中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
前言 | 第14-26页 |
1. 脂肪酸与游离脂肪酸 | 第14页 |
2. 代谢综合征与游离脂肪酸 | 第14-15页 |
3. 7跨膜受体与游离脂肪酸 | 第15-16页 |
4. 棕榈酸 | 第16页 |
5. Arrestin家族 | 第16-19页 |
5.1 Arrestins与7TMRs脱敏 | 第17-18页 |
5.2 Arrestins与7TMRs内化 | 第18页 |
5.3 Arrestins与7TMRs泛素化 | 第18页 |
5.4 β-Arrestin 2与7TMRs相关信号通路 | 第18-19页 |
6. PA与Toll样受体 | 第19-20页 |
7. Akt | 第20-21页 |
8. GSK-3β | 第21-22页 |
9. 细胞凋亡 | 第22-26页 |
9.1 外源性途径 | 第23页 |
9.2 内源性途径 | 第23-26页 |
实验材料和方法 | 第26-56页 |
1. 实验材料 | 第26页 |
2. 试剂和耗材 | 第26-29页 |
3. 仪器设备 | 第29-30页 |
4. 主要溶液及试剂配方 | 第30-40页 |
4.1 H9c2细胞培养用试剂及配方 | 第30-33页 |
4.2 磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B, SRB)染色法用试剂及配方 | 第33页 |
4.3 Hoechst 33258染色用试剂及配方 | 第33-34页 |
4.4 大肠杆菌转化、培养、冻存用试剂及配方 | 第34-36页 |
4.5 核酸电泳用试剂及配方 | 第36页 |
4.7 Western Blot实验用试剂及配方 | 第36-37页 |
4.8 转膜所用试剂及配方 | 第37-40页 |
5. 实验方法 | 第40-56页 |
5.1 细胞培养 | 第40-42页 |
5.2 SRB检测细胞存活率 | 第42-43页 |
5.3 Hoechst 33258细胞核染色观察细胞凋亡率 | 第43页 |
5.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第43-44页 |
5.5 Western Blot实验 | 第44-47页 |
5.6 qR-PCR实验 | 第47-51页 |
5.7 质粒转染 | 第51-52页 |
5.8 siRNA转染 | 第52页 |
5.9 免疫荧光 | 第52-53页 |
5.10 免疫共沉淀 | 第53-54页 |
5.11 统计学分析 | 第54-56页 |
实验结果 | 第56-60页 |
1. PA以浓度梯度依赖的方式抑制H9c2细胞存活率 | 第56页 |
2. PA以浓度梯度依赖的方式诱导H9c2细胞凋亡的发生 | 第56页 |
3. PA诱导H9c2细胞凋亡过程中,β-arrestin2蛋白含量发生下调,并且具有显著的时间梯度和浓度梯度依赖性 | 第56-57页 |
4. 在PA诱导H9c2细胞凋亡过程中,β-arresitn 2的mRNA含量并无明显变化 | 第57页 |
5. 过表达外源性β-arrestin 2促进了PA诱导的H9c2细胞凋亡 | 第57页 |
6. 在PA诱导的H9c2细胞凋亡过程中,Akt的正常活化受阻,p-GSK(ser-9)无变化 | 第57-58页 |
7. LiCl能够显著的抑制PA诱导的H9c2细胞凋亡 | 第58页 |
8. 干扰GSK-3β能够显著的抑制PA诱导的H9c2细胞凋亡 | 第58-60页 |
讨论 | 第60-64页 |
附图 | 第64-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
致谢 | 第82-84页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第84-85页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第85页 |