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RNAi介导的甜菜夜蛾性信息素合成激活肽及其受体基因的功能鉴定

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 文献综述第13-23页
    1.1 甜菜夜蛾的发生与危害第13页
    1.2 鳞翅目昆虫性信息素的生物合成与调控第13-17页
        1.2.1 鳞翅目昆虫的性信息素的组份第13-14页
        1.2.2 甜菜夜蛾的性信息素组份第14页
        1.2.3 鳞翅目昆虫性信息素生物合成的调控第14-17页
    1.3 鳞翅目昆虫PBAN与PBANR的研究现状第17-20页
        1.3.1 PBAN的研究现状第17-18页
        1.3.2 PBANR的研究现状第18-20页
    1.4 RNAi在揭示基因功能中应用进展第20-22页
        1.4.1 RNAi的作用机理第21页
        1.4.2 RNAi在鳞翅目昆虫中的应用进展第21-22页
    1.5 研究目的与意义第22-23页
第二章 甜菜夜蛾PBANR基因的功能鉴定第23-46页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 供试虫源及饲养方法第23页
        2.1.2 主要试剂及试剂盒第23页
        2.1.3 常用仪器设备第23-24页
    2.2 实验方法第24-32页
        2.2.1 dsRNA的设计第24页
        2.2.2 dsRNA的制备第24-28页
        2.2.3 siRNA的合成及使用方法第28页
        2.2.4 注射方法、部位、龄期第28-29页
        2.2.5 注射体积的确定第29页
        2.2.6 试虫处理及实验方法第29页
        2.2.7 荧光定量PCR检测RNAi效应第29-32页
    2.3 结果与分析第32-45页
        2.3.1 dsRNA的制备第32-33页
        2.3.2 dsRNA及siRNA注射方法及龄期的确定第33-34页
        2.3.3 注射体积的确定第34-35页
        2.3.4 基因定量片段的确认第35-36页
        2.3.5 定量PCR特异性引物的筛选第36-37页
        2.3.6 相对标准曲线的制备第37-41页
        2.3.7 雌蛹前胸注射dsRNA后PBANR基因的相对表达量差异第41-42页
        2.3.8 雌蛹前胸注射R001-003后PBANR基因的相对表达量差异第42-43页
        2.3.9 雌蛾腹部注射R001-003后PBANR基因的相对表达量差异第43-44页
        2.3.10 雌蛾腹部注射R004-006后PBANR基因的相对表达量差异第44-45页
    2.4 小结第45-46页
第三章 甜菜夜蛾PBAN基因的功能鉴定第46-58页
    3.1 实验材料第46页
    3.2 实验方法第46-49页
        3.2.1 siRNA的合成及使用方法第46页
        3.2.2 注射方法、部位、龄期第46页
        3.2.3 注射体积的确认第46页
        3.2.4 试虫处理及实验方法第46页
        3.2.5 荧光定量PCR检测RNAi效应第46-49页
        3.2.6 甜菜夜蛾PBAN基因沉默后生物学测定第49页
    3.3 结果与分析第49-57页
        3.3.1 基因定量片段的确认第49页
        3.3.2 定量PCR特异性引物的筛选第49-50页
        3.3.3 相对标准曲线的制备第50-54页
        3.3.4 雌蛹前胸注射N001、N002后PBAN基因的相对表达量差异第54-55页
        3.3.5 甜菜夜蛾PBAN基因沉默后生物学特性的变化第55-57页
    3.4 小结第57-58页
第四章 讨论第58-61页
    4.1 PBANR基因dsRNA的合成第58页
    4.2 微量注射第58页
    4.3 甜菜夜蛾脑-咽下神经节复合体总RNA的提取第58-59页
    4.4 荧光定量PCR扩增效率的优化第59页
    4.5 RNAi干涉效果的影响因素第59-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
作者简历第67页

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