| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 蜡梅研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 我国蜡梅栽培简史 | 第11页 |
| 1.1.2 世界蜡梅属植物的种类与分布 | 第11-12页 |
| 1.1.3 中国蜡梅属植物的种类与分布 | 第12页 |
| 1.1.4 蜡梅的品种分类研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.5 蜡梅的生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.6 蜡梅分子生物学研究 | 第14页 |
| 1.1.7 蜡梅的应用研究 | 第14-15页 |
| 1.2 mRNA降解的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 mRNA的降解方式 | 第16-18页 |
| 1.3 脱腺苷酸化酶的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.4 CAF1基因的研究进展 | 第21-24页 |
| 第2章 引言 | 第24-27页 |
| 2.1 研究背景 | 第24-25页 |
| 2.2 研究目的、内容和意义 | 第25-26页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第26-27页 |
| 第3章 蜡梅脱腺苷酸化酶基因CpCAF1的克隆和分子特征分析 | 第27-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 蜡梅cDNA文库及植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第27-28页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第28页 |
| 3.1.5 自配的主要试剂 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-35页 |
| 3.2.1 EST序列特征分析及目标克隆子的鉴定 | 第29页 |
| 3.2.2 蜡梅脱腺苷酸酶基因CpCAF1 cDNA序列的获得 | 第29-34页 |
| 3.2.3 蜡梅脱腺苷酸化酶基因CpCAF1的生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.3.1 蜡梅CpCAF1基因全长cDNA的获得及其序列特征 | 第35-36页 |
| 3.3.2 蜡梅CpCAF1基因编码蛋白同源性分析 | 第36-38页 |
| 3.3.3 蜡梅CpCAF1基因编码蛋白的基本特征预测分析 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第4章 蜡梅CpCAF1基因的表达特性分析 | 第41-52页 |
| 4.1 实验材料 | 第41页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 蜡梅不同组织、不同时期及不同胁迫处理材料的采集 | 第41-42页 |
| 4.2.2 总RNA的提取及cDNA第一链的获得 | 第42页 |
| 4.2.3 CpCAF1基因表达特性的实时荧光定量分析 | 第42-44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-51页 |
| 4.3.1 蜡梅总RNA提取 | 第44-45页 |
| 4.3.2 CpCAF1基因的表达特性分析 | 第45-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-52页 |
| 第5章 蜡梅CpCAF1基因表达载体的构建及拟南芥遗传转化研究 | 第52-80页 |
| 5.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 5.1.2 载体及菌株 | 第52页 |
| 5.1.3 试剂盒及主要试剂 | 第52页 |
| 5.1.4 自配的主要试剂 | 第52-53页 |
| 5.2 实验方法 | 第53-65页 |
| 5.2.1 蜡梅CpCAF1基因植物超表达载体的构建 | 第53-55页 |
| 5.2.2 农杆菌EHA105冻融法感受态的制备 | 第55页 |
| 5.2.3 冻融法转化农杆菌EHA105感受态细胞 | 第55-56页 |
| 5.2.4 农杆菌转化子的PCR鉴定及反转化大肠杆菌鉴定 | 第56页 |
| 5.2.5 花序侵染法转化拟南芥 | 第56-57页 |
| 5.2.6 转基因拟南芥的筛选鉴定 | 第57-59页 |
| 5.2.7 转CpCAF1基因拟南芥的表型观察 | 第59页 |
| 5.2.8 转CpCAF1基因拟南芥的冷害胁迫研究 | 第59-62页 |
| 5.2.9 非损伤微测技术 | 第62-65页 |
| 5.3 结果与分析 | 第65-77页 |
| 5.3.1 蜡梅CpCAF1基因植物表达载体的构建 | 第65-66页 |
| 5.3.2 转基因拟南芥的筛选鉴定 | 第66-69页 |
| 5.3.3 转基因拟南芥表型观察 | 第69-74页 |
| 5.3.4 转基因拟南芥的冷害胁迫研究 | 第74-76页 |
| 5.3.5 CpCAF1基因对拟南芥钾分子机理 | 第76-77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-80页 |
| 5.4.1 蜡梅CpCAF1基因参与拟南芥的生长发育调控 | 第77-78页 |
| 5.4.2 蜡梅CpCAF1基因增强拟南芥抗寒性 | 第78页 |
| 5.4.3 蜡梅CpCAF1基因影响拟南芥根系对钾离子吸收 | 第78-80页 |
| 第6章 总结 | 第80-83页 |
| 6.1 主要结果 | 第80-82页 |
| 6.1.1 CpCAF1基因的结构特征和编码蛋白特征 | 第80页 |
| 6.1.2 CpCAF1基因在蜡梅中的表达特征分析 | 第80-81页 |
| 6.1.3 CpCAF1基因转拟南芥的遗传研究 | 第81-82页 |
| 6.2 下一步计划 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
