| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 综述一 黄芪、黄芪甲苷及其常用理化检测方法研究进展 | 第11-17页 |
| 1 黄芪和黄芪甲苷 | 第11-12页 |
| 1.1 黄芪概述 | 第11页 |
| 1.2 黄芪甲苷概述 | 第11-12页 |
| 1.2.1 黄芪甲苷药理活性研究 | 第11-12页 |
| 1.2.2 黄芪甲苷毒性和安全性评价研究 | 第12页 |
| 1.2.3 黄芪甲苷药代动力学和组织分布研究 | 第12页 |
| 2 黄芪甲苷常用的理化检测方法 | 第12-13页 |
| 2.1 高效液相色谱法 | 第12页 |
| 2.2 薄层扫描法 | 第12-13页 |
| 2.3 紫外分光光度法 | 第13页 |
| 2.4 荧光法 | 第13页 |
| 参考文献 | 第13-17页 |
| 综述二 免疫分析法及在中药成分分析中的应用研究进展 | 第17-25页 |
| 1 免疫分析法 | 第17-19页 |
| 1.1 小分子人工抗原的合成 | 第17-18页 |
| 1.1.1 带有游离羧基的半抗原 | 第17-18页 |
| 1.1.2 含游离羟基的半抗原 | 第18页 |
| 1.1.3 带有游离氨基的半抗原 | 第18页 |
| 1.2 中药小分子抗体的制备 | 第18-19页 |
| 1.2.1 多克隆抗体 | 第18页 |
| 1.2.2 单克隆抗体 | 第18-19页 |
| 2 免疫分析法在中药分析中的应用研究进展 | 第19-21页 |
| 2.1 放射免疫分析 | 第19页 |
| 2.2 酶联免疫分析法 | 第19页 |
| 2.3 免疫亲和色谱 | 第19-20页 |
| 2.4 免疫芯片 | 第20页 |
| 2.5 荧光免疫分析法 | 第20页 |
| 2.6 免疫胶体金技术 | 第20页 |
| 2.7 免疫印迹技术 | 第20-21页 |
| 2.8 免疫组化 | 第21页 |
| 2.9 其他技术 | 第21页 |
| 参考文献 | 第21-25页 |
| 前言 | 第25-28页 |
| 1. 研究背景及意义 | 第25-26页 |
| 2. 研究内容 | 第26页 |
| 3. 创新点 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-28页 |
| 第一部分 黄芪甲苷人工抗原的合成鉴定及多克隆抗体的制备 | 第28-43页 |
| 1 实验材料 | 第28-30页 |
| 1.1 实验动物 | 第28页 |
| 1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 1.3 主要耗材及仪器 | 第28-29页 |
| 1.4 常用溶液的配制 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.1 黄芪甲苷(AST)人工抗原的合成 | 第30页 |
| 2.2 黄芪甲苷(AST)人工抗原的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.1 紫外扫描法 | 第30页 |
| 2.2.2 薄层色谱法 | 第30页 |
| 2.2.3 动物免疫 | 第30-31页 |
| 2.3 免疫后血清检测 | 第31-32页 |
| 2.3.1 间接ELISA法测定血清中的抗体效价 | 第31页 |
| 2.3.2 ic-ELISA法测定血清中的抗体特异性 | 第31-32页 |
| 2.3.3 交叉反应检测 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-39页 |
| 3.1 紫外扫描结果 | 第32-33页 |
| 3.2 薄层鉴定结果 | 第33页 |
| 3.3 动物免疫实验结果 | 第33-39页 |
| 3.3.1 抗血清效价 | 第33-34页 |
| 3.3.2 交叉反应率结果 | 第34页 |
| 3.3.3 ic-ELISA法测定血清中的抗体特异性 | 第34-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 4.1 人工抗原的合成 | 第39页 |
| 4.2 人工抗原的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3 免疫方法与策略 | 第40页 |
