摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 骨骼肌肌纤维的发育 | 第12-13页 |
1.2 影响骨骼肌蛋白质沉积的因素 | 第13-14页 |
1.2.1 采食和营养物质水平对肌肉蛋白质沉积的影响 | 第13页 |
1.2.2 体内各种激素水平对肌肉蛋白质沉积的影响 | 第13页 |
1.2.3 运动对肌肉蛋白质沉积的影响 | 第13-14页 |
1.3 参与骨骼肌蛋白质沉积调控的信号途径 | 第14-17页 |
1.3.1 mTOR信号通路 | 第14页 |
1.3.2 AMPK信号通路 | 第14-15页 |
1.3.3 PI3K/Akt信号通路 | 第15-16页 |
1.3.4 炎症信号通路 | 第16-17页 |
1.4 ALA的生物学作用 | 第17页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-26页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第18页 |
2.1.2 细胞系及试验动物 | 第18页 |
2.1.3 试验试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 试验用品的清洗及消毒 | 第19页 |
2.2 ALA对C2C12细胞蛋白周转相关蛋白表达的影响 | 第19-24页 |
2.2.1 C2C12细胞的复苏及诱导分化 | 第19-20页 |
2.2.2 ALA处理诱导分化后的C2C12细胞 | 第20页 |
2.2.3 ALA与信号通路阻断剂处理诱导分化后的C2C12细胞 | 第20页 |
2.2.4 C2C12细胞总蛋白样品的制备 | 第20-21页 |
2.2.5 C2C12细胞蛋白质合成的测定 | 第21页 |
2.2.6 Western Blot检测 | 第21-22页 |
2.2.7 免疫细胞化学 | 第22页 |
2.2.8 免疫共沉淀 | 第22页 |
2.2.9 C2C12细胞总RNA抽提、反转录及PCR扩增检测 | 第22-24页 |
2.3 腹腔注射ALA对小鼠腓肠肌蛋白通路的影响 | 第24-25页 |
2.3.1 试验动物及分组 | 第24页 |
2.3.2 饲养管理 | 第24页 |
2.3.3 组织样品的采集 | 第24-25页 |
2.3.4 组织总蛋白样品的制备 | 第25页 |
2.3.5 组织总 RNA 抽提、反转录及 PCR 扩增检测 | 第25页 |
2.4 数据统计与分析 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-36页 |
3.1 ALA对C2C12细胞蛋白质周转的影响 | 第26-27页 |
3.1.1 ALA对C2C12细胞蛋白质含量的影响 | 第26页 |
3.1.2 ALA对C2C12细胞蛋白质合成标识基因表达的影响 | 第26-27页 |
3.2 腹腔注射ALA对小鼠腓肠肌蛋白质合成相关信号通路的影响 | 第27-28页 |
3.3 ALA调节C2C12细胞蛋白质周转的作用机制 | 第28-32页 |
3.3.1 ALA对C2C12细胞蛋白质周转相关信号通路的影响 | 第28-29页 |
3.3.2 mTOR抑制剂与ALA共处理对C2C12细胞mTOR通路蛋白表达的影响 | 第29-30页 |
3.3.3 AMPK激动剂与ALA共处理对C2C12细胞mTOR通路蛋白表达的影响 | 第30-31页 |
3.3.4 Akt抑制剂与ALA共处理对C2C12细胞Akt/mTOR通路蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
3.4 ALA对炎症通路蛋白表达的影响 | 第32-34页 |
3.4.1 小鼠腹腔注射ALA对腓肠肌炎症通路蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
3.4.2 ALA对C2C12细胞炎症通路蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
3.5 干扰TLR2对C2C12细胞蛋白质合成的影响 | 第34-36页 |
3.5.1 TLR2干扰效率的验证 | 第34-35页 |
3.5.2 干扰TLR2对C2C12细胞蛋白质含量的影响 | 第35页 |
3.5.3 干扰TLR2对C2C12细胞蛋白质合成相关通路蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
4 讨论与结论 | 第36-41页 |
4.1 ALA对C2C12细胞和小鼠腓肠肌蛋白质合成的影响 | 第36-37页 |
4.2 ALA对C2C12细胞蛋白质合成信号通路的影响 | 第37-39页 |
4.2.1 ALA对C2C12细胞蛋白质合成信号通路的影响 | 第37页 |
4.2.2 ALA对C2C12细胞蛋白质合成信号通路验证 | 第37-39页 |
4.3 ALA对C2C12细胞和小鼠腓肠肌炎症相关通路的影响 | 第39-40页 |
4.4 结论 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
附录 | 第49-51页 |
读期间发表的论文和参加的科研课题 | 第51页 |