| 博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-28页 |
| 1.1 MADS-box基因研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1 MADS-box基因简介 | 第13-14页 |
| 1.1.2 调控花器官发育的ABCE模型 | 第14-16页 |
| 1.1.3 MADS-box基因与开花时间 | 第16-17页 |
| 1.2 KNOX家族 | 第17-22页 |
| 1.2.1 TALE家族 | 第17-18页 |
| 1.2.2 Ⅰ类KNOX基因功能介绍 | 第18-20页 |
| 1.2.3 KNOX-BELL间的蛋白互作 | 第20-21页 |
| 1.2.4 Ⅰ类KNOX基因功能与激素的联系 | 第21-22页 |
| 1.3 GA的生物合成与信号转导 | 第22-24页 |
| 1.3.1 GA的生物合成 | 第22-23页 |
| 1.3.2 DELLA蛋白 | 第23-24页 |
| 1.3.3 GA对细胞分裂和延伸的影响 | 第24页 |
| 1.4 花柄的发育研究 | 第24-26页 |
| 1.4.1 ERECTA调节花柄发育的模式 | 第24-25页 |
| 1.4.2 BP/KNAT1调节花柄发育的模式 | 第25-26页 |
| 1.4.3 其他影响花柄发育的基因 | 第26页 |
| 1.5 本研究意义内容及技术路线 | 第26-28页 |
| 1.5.1 研究内容和意义 | 第26-27页 |
| 1.5.2 研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 NtSVP对烟草花柄发育的影响 | 第28-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 酶及其它实验耗材 | 第28页 |
| 2.1.3 菌株与载体 | 第28页 |
| 2.1.4 引物 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 烟草的种植 | 第29页 |
| 2.2.2 烟草基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.3 烟草总RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.4 RT-PCR | 第30页 |
| 2.2.5 反转录效率检测 | 第30-31页 |
| 2.2.6 实时定量PCR | 第31页 |
| 2.2.7 石蜡切片制备 | 第31-32页 |
| 2.2.8 表型观察和组织细胞学分析 | 第32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-39页 |
| 2.3.1 NtSVP的序列分析 | 第32-34页 |
| 2.3.2 NtSVP的组织特异性表达 | 第34-35页 |
| 2.3.3 NtSVP转基因烟草的表型 | 第35-36页 |
| 2.3.4 NtSVP对烟草花柄发育的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.5 NtSVP转基因烟草花柄的组织细胞学分析 | 第37-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 NtBPL控制烟草花柄的延伸 | 第40-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 3.1.2 酶及其它实验耗材 | 第40页 |
| 3.1.3 菌株与载体 | 第40页 |
| 3.1.4 引物 | 第40-41页 |
| 3.1.5 植物组培所需培养基和激素母液的配制 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-48页 |
| 3.2.1 目标基因的克隆 | 第41-43页 |
| 3.2.2 农杆菌转化 | 第43-44页 |
| 3.2.3 构建NtBPL过表达载体 | 第44-45页 |
| 3.2.4 构建NtBPL-RNAi载体 | 第45-46页 |
| 3.2.5 烟草转化 | 第46-47页 |
| 3.2.6 转基因烟草的PCR鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3 结果分析 | 第48-56页 |
| 3.3.1 NtBPL在NtSVP转基因烟草花柄中表达量检测 | 第48-49页 |
| 3.3.2 NtBPL的序列分析 | 第49-51页 |
| 3.3.3 NtBPL的时空表达分析 | 第51-52页 |
| 3.3.4 NtBPL转基因烟草植株鉴定 | 第52-53页 |
| 3.3.5 NtBPL转基因烟草表型观察与分析 | 第53-54页 |
| 3.3.6 NtBPL对烟草花柄延伸的影响 | 第54页 |
| 3.3.7 NtBPL转基因烟草花柄的组织细胞学分析 | 第54-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 烟草花柄发育过程中NtSVP对NtBPL的调控 | 第57-73页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第57页 |
| 4.1.2 试剂及其它实验耗材 | 第57页 |
| 4.1.3 菌株与载体 | 第57页 |
| 4.1.4 引物 | 第57页 |
| 4.1.5 各种试剂和培养基的配制 | 第57-58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-67页 |
| 4.2.1 转基因烟草的杂交 | 第58页 |
| 4.2.2 NtBPL启动子的克隆 | 第58-60页 |
| 4.2.3 酵母单杂交 | 第60-62页 |
| 4.2.4 NtSVP-MBP融合蛋白的表达 | 第62-63页 |
| 4.2.5 凝胶阻滞 | 第63-65页 |
| 4.2.6 转录活性分析 | 第65-67页 |
| 4.3 实验结果 | 第67-72页 |
| 4.3.1 杂交烟草的花柄表型 | 第67-68页 |
| 4.3.2 NtBPL启动子的克隆 | 第68页 |
| 4.3.3 酵母单杂交 | 第68-69页 |
| 4.3.4 凝胶阻滞实验 | 第69-70页 |
| 4.3.5 通过双荧光报告系统分析NtSVP的转录活性 | 第70-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-73页 |
| 第五章 烟草基因芯片分析NtBPL的下游基因 | 第73-80页 |
| 5.1 实验材料 | 第73页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第73页 |
| 5.1.2 试剂与耗材 | 第73页 |
| 5.2 实验方法 | 第73-74页 |
| 5.2.1 实验流程 | 第73页 |
| 5.2.2 差异基因的筛选 | 第73页 |
| 5.2.3 差异基因的注释和分析 | 第73-74页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第74-79页 |
| 5.3.1 差异基因的qRT-PCR检测 | 第74页 |
| 5.3.2 GO功能富集分析 | 第74-76页 |
| 5.3.3 差异基因MapMan分析 | 第76-77页 |
| 5.3.4 NtSVP-NtBPL可以通过影响GA来调控花柄延伸 | 第77-78页 |
| 5.3.5 CK不参与NtSVP-NtBPL对花柄延伸的调控 | 第78-79页 |
| 5.4 讨论 | 第79-80页 |
| 第六章 全文结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 作者简历 | 第94页 |
