| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 英文缩写符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| ·膀胱癌的简介 | 第10页 |
| ·miRNAs简介 | 第10-12页 |
| ·DNA甲基化与miRNA | 第12-13页 |
| ·基因功能富集分析 | 第13-16页 |
| ·研究内容及意义 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16页 |
| ·研究的创新点 | 第16-17页 |
| ·研究思路 | 第17-19页 |
| ·课题思路 | 第17-18页 |
| ·实验设训路线 | 第18-19页 |
| 第二章 实验仪器与材料 | 第19-24页 |
| ·材料 | 第19-23页 |
| ·细胞株、细菌和质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第19-21页 |
| ·常用试剂和配方 | 第21页 |
| ·细胞培养用试剂 | 第21-23页 |
| ·仪器与设备 | 第23-24页 |
| 第三章 实验方法 | 第24-37页 |
| ·生物信息学预测 | 第24页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·BIU-87/5637细胞复苏 | 第24页 |
| ·BIU-87/5637细胞传代 | 第24页 |
| ·BIU-87/5637细胞冻存 | 第24-25页 |
| ·BIU-87/5637细胞转染 | 第25页 |
| ·RT-PCR | 第25-29页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·总RNA抽提 | 第26页 |
| ·总RNA浓度、纯度和完整性分析 | 第26-27页 |
| ·逆转录PCR | 第27-28页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| ·DNA甲基化酶抑制剂实验 | 第29页 |
| ·MSP/BSP实验 | 第29-34页 |
| ·基因组抽提 | 第29-30页 |
| ·亚硫酸盐修饰基因组 | 第30-31页 |
| ·半定量检测DNA甲基化水平 | 第31-32页 |
| ·DNA甲基化位点的鉴定 | 第32-34页 |
| ·microRNA对细胞的功能实验 | 第34-36页 |
| ·细胞周期检测 | 第34-35页 |
| ·MTT法检测细胞增殖 | 第35-36页 |
| ·划痕实验检测细胞迁移 | 第36页 |
| ·细胞水平caspase3/7活性测定 | 第36页 |
| ·统计学处理 | 第36-37页 |
| 第四章 结果与分析 | 第37-53页 |
| ·生物信息学预测膀胱癌中潜在受DNA甲基化调控的microRNAs | 第37-42页 |
| ·前体序列与CpG island存在重叠的microRNAs | 第37页 |
| ·与膀胱癌潜在相关的miRNAs | 第37-38页 |
| ·CpG miRs的功能富集分析 | 第38-42页 |
| ·实验验证膀胱癌中受DNA甲基化调控的miRNAs | 第42-47页 |
| ·DNA去甲基化药物5-Aza-CdR对膀胱癌细胞功能作用 | 第42-43页 |
| ·DNA去甲基化药物5-Aza-CdR对相关miRNAs表达影响 | 第43-47页 |
| ·microRNA的功能鉴定 | 第47-51页 |
| ·细胞周期检测结果 | 第47-48页 |
| ·caspase3/7细胞凋亡检测结果 | 第48-49页 |
| ·MTT法检测细胞增殖能力 | 第49页 |
| ·划痕实验检测细胞迁移能力 | 第49-51页 |
| ·hsa-miR-203的靶基因预测 | 第51-53页 |
| 第五章 讨论 | 第53-56页 |
| ·论文研究成果 | 第53-55页 |
| ·展望及后续工作 | 第55-56页 |
| 在读期间发表论文 | 第56-57页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
