10-15页 |
2.1 植物原生质体及体细胞融合研究概况 | 第10-11页 |
2.2 原生质体融合后代的鉴定 | 第11-12页 |
2.2.1 倍性鉴定 | 第11-12页 |
2.2.1.1 形态学鉴定 | 第11页 |
2.2.1.2 细胞学鉴定 | 第11-12页 |
2.2.2 核质遗传组成鉴定 | 第12页 |
2.3 细胞融合在柑橘育种中的应用 | 第12-15页 |
2.3.1 体细胞杂种的创制 | 第12-14页 |
2.3.1.1 三倍体体细胞杂种的创制 | 第13页 |
2.3.1.2 创制异源四倍体杂种用于有性杂交 | 第13页 |
2.3.1.3 砧木育种 | 第13-14页 |
2.3.1.4 作为接穗的品种选育 | 第14页 |
2.3.2 二倍体胞质杂种的创制及应用 | 第14-15页 |
2.3.2.1 胞质杂种的产生方式 | 第14-15页 |
2.3.2.2 创制胞质杂种转移CMS性状 | 第15页 |
3 本研究的目的和内容 | 第15-16页 |
4 实验材料与方法 | 第16-24页 |
4.1 实验材料 | 第16页 |
4.2 实验方法 | 第16-24页 |
4.2.1 实验材料准备 | 第16-17页 |
4.2.2 柑橘原生质体的提取和纯化 | 第17-19页 |
4.2.3 柑橘原生质体活力测定 | 第19-20页 |
4.2.4 原生质体融合 | 第20页 |
4.2.5 融合细胞培养 | 第20-21页 |
4.2.6 融合产物倍性分析 | 第21页 |
4.2.7 分子标记进行再生植株遗传来源鉴定 | 第21-24页 |
4.2.7.1 融合再生材料DNA的提取 | 第21-22页 |
4.2.7.2 PCR的扩增 | 第22-23页 |
4.2.7.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-24页 |
4.2.7.4 引物的筛选 | 第24页 |
5 实验结果及分析 | 第24-34页 |
5.1 ‘山金柑 + 早花柠檬’融合组合体细胞杂交 | 第24-31页 |
5.1.1 原生质体提取及纯化 | 第25-26页 |
5.1.2 原生质体融合 | 第26-27页 |
5.1.3 融合产物培养情况 | 第27-29页 |
5.1.4 倍性鉴定 | 第29-30页 |
5.1.5 分子标记分析再生植株基因组来源 | 第30-31页 |
5.2 ‘山金柑+早实枳’融合组合的体细胞杂交 | 第31-34页 |
5.2.1 融合细胞培养及植株再生 | 第32-33页 |
5.2.2 倍性测定 | 第33-34页 |
6 小结与讨论 | 第34-39页 |
6.1 原生质体分离的影响因素 | 第35页 |
6.2 融合再生成功的影响因素 | 第35-37页 |
6.2.1 培养条件 | 第36页 |
6.2.2 融合亲本的基因型 | 第36-37页 |
6.3 山金柑+早实枳/早花柠檬的融合再生情况的讨论 | 第37-38页 |
6.3.1 两个融合组合再生产物形态比较 | 第37页 |
6.3.2 两个融合组合再生产物生胚能力的比较 | 第37-38页 |
6.4 对称融合中胞质杂种产生的可能机理 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
附录A BH3配方 | 第46-49页 |
附录B 分子鉴定所用引物序列信息 | 第49-51页 |
致谢 | 第51页 |