致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语中英文对照 | 第13-14页 |
目次 | 第14-16页 |
第一章 引言 | 第16-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-34页 |
2.1 PM | 第18页 |
2.2 实验动物 | 第18页 |
2.3 使用的主要实验仪器与设备 | 第18-19页 |
2.4 实验试剂与材料 | 第19-22页 |
2.4.1 实验试剂与材料 | 第19-21页 |
2.4.2 实验试剂配制 | 第21-22页 |
2.5 实验方法 | 第22-34页 |
2.5.1 细胞培养 | 第22页 |
2.5.2 siRNA转染(按Genmute siRNA transfection reagent说明书要求) | 第22-23页 |
2.5.3 细胞总mRNA的提取及组织总mRNA的提取 | 第23-24页 |
2.5.4 cDNA的合成及Q-PCR过程 | 第24-26页 |
2.5.5 构建PM诱导的小鼠急性气道炎症模型 | 第26-27页 |
2.5.6 动物处理及标本收集 | 第27页 |
2.5.7 ELISA检测BALF上清中KC/MIP-2的表达(RD ELISA试剂盒) | 第27-28页 |
2.5.8 透射电镜样品的准备及处理 | 第28-29页 |
2.5.9 Western Blot | 第29-31页 |
2.5.10 GFP-LC3和mRFP-GFP-LC转染及免疫荧光样品准备 | 第31-32页 |
2.5.11 统计学分析 | 第32-34页 |
第三章 研究结果 | 第34-48页 |
3.1 PM能够诱导人气道上皮细胞细胞自噬的发生 | 第34-38页 |
3.1.1 不同浓度、不同时间PM干预HBE细胞,可诱导LC3B表达增加 | 第34-35页 |
3.1.2 透射电镜下观察PM能够诱导细胞自噬体形成 | 第35-36页 |
3.1.3 GFP-LC3和mRFP-GFP-LC3质粒转染HBE细胞观察PM诱导细胞自噬的发生. | 第36-38页 |
3.2 细胞自噬在PM上调人气道上皮细胞IL-8表达中的作用 | 第38-43页 |
3.2.1 PM干预使人气道上皮细胞IL-8 mRNA水平表达升高 | 第38-39页 |
3.2.2 细胞自噬在PM上调人气道上皮细胞IL-8中的作用 | 第39-43页 |
3.3 Beclin1+/-小鼠对PM引起的急性气道炎症具有保护作用 | 第43-48页 |
3.3.1 Beclin1+/_小鼠PM引起的气道炎症中中性粒细胞浸润减少 | 第43-44页 |
3.3.2 Beclin1+/-小鼠抑制PM上调的中性粒细胞趋化因子的表达 | 第44-45页 |
3.3.3 Beclin1+/-小鼠对PM引起的急性气道炎症肺组织病理学检查的影响 | 第45-48页 |
第四章 讨论 | 第48-52页 |
第五章 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
综述 | 第58-68页 |
参考文献 | 第63-68页 |
作者筒历及在读期间所取得的科研成果 | 第68-69页 |