中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-28页 |
1.1 棉铃虫及其抗药性分析 | 第11-13页 |
1.2 P-糖蛋白 | 第13-18页 |
1.2.1 ABC转运蛋白超家族 | 第13-16页 |
1.2.2 P-糖蛋白概述 | 第16页 |
1.2.3 P-糖蛋白的研究现状 | 第16-18页 |
1.3 细胞自噬基因ATG8 | 第18-23页 |
1.3.1 概念 | 第18-19页 |
1.3.2 细胞自噬方式 | 第19-20页 |
1.3.3 细胞自噬的发生过程 | 第20-21页 |
1.3.4 细胞自噬相关基因与Atg8 | 第21-22页 |
1.3.5 鳞翅目昆虫中Atg8的研究 | 第22-23页 |
1.4 高通量转录组测序 | 第23-27页 |
1.4.1 概况 | 第23-26页 |
1.4.2 转录组测序分析 | 第26页 |
1.4.3 高通量转录组测序在鳞翅目昆虫中的研究 | 第26-27页 |
1.5 本研究的内容、目的及技术路线 | 第27-28页 |
第二章 棉铃虫转录组和2-十三烷酮诱导表达谱的建立与分析 | 第28-40页 |
2.1 引言 | 第28页 |
2.2 材料与方法 | 第28-34页 |
2.2.1 棉铃虫及饲养方法 | 第28-29页 |
2.2.2 实验试剂和仪器 | 第29页 |
2.2.3 高通量转录组测序 | 第29-30页 |
2.2.4 表达谱测序 | 第30-32页 |
2.2.5 筛选出与2-十三烷酮有关的棉铃虫多药耐药相关基因和自噬基因 | 第32页 |
2.2.6 荧光定量验证差异表达基因 | 第32-34页 |
2.2.7 数据分析与统计 | 第34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-37页 |
2.3.1 棉铃虫转录组的测序、组装及功能分析 | 第34-37页 |
2.3.2 棉铃虫转录组中MRP基因 | 第37页 |
2.4 讨论 | 第37-40页 |
第三章 P-糖蛋白在棉铃虫中的表达 | 第40-55页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 材料与方法 | 第40-47页 |
3.2.1 棉铃虫及饲养 | 第40页 |
3.2.2 实验试剂和仪器 | 第40页 |
3.2.3 P-糖蛋白基因全长的克隆 | 第40-47页 |
3.2.4 P-糖蛋白基因分析与进化树分析 | 第47页 |
3.2.5 荧光定量PCR | 第47页 |
3.2.6 数据分析与统计 | 第47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-53页 |
3.3.1 棉铃虫P-糖蛋白序列的克隆 | 第47-48页 |
3.3.2 棉铃虫P-糖蛋白进化树分析 | 第48-52页 |
3.3.3 棉铃虫P-糖蛋白在不同组织和不同发育阶段的表达规律 | 第52-53页 |
3.4 讨论 | 第53-55页 |
第四章 外源化合物诱导棉铃虫P-糖蛋白的表达 | 第55-70页 |
4.1 引言 | 第55页 |
4.2 材料与方法 | 第55-60页 |
4.2.1 供试棉铃虫及饲养 | 第55页 |
4.2.2 实验试剂和仪器 | 第55页 |
4.2.3 生物测定 | 第55-56页 |
4.2.4 荧光定量PCR | 第56页 |
4.2.5 免疫组化 | 第56-57页 |
4.2.6 RNAi棉铃虫P-糖蛋白基因 | 第57-60页 |
4.2.7 数据统计与分析 | 第60页 |
4.3 结果与分析 | 第60-68页 |
4.3.1 不同外源化合物诱导棉铃虫P-糖蛋白在组织中的表达 | 第60-64页 |
4.3.2 2-十三烷酮或阿维菌素诱导棉铃虫P-糖蛋白的免疫组化 | 第64页 |
4.3.3 干扰棉铃虫P-糖蛋白基因对2-十三烷酮以及阿维菌素耐受性的影响 | 第64-68页 |
4.4 讨论 | 第68-70页 |
第五章 细胞自噬基因ATG8在棉铃虫中的表达 | 第70-76页 |
5.1 引言 | 第70-71页 |
5.2 材料与方法 | 第71-72页 |
5.2.1 供试棉铃虫及饲养 | 第71页 |
5.2.2 实验试剂和仪器 | 第71页 |
5.2.3 Atg8基因的克隆 | 第71页 |
5.2.4 Atg8基因与进化树分析 | 第71页 |
5.2.5 关于Atg8的荧光定量PCR | 第71-72页 |
5.2.6 数据分析与统计 | 第72页 |
5.3 结果与分析 | 第72-75页 |
5.3.1 Atg8基因cDNA序列的克隆 | 第72-73页 |
5.3.2 棉铃虫Atg8进化树分析 | 第73-74页 |
5.3.3 棉铃虫Atg8在不同组织和不同发育阶段的表达规律 | 第74-75页 |
5.4 讨论 | 第75-76页 |
第六章 外源化合物诱导棉铃虫ATG8的表达 | 第76-85页 |
6.1 引言 | 第76页 |
6.2 材料与方法 | 第76-78页 |
6.2.1 供试棉铃虫及饲养 | 第76页 |
6.2.2 实验试剂和仪器 | 第76页 |
6.2.3 生物测定 | 第76-77页 |
6.2.4 荧光定量PCR | 第77页 |
6.2.5 细胞自噬现象的电镜观察 | 第77-78页 |
6.2.6 RNAi棉铃虫Atg8基因 | 第78页 |
6.2.7 数据统计与分析 | 第78页 |
6.3 结果与分析 | 第78-83页 |
6.3.1 外源化合物诱导棉铃虫P-糖蛋白在组织中的表达 | 第78-81页 |
6.3.2 干扰棉铃虫Atg8基因对2-十三烷酮以及阿维菌素耐受性的影响 | 第81-83页 |
6.3.3 细胞自噬现象的电镜观察 | 第83页 |
6.4 讨论 | 第83-85页 |
第七章 总结与展望 | 第85-88页 |
7.1 总结 | 第85-86页 |
7.1.1 P-糖蛋白的研究总结 | 第85页 |
7.1.2 Atg8的研究总结 | 第85-86页 |
7.1.3 P-糖蛋白与Atg8结果比对分析 | 第86页 |
7.2 本研究的创新点 | 第86页 |
7.3 问题与展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
作者简介 | 第100页 |