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α-硫辛酸对骨骼肌蛋白质沉积的影响及信号通路

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 前言第12-18页
    1.1 骨骼肌肌纤维的发育第12-13页
    1.2 影响骨骼肌蛋白质沉积的因素第13-14页
        1.2.1 采食和营养物质水平对肌肉蛋白质沉积的影响第13页
        1.2.2 体内各种激素水平对肌肉蛋白质沉积的影响第13页
        1.2.3 运动对肌肉蛋白质沉积的影响第13-14页
    1.3 参与骨骼肌蛋白质沉积调控的信号途径第14-17页
        1.3.1 mTOR信号通路第14页
        1.3.2 AMPK信号通路第14-15页
        1.3.3 PI3K/Akt信号通路第15-16页
        1.3.4 炎症信号通路第16-17页
    1.4 ALA的生物学作用第17页
    1.5 本研究的目的和意义第17-18页
2 材料与方法第18-26页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 主要仪器设备第18页
        2.1.2 细胞系及试验动物第18页
        2.1.3 试验试剂第18-19页
        2.1.4 试验用品的清洗及消毒第19页
    2.2 ALA对C2C12细胞蛋白周转相关蛋白表达的影响第19-24页
        2.2.1 C2C12细胞的复苏及诱导分化第19-20页
        2.2.2 ALA处理诱导分化后的C2C12细胞第20页
        2.2.3 ALA与信号通路阻断剂处理诱导分化后的C2C12细胞第20页
        2.2.4 C2C12细胞总蛋白样品的制备第20-21页
        2.2.5 C2C12细胞蛋白质合成的测定第21页
        2.2.6 Western Blot检测第21-22页
        2.2.7 免疫细胞化学第22页
        2.2.8 免疫共沉淀第22页
        2.2.9 C2C12细胞总RNA抽提、反转录及PCR扩增检测第22-24页
    2.3 腹腔注射ALA对小鼠腓肠肌蛋白通路的影响第24-25页
        2.3.1 试验动物及分组第24页
        2.3.2 饲养管理第24页
        2.3.3 组织样品的采集第24-25页
        2.3.4 组织总蛋白样品的制备第25页
        2.3.5 组织总 RNA 抽提、反转录及 PCR 扩增检测第25页
    2.4 数据统计与分析第25-26页
3 结果与分析第26-36页
    3.1 ALA对C2C12细胞蛋白质周转的影响第26-27页
        3.1.1 ALA对C2C12细胞蛋白质含量的影响第26页
        3.1.2 ALA对C2C12细胞蛋白质合成标识基因表达的影响第26-27页
    3.2 腹腔注射ALA对小鼠腓肠肌蛋白质合成相关信号通路的影响第27-28页
    3.3 ALA调节C2C12细胞蛋白质周转的作用机制第28-32页
        3.3.1 ALA对C2C12细胞蛋白质周转相关信号通路的影响第28-29页
        3.3.2 mTOR抑制剂与ALA共处理对C2C12细胞mTOR通路蛋白表达的影响第29-30页
        3.3.3 AMPK激动剂与ALA共处理对C2C12细胞mTOR通路蛋白表达的影响第30-31页
        3.3.4 Akt抑制剂与ALA共处理对C2C12细胞Akt/mTOR通路蛋白表达的影响第31-32页
    3.4 ALA对炎症通路蛋白表达的影响第32-34页
        3.4.1 小鼠腹腔注射ALA对腓肠肌炎症通路蛋白表达的影响第32-33页
        3.4.2 ALA对C2C12细胞炎症通路蛋白表达的影响第33-34页
    3.5 干扰TLR2对C2C12细胞蛋白质合成的影响第34-36页
        3.5.1 TLR2干扰效率的验证第34-35页
        3.5.2 干扰TLR2对C2C12细胞蛋白质含量的影响第35页
        3.5.3 干扰TLR2对C2C12细胞蛋白质合成相关通路蛋白表达的影响第35-36页
4 讨论与结论第36-41页
    4.1 ALA对C2C12细胞和小鼠腓肠肌蛋白质合成的影响第36-37页
    4.2 ALA对C2C12细胞蛋白质合成信号通路的影响第37-39页
        4.2.1 ALA对C2C12细胞蛋白质合成信号通路的影响第37页
        4.2.2 ALA对C2C12细胞蛋白质合成信号通路验证第37-39页
    4.3 ALA对C2C12细胞和小鼠腓肠肌炎症相关通路的影响第39-40页
    4.4 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-49页
附录第49-51页
读期间发表的论文和参加的科研课题第51页

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