| 4.4 酶免疫分析法检验抗血清 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第二部分 黄芪甲苷单克隆抗体的制备 | 第43-52页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| 1.1 实验动物 | 第43页 |
| 1.2 细胞株 | 第43页 |
| 1.3 实验试剂 | 第43页 |
| 1.4 主要仪器及器械 | 第43页 |
| 1.5 细胞培养液的配制 | 第43-44页 |
| 2 实验方法 | 第44-46页 |
| 2.1 HAT敏感型小鼠骨髓瘤SP2/0细胞的准备 | 第44页 |
| 2.2 饲养层细胞的制备 | 第44页 |
| 2.3 免疫脾细胞的制备 | 第44页 |
| 2.4 融合用骨髓瘤细胞的制备 | 第44-45页 |
| 2.5 PEG法融合细胞 | 第45页 |
| 2.6 单克隆细胞的筛选 | 第45页 |
| 2.6.1 融合细胞的换液与初筛 | 第45页 |
| 2.6.2 杂交瘤细胞的单克隆化或亚克隆化 | 第45页 |
| 2.7 杂交瘤细胞的扩大培养与冻存 | 第45-46页 |
| 2.8 单克隆抗体的大量生产 | 第46页 |
| 3 实验结果 | 第46-48页 |
| 3.1 细胞融合结果 | 第46页 |
| 3.2 杂交瘤细胞筛选结果 | 第46-48页 |
| 3.3 腹水法大量生产单克隆抗体结果 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 细胞融合 | 第48-49页 |
| 4.1.1 SP2/0骨髓瘤细胞的培养 | 第48页 |
| 4.1.2 融合方法 | 第48-49页 |
| 4.1.3 融合反应条件 | 第49页 |
| 4.2 杂交瘤细胞的筛选 | 第49页 |
| 4.3 抗体的制备 | 第49-50页 |
| 4.3.1 体内法 | 第49-50页 |
| 4.3.2 体外法 | 第50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 第三部分 黄芪甲苷单克隆抗体的鉴定 | 第52-70页 |
| 1 实验材料 | 第52-54页 |
| 1.1 主要试剂 | 第52页 |
| 1.2 主要器材及仪器 | 第52-53页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第53-54页 |
| 2 实验方法 | 第54-57页 |
| 2.1 Ic-ELISA法检测单克隆抗体的特异性 | 第54页 |
| 2.2 亲和层析法-HPLC联用鉴定单克隆抗体 | 第54-57页 |
| 2.2.1 腹水纯化 | 第54-55页 |
| 2.2.2 单克隆抗体的亚型鉴定 | 第55页 |
| 2.2.3 免疫亲和色谱柱的制备 | 第55-56页 |
| 2.2.4 蛋白质定量法评价抗体偶联效率 | 第56页 |
| 2.2.5 上柱样品的前处理 | 第56页 |
| 2.2.6 免疫亲和色谱敲除法鉴定单克隆抗体 | 第56-57页 |
| 2.2.7 高效液相法辅助鉴定单克隆抗体 | 第57页 |
| 3 实验结果 | 第57-67页 |
| 3.1 ic-ELISA法检测腹水结果 | 第57-64页 |
| 3.1.1 不同pH条件下的ic-ELISA法检测结果 | 第57-59页 |
| 3.1.2 不同离子强度下的ic-ELISA法检测结果 | 第59-60页 |
| 3.1.3 添加有机洛剂及其他助洛剂时的ic"EUSA法检测结果 | 第60-64页 |
| 3.2 腹水纯化结果 | 第64页 |
| 3.3 抗体亚型鉴定结果 | 第64页 |
| 3.4 抗体偶联率测定结果 | 第64-65页 |
| 3.5 免疫亲和色谱-HPLC法联用鉴定单克隆抗体结果 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| 4.1 基质条件对ELISA(ic-ELISA)法检测的影响 | 第67-68页 |
| 4.2 免疫亲合柱-高效液相色谱联用 | 第68页 |
| 4.3 抗体的纯化 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 结语 | 第70-71页 |
| 附录：缩略词及中英文对照表 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 个人简历 | 第74页 |
